Streptomycetes is a group of Gram-positive soil bacteria that growas a branching vegetative mycelium leading to the formation of spores, and display a physiological differenti-ation related to the synthesis of many secondary metabolites including antibiotics. Their complex life cycle and multicellular differentiation require various levels of regulation and types of signal transduction systems including eukaryotic-type serine/threonine protein kinases and prokaryotic-type histidine/aspartic acid protein kinases. Akt kinase that was found in cells is a sorine/threonine kinase controlling signal pathway for multi-tude of important cellular events. The activation or inactivation of Akt kinase in the cell is one of the critical regulatory points to deliver cell proliferation, differentiation, survival or apoptosis signal. To find the regula-tory protein homologous to Akt in Streptomyces, the fluorescien-labeled synthetic peptide (FITC-TRRSR-TESIT) was designed from the consensus sequence of target proteins for Akt kinase. From the difference of the mobility between the nonphosphorylated and phosphorylated synthetic peptides on Agarose gel electro-phoresis, the Akt-phosphorylating activity was monitored. The cell-free extract prepared from Streptomyces griseus IFO 13350 and the Akt homologous protein was purified by ammonium sulfate fractionation and many steps of column chromatographies such as, DEAE-Sepharose, Mono Q, Resource Phenyl-Soporose and Gel permeation column chromatographies. As a result, the protein phosphorylating the fluorescien-labeled Akt substrate was identified and it's molecular weight was estimated as 39 kDa on SDS-PAGE.
Effects of methionine on cephalosporin C(CPC) production in a fluidized-bed bioreactor were investigated using bioparticles of Cephalosporium acremonium. Since methionine was found to be an important metabolic regulator on the synthesis of cephalosporin C, the effects of its concentration in the cuture broth and feeding mode to the bioreactor were studied. It was observed that the presence of initial methionine was essential for higher cephalosporin C production and there existed an optimal content of methionine. Carbon consumption rate also increased significantly under the presence of methionine. Production of cephalosporin C was most active when methionine was exhausted in the broth; however its additional feeding did not enhance the antibiotic production in the fluidized-bed bioreactor as much as expected. It was therfore considered important to feed an optimal content of methionine at the early operating stage for a higher cephalosporin C production in a fluidized-bed bioreactor. An interesting thing to note was that titre of the antibiotic with reused bioparticles was about 2 times higher in the methionine containing medium than that without methionine. Therefore repeated use of bioparticles, with an optimal content of methionine, was believed to be very useful to enhance to process productivity.
Actinomycetes, Gram positive soil bacteria, are valuable microorganisms which produce useful secondary metabolites including antibiotics, antiparasitic substances, anti-cancer drugs, and immunosuppressants. Although a major family of actinomycetes, known as streptomycetes, has been intensively investigated at the molecular level for several decades, a potentially valuable and only recently isolated non-streptomycetes rare actinomycetes (NSRA) family has been poorly characterized due to lack of proper genetic manipulation systems. Here we report that a PCR-based genome screening strategy was performed with approximately 180 independently isolated actinomycetes strains to isolate potentially valuable NSRA strains. Thanks to this simple PCR-based genome screening strategy we were able to identify only seven NSRA strains, followed by 16S rRNA sequencing for confirmation. Through further bioassays, one potentially valuable NSRA strain (tentatively named Nocardiopsis species MMBL010) was identified which possessed both antifungal and antibacterial activities, along with the presence of polyketide synthase and non-ribosomal peptide synthase genes. Moreover, Nocardiopsis species MMBL010, which was intrinsically recalcitrant to genetic manipulation, was successfully transformed via E. coli-driven conjugation. These results suggest that PCR-based genome screening, followed by the establishment of an E. coli-driven conjugation system, is an efficient strategy to maximize potentially valuable compounds and their biosynthetic genes from NSRA strains isolated from various environments.
본 연구의 목적은 우리나라의 경제협력개발기구(OECD) 가입에 따라 당면하게 될 '제조물 책 임법(product liability law) 이라는 법률적 체계에 능동적으로 대처하기 위한 전략적 방안을 수립 하는데 있다. 또한 OECD 회원국들의 제품안전 정책을 분석하여 OECD 가입에 따른 우리나라의 제품 안전 정책의 방향을 제시하는데 있다. 이를 위하여 본 연구에서는 첫째, 대부분의 회원국에서 실시 되고 있는 제조물 칙임법의 시행 현황에 대하여 조사하였으며 둘째, 결함이 있는 제품으로 부터 소 비자를 보호하기 위해 예방적인 조치로 시행되고있는 제품안전에 관한 정책을 살펴보았다. 본 연구 결과, OECD 자체의 통일된 제조물 책임법안은 없고 가입국들이 독자적으로 제정, 시행하고 있으며 회원국에 따라 세부규정에차이가 있는 것으로 밝혀졌다. 그러나 회원국간에 경제 행위에 영향을 미치는 모든 규제들을 국제 기준으로 통일 시키자는 논의가 활발한 가운데 제조물 책임법 또한 그 범위에 포함될 것으로 전망되었다. 제품안전 정책의 경우, 대부분의 회원국들이 제품 사용중 발생 하는 각종의 안전 사고들을 예방하기 위해안전사고 정보수집 체계를 통하여 엄격한 제품감시 체계를 운영하고 있는 것으로 밝혀졌다. 또한 사용의 안전성을 고려한 광범위하고도 진보적인 기술을 요구 하는 제품 안전기준을 설정하고 있었다. 따라서 우리나라가 OECD에 가입할 경우, 선진 회원국의 수준에 부합되는 제조물 책임법의 제정 및 시행뿐만 아니라, 제품의 안전성을 국제적인 수준으로 향상시키기 위한 체계적인 정책수립이 시급한 과제인 것으로 나타났다. 뇌파 측정은 수행 전후 비교 결과 " .alpha. " 노출 비율이 수행 전보다 수행 후가 다소 높은 비유로 나타났으며, 특히 영어 단어 암기력은 평균적으로 크게 상승되는 것으로 나타났다. 정성적 분석 결과에서는 많은 심리적 변화 상태가 나타나고 있지만 전체적으로 마음의 안정감, 몸의 긴장 이완에 따른 건강 상태 유지, 수업 집중도 향상 등이 나타났다. 위와 같은 종합 적 분석 결과에 따라, 본 연구는 제조 현장의 생산성 향상 및 품질 향상과 연계하여 작업자의 작업 집중도 향상, 작업자의 육체적, 심리적 변화에 따른 생산성 및 품질 향상 변화 정도 등의 산업공학(인간공학) 제 분야의 여러 측면에서 연구 및 적용이 가능하리라 사료된다.l, 시험군:25.90$\pm$7.16mg/d1, 47% 감소)를 나타내었으며, 시험군의 AUC는 대조군에 비해 39% 감소하였고, 혈중 아세트알데히드의 농도는 투여 60분후 시험군(3.96$\pm$0.07nmo1/$m\ell$)이 대조군(6.45$\pm$0,64nmo1/$m\ell$)에 비해 유의성 있는 감소(39%)를 나타내었으며, 시험군의 AUC는 대조군에 비해 48% 감소하였다 한편, 시험관내 에탄올 대사 효소에 대한 바이오짐의 효과를 검색해본 결과 바이오짐(2.0 $\mu\textrm{g}$/assay)에 의해 Aldehyde dehydrogenase(1.5unit/assay)의 활성이 14% 증가되었다. 본 연구의 결과로 볼 때, 비지니스 및 바이오짐은 음
Proceedings of the Korean Operations and Management Science Society Conference
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1996.04a
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pp.445-449
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1996
한 국가의 과학기술 수준은 그 국가의 현재와 미래를 짐작케 하는 가장 중요한 척도라고 해도 과언은 아니다. 이에 따라 각국은 기술발전을 기하기 위하여 다양한 과학기술 정책을 펴고 있으며, 이러한 정책의 성패 여부는 국가의 과학기술 수준 뿐 아니라 국가의 미래에 지대한 영향을 미치게 된다. 그러나 세계무역기구(WTO)의 출범에 따라 기존의 과학기술 정책에 대폭적인 수정이 불가피하게 되었다. WTO는 공정한 무역질서의 회복을 위한 제반 규율을 대폭 강화하고 있으며, 여기에는 과학기술 정책과 관련한 부분들도 많이 포함되어 있다. 이로 인해 기존의 과학기술 정책에 대폭적인 방향수정이 요구되었고, 각 관련기관에서는 이에 대한 다양한 대응책들을 제시하고 있으나, 이러한 대응책들은 주로 민간 분야와 관련한 것이어서 미흡한 감이 있다. 이는 민간 분야에 파급효과가 지대한 것으로 알려지고 있는 국방과학기술에 대한 정책이 고려되지 않았기 때문이다. 사실 선진국에서는 국방과학기술분야에의 투자를 통해 많은 효과를 얻고 있다. 또한 국방 분야에 대한 문제는 WTO 체제에서 예외로 인정하고 있어, 새로운 환경에 대한 좋은 대응책이 될 수 있다. 그러므로 국방과학기술 정책에 대한 고려가 없는 과학기술 정책은 완전한 정책이라고 할 수 없다. 본 연구에서는 WTO의 출범에 대한 대응방안으로서 국방과학기술 정책의 효율적인 집행을 제안하였다. 이를 위해 우선 WTO의 성격과 WTO 출범으로 야기되는 과학기술 정책및 특히 국방과학기술 정책의 운용시의 변화요인들을 조사하였다. 또한, 국방과학기술 정책의 파급효과를 조사하였으며, 일곱 가지 사용가능한 국방과학기술 정책 대안들을 식별하였다. 또한 식별된 정책 대안들간의 비교를 통하여 효율적인 국방과학기술 정책 방안을 제시하였다.. 문제점들은 HED (Human Engineerign Discrepance) 목록으로 정리하여 설계에 반영하도록 하였다.로 마음의 안정감, 몸의 긴장 이완에 따른 건강 상태 유지, 수업 집중도 향상 등이 나타났다. 위와 같은 종합 적 분석 결과에 따라, 본 연구는 제조 현장의 생산성 향상 및 품질 향상과 연계하여 작업자의 작업 집중도 향상, 작업자의 육체적, 심리적 변화에 따른 생산성 및 품질 향상 변화 정도 등의 산업공학(인간공학) 제 분야의 여러 측면에서 연구 및 적용이 가능하리라 사료된다.l, 시험군:25.90$\pm$7.16mg/d1, 47% 감소)를 나타내었으며, 시험군의 AUC는 대조군에 비해 39% 감소하였고, 혈중 아세트알데히드의 농도는 투여 60분후 시험군(3.96$\pm$0.07nmo1/$m\ell$)이 대조군(6.45$\pm$0,64nmo1/$m\ell$)에 비해 유의성 있는 감소(39%)를 나타내었으며, 시험군의 AUC는 대조군에 비해 48% 감소하였다 한편, 시험관내 에탄올 대사 효소에 대한 바이오짐의 효과를 검색해본 결과 바이오짐(2.0 $\mu\textrm{g}$/assay)에 의해 Aldehyde dehydrogenase(1.5unit/assay)의 활성이 14% 증가되었다. 본 연구의 결과로 볼 때, 비지니스 및 바이오짐은 음주 후 상승된 혈중 에탄을 농도 및 아세트알데히드의 농도를 현저히 감소시키는 효과가 있었다.량 보호 관리, 도시 소공원 개발, 역사 문화 공원 조성, 하천 공간 복원, 공원 시설 기능 개선, 이용 프로그램 개발, 공원 관리 개선, 환경 피해 녹지의 회복, 도시 환경 림 조성, 녹지
Candida biofilms are self-organized microbial communities growing on the surfaces of host tissues and medical devices. These biofilms have been displaying increasing resistance against conventional antifungal agents. The roots of Scutellaria baicalensis have been widely used for medicinal purpose throughout East Asia. The aim of the present study was to evaluate the effect of S. baicalensis aqueous extract upon the preformed biofilms of 10 clinical C. albicans isolates, and assess the mechanism of the antibiofilm activity. Its effect on preformed biofilm was judged using an XTT reduction assay and the metabolic activity of all tested strains were reduced ($57.7{\pm}17.3$%) at MIC values. The S. baicalenis extract inhibited (1, 3)-${\beta}$-D-glucan synthase activity. The effect of S. baicalensis on the morphology of C. albicans was related to the changes in growth caused by inhibiting glucan synthesis; most cells were round and swollen, and cell walls were densely stained or ruptured. The anticandidal activity was fungicidal, and the extract also arrested C. albicans cells at $G_0/G_1$. The data suggest that S. baicalensis has multiple fatal effects on target fungi, which ultimately result in cell wall disruption and killing by inhibiting (1, 3)-${\beta}$-D-glucan synthesis. Therefore, S. baicalensis holds great promise for use in treating and eliminating biofilm-associated Candida infections.
Lichens are symbiotic organisms composed of fungi, algae, or cyanobacteria which are able to survive in extreme environmental conditions ranging from deserts to polar areas. Some lichen symbionts produce a wide range of secondary metabolites that have many biological activities such as antibacterial, antifungal, antiviral, antitumor, antioxidant and anti-inflammatory etc. Among the symbionts of lichens, of the bacterial communities of lichen symbionts little is known. In this study, we isolated 4 microbial species from the Arctic lichen Stereocaulon spp. and evaluated their antioxidant properties using 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl assay as well as 2,2'-azino-bis(3-ethyl benzothiazoline-6-sulphonic acid) assay. Total phenolic contents and total flavonoid contents were also measured. A potent radical scavenging activity was detected in a number of the lichen extracts. Among the 4 species tested in this study, the ethyl acetate extract of Bosea vestrisii 36546(T) exhibited the strongest free radical scavenging activity, with an inhibition rate of 86.8% in DPPH and 75.2% in ABTS assays. Overall, these results suggest that lichen-bacteria could be a potential source of natural antioxidants.
Kim Mi-Hye;Choi Jung-Do;Shin Malshick;Kim Young-Chang
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.33
no.2
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pp.84-89
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2005
Phosphomannomutase (PMM) is a key enzyme in prokaryotes and eukaryotes, which catalyzes the conversion of ${\alpha}$-D-mannose 6-phosphate to ${\alpha}$-D-mannose 1-phosphate. The latter is the substrate for the synthesis of GDP-mannose, which serves as the mannosyl donor for many metabolic pathways in the cells. We report here on the isolation of a gene from a genomic library of Sphingomonas chungbukensis DJ77, the pmmC gene encoding phosphomannomutase. The gene was cloned into E. coli expression vector, and the sequence was analyzed. The ribosomal binding site GGAAG lays 5 bp upstream of the ORF of 750 bp, which is initiated by ATG codon and terminated by TAG. The predicted sequence of the enzyme consists of 249 amino acids with a molecular mass of 27.4 kDa and showed $86.9\%$ similarity to that of eukaryotic phosphomannomutase after bioinformatical analyses with the conserved domain search of NCBI. The purified gene product revealed the activity of phosphomannomutase. In conclusion, we confirmed that pmmC gene encodes phosphomannomutase actually.
The growth inhibition of enteropathogenic Escheriohia coli $A_2$and Escherichia coli G$_7$, causing the diarrhea in piglets, by the organic acid producing bacteria was studied in vitro. The metabolites of the organic acid bacteria, such as lactic acid, acetic acid inhibited the growth of E. coli $A_2$and E. coli G$_7$ in BL medium. The more the organic acid producing bacteria have ability to produce the organic acids, the higher these bacteria excelled the inhibitory efficacy against enteropathogenic E. coli. Among the strains examined, Lactobacillus casei Y and Streptococcus faecium C showed relatively strong growth inhibition against enteropathogenic E. coli.. When the organic acid producing bacteria and the enteropathogenic E. coli were incubated simultaneously in BL medium, bacteriostasis of E. coli was observed when the pH of BL culture was lowered to 5.0, and bacteriocidal effect was observed when the pH became Bess than 4.5, E. coli. $A_2$was more resistant to the organic acid bacteria than E. coli G$_7$.
Kim, Byung-Hyuk;Cho, Dae-Hyun;Sung, Youl-Boong;Ahn, Chi-Youg;Yoon, Byung-Dae;Koh, Sung-Cheol;Oh, Hee-Mock;Kim, Hee-Sik
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.38
no.4
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pp.448-454
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2010
This study investigated the effect of PCE and TCE as electron acceptors on the bacterial composition of dechlorinating communities. The enrichment cultures reductively dechlorinating PCE and TCE were developed from three environment samples using acetate as electron donor. The cultures were prepared by sequential enrichment, which was seeded with sediment and dredged soil. Denatured gradient gel electrophresis (DGGE) of 16S rRNA gene fragment was used to compare the microbial communities of these three enrichment cultures. After incubation for 4 weeks, the removal efficiencies of PCE and TCE were highest from Yeocheon site (87.37% and 84.46%, respectively). PCE and TCE as electron acceptors affected the bacterial diversity and community profiles in the enrichment cultures. DGGE analysis showed that the dominant bacteria in PCE and TCE enrichment were belonged to Clostridium sp., Desulfotomaculum sp., and uncultured bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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