Kim, Young Jin;Lee, Kwang Won;Kim, Hag Sin;Cheong, Young Keun;Park, Kwang Geun;Kim, Kee Jong
Korean Journal of Breeding Science
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v.43
no.1
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pp.50-55
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2011
The introduction of doubled haploid (DH) approach into breeding programs has reduced the times and population sizes required for the production of pure lines. We carried out the experiment for development on effective method of producing haploid in wheat. Emasculated spikelets of wheat were pollinated with maize pollen and cultured in the solution containing 40 g/L sucrose and 2,4-D, NAA, 2,4,5-T and dicamba 24 h after pollination, and then incubated until embryo rescue. Fourteen to sixteen days after pollination, the embryos are excised and cultured in half-strength MS basal medium supplemented with 20 g/L sucrose and 1 mg/L NAA. The type of plant growth regulators was found to be most significant in production of haploid plants. The application of synthetic auxins to pollinated florets, stimulates haploid embryo development to a stage where the embryos can be rescued onto nutrient media. The percentage of seeded florets was significantly affected by 100 mg/L 2,4-D, 150 mg/L 2,4,5-T and 50 mg/L dicamba. The percentage of embryos formed was significantly increased by treatment with 2,4-D and 2,4,5-T at 100 mg/L, and dicamba at 50 mg/L, but the treatments with 150 mg/L 2,4-D inhibited embryo development and plant regeneration. The optimum application time of plant growth regulators was 24 hrs after pollination.
This study was conducted to clarify the acclimatization rate and ploidy level of anther culture-derived plants in broccoli. The acclimatization rate from 71.4 to 100% was obtained from 7 varieties in 2 years. It was possible to identify the ploidy of the Plants obtained through anther culture by measuring the number of chloroplast in the guard cell. The average numbers of chloroplasts per guard cell in haploid diploid, and tetraploid were 8.5, 13.5 and 18.5, respectively. The regenerated plants could be classified based on these results into 47.1-51.3% of haploids, 47.9∼51.7%, diploid, and 0.8∼l.2% of tetraploids.
This study was carried out to select cadmium resistant cell lines from leaf-derived calli of diploid and haploid of Nicotiana tabacum cv. BY4, for understanding adaptation mechanism of plants in cadmium contaminated environment. suspended cell clumps were plated onto selection medium containing 0 to 2,000 $\mu$M cadmium. Cadmium resistant colonies were formed on the selection medium after 3 or 4 weeks of culture. The minimum inhibition concentration (MIC) of cadmium on colony formation were 300 $\mu$M in diploid and 200 $\mu$M in haploid plants, respectively. In order to test the resistance to cadmium, selected cell line on MIC were transferred to medium containing high concentration of cadmium. The selected cell lines, especially haploid cell line, were resistant an the high concentration of cadmium. And dry weight, ash weight, and cadmium contents of cell were increased. These results indicated that the selected cell lines showed higher resistance of cadmium than control cells, and haploid plant is more resistant than diploid plant on medium with cadmium.
Anthers of hybrids and inbred lines of Chinese cabbage (Brassica campestris ssp. pekinensis) were inoculated on the modified solid or liquid B$_{5}$ medium after several pre-treatments. Anthers were then maintained at 25 $^{\circ}C$ after being subjected to various post-treatment. Somatic embryos began to appear 9 days after inoculation and ended at 13th days. Low temperature pre-treatment did not increase embryoid production whereas high post-treatment temperature of 4$0^{\circ}C$ or 45$^{\circ}C$ enhance the production. There were considerable levels differences in embryogenesis between lines used, but not between the culture methods. Somatic embryo yield was also increased by subjecting anthers to one day at 35$^{\circ}C$ and then another one day at 3$0^{\circ}C$ after plating. Histological observations showed several stages in haploid development ranging from a few celled to large multiple-celled embryoids.s.
Park, Sang-Yong;Lee, Yoon-A;Nam, Yoon-Kwon;Bang, In-Chul
Journal of Aquaculture
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v.20
no.3
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pp.184-189
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2007
Treatment conditions for the induced diploid gynogenesis, a maternal-exclusive form of artificial parthenogenetic reproduction, were optimized in bagrid catfish (Leiocassis ussuriensis, Siluriformes). Optimal amounts of ultraviolet (UV) irradiation for the genetic inactivation of spermatozoa in bagrid catfish and Pseudobagrus fulvidraco were proven to be ranged from 3,600 to 4,800 $ergs/mm^2$ based on the examination of viability of embryos and haploid incidence. Haploid embryos were restored to diploidy by preventing the extrusion of the second polar body using cold shock treatment. Thermal treatments (4 or $6^{\circ}C$ for 30, 40 or 50 min) were carried out 3, 5 or 7 min post insemination. Best scores for embryo viability (38.6% of total eggs taken) and incidence of normal diploidy (87.9% of hatched larvae) were observed at the embryo group treated at $4^{\circ}C$ for 40 min, 5 min after insemination. Restoration of gynogenetic diploidy was confirmed based on the absence of haploid syndrome, cell size and/or nucleolar organizing region (NOR) counts.
The experiments were conducted to establish the effective barley haploid production system using interspecific crosses. Three spring barley cultivars. Bruce. Klages and Rodeo were used for this experiment. 1, 687 florets of three barley cultivars were crossed with bulbosum pollens. 1, 079 seeds were harvested and obtained 834 embryos so that seed set rate and embryo production rate were 64% and 77%, respectively. IAA effect was superior to NAA for root development and 1 ppm concentration of IAA gave the best result among five concentrations; 0ppm, 1ppm., 5ppm, 10ppm and 30ppm.
Bulbosum method, which haploids are developed by pollinating with H. bulbosum have been productive to be recommended as an effective method for the production of genetically stable normal barley hybrids. The purpose of this study is to investigate several characters of H. bulbosum, seed set and embryo development rate pollinated with H. bulbosum in order to establish a method for improvement of embryo development and to find conditions favoring plant development from the embryos cultured in vitro. Three lines of H. bulbosum used as pollinators: GBC(2${\times}$), Spenish diploid(2${\times}$) and var. Jaaska (4${\times}$) were morphologically similar, having characteristically narrow leaves, narrow and long culms, long spikes and anthesis duration in comparison with H. vulgare. H. bulbosum, var. Jaaska(4${\times}$) on being pollinated to barley cultivars, increased embryo formation by 8% and plant development in vitro by three times compared to the other diploid lines. the plants developed were not normal barley hybrids but had some H. bulbosum chromosomes uneliminated, indicating that the line was unstable as a pollinator to induce barley haploids.
Calli were induced on MS medium supplemented with 0.5 mg/L 2,4-D by using the leaf explants of haploid which were derived from the diploid and haploid of Nicotiana tabacum cv BY4. These calli were subcultured on MS medium with the combination of 2.0 mg/L 2,4-D, 1.0 mg/L kinetin and 0.1 mg/L BAP. Cell propagation of diploid plants were good in a combination of 2.0 mg/L 2,4-D, 0.1mg/L BAP in vitro conditions, suspension cultures were conducted in equal condition. Homogenized suspension cultured cells were smeared 2.0 mL each on MS medium with 0~100 $\mu$M PFP, to select the resistant colony to PFP, and were examined after 10d, 20d and 30d. Measurment of fresh weight of cells after 30d of culture shows that with more concentration of PFP in medium the fresh weight of the cells decreased. In case of diploid, selected callus was the highest in vitro treated with 5 $\mu$M PFP. It was higher than control until 100 $\mu$M PFP. The active degree of catalase was the highest in vitro with 5 $\mu$M PFP but the lowest in vitro with 10 $\mu$M PFP on the other hand, in case of haploid plant, the active degree of peroxidase and catalase was the highest in vitro treated with 50 $\mu$M PFP. It's sure that enzyme active degree of between diploid and haploid had big differences.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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