• 제목/요약/키워드: 망간퍼옥시데이즈

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액체배양한 느타리 버섯균(Pleurotus ostreatus)으로부터 망간퍼옥시데이즈의 생산 및 특성 (Production and Characterization of Manganese Peroxidase from the White Rot Fungus Pleurotus ostreatus in Liquid Culture)

  • 이재성;하효철
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제47권1호
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    • pp.22-26
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    • 2004
  • 리그닌 분해균인 느타리 버섯균(Pleurotus ostreatus) K-2946을 glucose-peptone-yeast(G-P-Y) 액체배지에서 배양 하여 망간퍼옥시데이즈를 생산하였다. 본 실험조건 하에서 리그닌 퍼옥시데이즈는 생산되지 않았다. 느타리버섯균 K-2946이 생산하는 망간 퍼옥시데이즈를 이온크로마토그래피, 겔크로마토그래피를 이용하여 정제하였다. 정제한 망간 퍼옥시데이즈의 분자량은 36400 Da이였고 pI는 3.95였다. 정제된 효소의 최적 pH는 5.0이었으며 최적온도는 $55^{\circ}C$이었다.

느타리 버섯균의 정치배양으로부터 생산되는 중요한 망간퍼옥시데이즈(MnP3)의 N-말단 아미노산 배열 분석 (N-terminal amino acid sequence analysis of major manganese peroxidase (MnP3) produced by static culture of Pleurotus ostreatus)

  • 하효철
    • 한국버섯학회지
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    • 제17권4호
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    • pp.185-190
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    • 2019
  • 리그닌 분해 담자균류로 알려져 있는 느타리버섯균 No.42는 망간퍼옥시데이즈(MnP) 및 락게이즈(Lac)를 생산하였으나 글루코오스-펩톤-이스트-밀기울(GPYW)배지를 이용한 정치배양조건하에서 리그닌퍼옥시데이즈(LiP)활성은 검출되지 않았다. 한편, 동일배지에서 망간퍼옥시데이즈 활성은 11일째 80(3.6) U/flask(ml)의 최대 생산되었다. 망간퍼옥시데이즈 분리정제는 Sepha-ros CL-6B 및 Mono-Q 컬럼순으로 수행하였으며 주요 망간퍼옥시데이즈 isozyme은 단일밴드로 분자량은 36.4KDa이였다. N-말단으로부터 19개의 아미노산 배열은 단백질 자동 분석 장치로 분석한 결과 ATCADGRTTANAACCVLFP를 나타내었다. 느타리버섯균 No.42의 정치배양조건 하에서 세포외로 생산되는 중요한 망간퍼옥시데이즈 isozyme의 N-말단 아미노산 배열은 이전에 보고된 MnP3의 아미노산 배열과 동일하였다.

회전식 통풍관 생물반응기 사용에 따른 느타리균의 manganese peroxidase 생산 및 특성 (Production of manganese peroxidase from Pleurotus ostreatus using a rotary draft tube bioreactor (RTB) and characterization of its activity)

  • 하효철
    • 한국버섯학회지
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    • 제19권4호
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    • pp.316-321
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    • 2021
  • 리그닌 분해효소의 생산은 나선형 리본이 있는 새로운 형태의 회전식 통풍관 생물 반응기(RTB)를 사용하여 느타리(Pleurotus ostreatus) No.42에 의해 실시하였다. 락게이즈(laccase)의 최대 생산량은 배양 3일 후 약 8,200 U/bioreactor 수준에 도달한 후 감소하였다. 반면에, 망간퍼옥시데이즈(MnP)의 최대 생산은 6일 배양 후 약 8,400 U/bioreactor의 수준에 도달하였다. 그러나 이 발효조에서 리그닌퍼옥시데이즈(LiP)는 검출되지 않았다. 그 결과 회전식 통풍관 생물 반응기(RTB)가 리그닌 분해효소를 대규모 생산을 위해 성공적으로 생산할 수 있음을 보여주었다. 이 발효기에서 망간퍼옥시데이즈의 정제 과정은 Sepharose CL-6B, Superdex 75 prep grade 및 Mono-Q에 대한 크로마토그래피를 포함하여 정제하였다. 이 주요 효소는 sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide겔 전기영동(SDS-PAGE)에서 분자량 36,400, pI 3.95의 등전점(IEF)으로 각각 확인되었다. 이 발효기의 주요 효소 N-말단 서열은 정치 및 진탕배양과 같은 다른 배양조건에서 보고된 MnP3 효소와 동일하였다.