Enzyme activities and phenolic compound were compared to investigate the physiological characteristics during shoot formation from diploid and haploid of Nicotiana tabacum w BY4. The Nakata medium with 1.0 mg/L IAA, 0.5 mg/L Kinetin and 3 g/L activie carbon was excellent to induce the haploid plants from the middle size anther within 30 days after culture. The MS medium with 0.5 mg/L 2,4-D was good for callus induction from leaf explants of diploid and haploid, and a lot of plane were regenerated from calli on the MS medium supplemented with 2.0 mg/L BAE Activities of peroxidase for both of diploid and haploid plane were the highest at 2.0mg/L BAP Activities of IAA oxidase and catalase of haploid Plants were high or than those of diploid plants. On the other hand, activity of peroxidase of haploid plants were lower than those of diploid plants.
Park, Yoon-Jung;Kim, Kwang-Soo;Jang, Young-Seok;Kim, Chul-Woo;Bang, Jin-Ki
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.51
no.spc1
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pp.237-241
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2006
This experiment was carried out comparison with haploid plants productivity by microspore culture among domestic cultivars of Brassica napus L. Isolated microspore from flower buds were cultured on NLN medium supplemented with 13% sucrose, $0.05mg/{\ell}$ BA and $0.5mg/{\ell}$ NAA. Genotype was important factor in haploid embryo productivity 'Tamlayuchae' showed the highest haploid embryo production frequency (176 embryos formed from 1 flower bud). But, 'Hallayuchae' and 'Youngsanyuchae' were not generated embryo even cell division. When suspension culture on NLN liquid medium at 100 rpm, embryos were developed multilobe abnormal embryo cluster. Multilobe abnormal embryos on MS medium basal solid medium were regenerated multiple shoots. Regenerated haploid plant with well developed shoots and roots on MS basal medium were successfully transferred to pots.
Production of haploids in vitro anther culture of Nicotiana tabacum L. was oriented in a large number on a chemically defined culture medium. The haploids were screened for T.M.V. resistance and the segregating ratio in F$_1$ were in good agreement with the expected ratio.
Lee, Seulki;Kim, Jung Sun;Kang, Sang-Ho;Sohn, Seong-Han;Won, So Youn
Journal of Plant Biotechnology
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v.43
no.1
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pp.12-20
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2016
Advances in DNA sequencing technologies have contributed to revolutionary understanding of many fundamental biological processes. With unprecedented cost-effective and high-throughput sequencing, a single laboratory can afford to de novo sequence the whole genome for species of interest. In addition, population genetic studies have been remarkably accelerated by numerous molecular markers identified from unbiased genome-wide sequences of population samples. As sequencing technologies have evolved very rapidly, acquiring appropriate individual plants or populations is a major bottleneck in plant research considering the complex nature of plant genome, such as heterozygosity, repetitiveness, and polyploidy. This challenge could be overcome by the old but effective method known as haploid induction. Haploid plants containing half of their sporophytic chromosomes can be rapidly generated mainly by culturing gametophytic cells such as ovules or pollens. Subsequent chromosome doubling in haploid plants can generate stable doubled haploid (DH) with perfect homozygosity. Here, classical methodology to generate and identify haploid plants or DH are summarized. In addition, haploid induction by epigenetic regulation of centromeric histone is explained. Furthermore, the utilization of haploid plant in the genomics era is discussed in the aspect of genome sequencing project and population genetic studies.
We evaluated a possibility of the use of chloroplast number per guard cell pairs as a measure for ploidy level in the different ploidy levels of tobacco plant (Nicotiana tabacum L. cv. BY-4) . The guard-cell chloroplast numbers of leaves of haploid plant were a half of wild-type plant. Furthermore, the number of chloroplast per guard cell pairs of the leaves of doubled-haploid plant increased in two times compared with that of haploid plant. In addition, the chloroplast number was not changed in the F$_1$ progenies. The change of the chloroplast number by leaf stage was not observed. The results indicate that there is a strong relationship between ploidy level (2x and 4x) and chloroplast number per guard cell pairs. This relationship was also, observed in both in vitro and pot cultured plants. It was determined that the measurement of chloroplast number in guard cells of leaf epidermis is simple to use and less labour intensive, and hence can be considered a practical alternative to the chromosome counting methods or flow cytometry in the tobacco plant.
Proceedings of the Korea Information Processing Society Conference
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2007.11a
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pp.272-273
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2007
현대 유전체학 기술의 진보는 생물학적으로 중요한 의미를 갖는 생물들의 유전체 서열의 규명 genome sequencing)에 힘입은 바 크다. 기존의 유전체 서열결정법은 주로 염기변이율이 낮은 생물들에 초점을 맞추어 왔다. 하지만 염기변이율이 높은 생물들의 유전체 염기서열을 결정할 필요가 높아짐에 따라 이를 위한 방법론에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 염기변이율이 높은 생물들의 이배체 (diploid) 유전체 서열이 효과적으로 결정될 수 있을 경우 기존의 유전체 서열비교의 방법론에도 변화가 요청되고 있는 실정이다. 기존의 유전체 서열비교 (whole-genome alignment) 방법론은 반수체 (haploid) 유전체들의 서열비교을 위해 개발되었지만, 염기변이율이 높은 생물들의 유전체 서열비교에는 반수체 유전체들 비교에 특화된 도구들이 필요하다. 또한 현재 서열비교를 시각화하는 소프트웨어들도 반수체 유전체 비교를 위해 개발된 실정이다. 본 논문의 목표는 이배체 유전체 서열을 비교하는 방법론을 개발을 용이하기위해 이배체 유전체의 서열을 생성하는 도구를 개발하는 것이다. 개발된 도구는 실제 일어날 수 있는 염기변이와 genomic rearrangement를 사용자의 입력을 받아 다수의 생물들의 유전체 서열을 생성해 낸다. 이를 통해 이배체 유전체 서열을 비교하는 도구의 개발을 용이하게 하는데 초첨을 맞추고 있다.
Variation in ploidy level of regenerated plants from rice anthers and effective diploidization methods of haploid plants were studied to obtain basic information in rice breeding through anther culture. In a total of 574 plants derived from anther culture using 14F$_1$ hybrids as materials, there were 49.7% haploids, 48.6% diploids and 1.7% polyploids, respectively. The frequency of haploids in Japonica/Indica crosses was 60.6%, and that of Japonica/Japonica crosses was 43.0% in average. Inclusion of 2.4-D or NAA as phytohormone may increase the frequency of haploids, but kinetin may increase the frequency of diploids. The rate of auto-diploidization by tiller separation of haploid plants showed 8.2% in average. The rate of diploidization by leaf-sheath injection of colchicine showed 18.8% in average. Morphological characters of haploids plants showed that 64.6% in culm length, 63.4% in panicle length, 68% in flag leaf length, and 74.4% in flag leaf width compared to diploid plants. These apparent morphological differences will contribute to identify the ploidy of plants derived from rice anther culture.
This study was conducted to investigate the utility and agronomic characteristics and use of cytoplasmic. male-sterile (CMS) haploid plants derived from interspecific cross between (male-sterile NC82$\times$burley21) F$_1$ plant (Nicotiana tabacum L.) and Nicotiana africana. Abundant seeds of high germinability were obtained when Nicotiana tabacum (cytoplasmic male-sterile F$_1$ plants) is pollinated by Nicotiana africana. Most of seedlings died at the cotyledonary stage. The remaining seedlings are viable F$_1$ hybrids or maternal haploids that can be easily distinguished. Number of interspecific Fl hybrids and matermal haploids per capsule obtained from the interspecific cross between cytoplasmic male-sterile tobacco F$_1$ plants and N.africana yielded 2.2 and 0.5 plants, respectively. Out of 149 CMS haploid plants obtained from interspecific cross, 102 plants showed green type while the others were yellow type for leaf and stem. This results agreed with the genetic ratios expected among haploid plants from the F$_1$ hybrids heterozygous for two recessive genes of yellow color of burley tobacco plant. Out of 83 CMS haploid plants inoculated with TMV, 48 plants showed resistant, while the others was susceptible. It agreed with the expected genetic ratios for a single dominant gene of TMV resistance. CMS haploid plant will be useful as a source material for breeding of CMS doubled haploid lines
This study was conducted to investigate optimal time for dissecting out embryos, effect of embryo size on plant generation, and kinds of media and environment in order to establish an effective bulbosum method. The optimum time for dissecting out the embryos for culture was found to be 17 days after pollination, when the size of embryos ranged from 0.8 to 1.0mm in length. Culture of embryos on B5 medium under continuous radiation was considered to be an efficient practice for production of barley hybrids. Haploid embryos, when compared to their counterpart diploid ones, were slower and fewer in plant development in culture.
Induced androgenesis, a form of artificial parthenogenesis is an important tool for the generation and use of genetically isogenic or clonal fish strain. An optimized protocol for the genetic inactivation of mud loach (Misgurnus mizolepis) oocytes (i.e. production of androgenetic haploid) was developed using UV-irradiation. Various dose levels of UV significantly affected the fertilizing capacity of the eggs, hatchability of embryos and incidence of haploidy. Based on the extensive examinations of treatment conditions on embryo viability and haploid incidence, the optimum dose level of UV irradiation was turned out to be $10,800ergs/mm^2$ with 56.9% of hatching success and 94.6% of haploidy. The overall yield of putative androgen under optimized treatment condition was more than 50% out of total eggs inseminated. The success of androgenetic reproduction of haploid genome was verified by flow cytometry and PCR amplification of transgene that is exclusive to either one of parental sexes. However, a small portion $(8\sim11%)$ of presumed androgenetic haploid larvae was proven to contain residual DNA fragment(s) from maternal parent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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