Purpose : FSGS do not respond well to any kind of therapy and gradually progress to end-stage renal disease. This study was conducted to investigate the difference of protein expression between MCNS and FSGS as a preliminary study for understanding the pathophysiology of FSGS. Methods : Renal biopsy samples of MCNS and FSGS were obtained, which was diagnosed by one pathologist. They were solubilized with a conventional extraction buffer for protein extraction. The solution was applied on immobilized linear gradient strip gel (pH 4-7) using IPGphor system. Silver staining was carried out according to standard method. Protein identification was done by searching NCBI database using MASCOT Peptide Mass Fingerprint software. Results : The differences in protein expressions between MCNS and FSGS were shown by increased or decreased protein spots. Most prominently expressed spot among several spots in FSGS was isolated and analyzed, one of which was glutathione S-transferase (GST) P1-1, whereas it was not found in MCNS. So GSTP1-1 was considered as the one of the key biomarkers in pathogenesis of FSGS. Conclusion : This result would be helpful in diagnosing FSGS and researching FSGS. Further studies for glutathione S-transferase P1-1 might be necessary to elucidate the mechanisms regarding FSGS.
Using T-lymphocytes obtained from rat peripheral blood, we found that the 44kD/pI6.8 protein was the major phosphoprotein of T-lymphocytes under basal condition, and that the 44kD/pI6.3 protein was a new phosphoprotein appeared in T-lymphocytes stimulated with ${\beta}-agonist$. The phosphorylation of the 44kD/pI6.3 protein was also induced by forskolin but inhibited by H-8 pretreatment. To clarify the character of the 44kD/pI6.3 protein, we used Con-A and kinase inhibitors, H-7 and W-7. Con-A stimulation induced phosphorylation of 44kD/pI 6.3 protein but that was inhibited by W-7 pretreatment. The phosphorytation of 44kD/pI6.3 protein was not induced by the PKC activator, PMA. Instead, the phosphorylation of 44kD/pI6.8 protein was reduced by H-7, a PKC inhibitor. From the above results,it can be concluded that the 44kD/pI6.3 protein can be a common substrate for A-kinase and CaM kinase. The two dimensional tryptic peptide mapping revealed that the 44kD/pI6.8 and 44kD/pI6.3 proteins are different.
녹용이 동물체에 미치는 영향을 조사하기 위한 일환으로 녹용 침출액을 집토끼에 주사한 후 여기에서 여섯개의 조직(골격근, 간, 신장, 부신, 비장, 심장근)을 선택 적출하여 disc-gel electrophoresis로 수용성 단백 분획상을 비교 하여 보았다. 대조군과 5일간 주사한 군에서 간, 신장, 부신, 비장에서는 서로 동일한 영동분획상이 나타났으나 골격근과 심장근에서는 대조군보다 실험군(5일간과 15일간 녹용침출액을 주사한 군)의 영동대에서 하나의 영동대가 더 나타났다. 한편 15일간 주사한 실험군과 5일간 주사한 실험군 사이에서는 단백분 획상의 차이점이 없음을 알았다. 이와 같은 변화는 녹용의 어떤 특수성분이 주로 근육형 조직에서만 백질을 합성하는 기작에 영향을 끼친 것이 아닌가 사려된다.
Three alleles of rbsB gene, rbsB, rbsB103, and rbsB106 from the wild type, the mutant and the revertant strain, respectively, were cloned for overproduction of proteins under the control of lambda $P_{L}$ promoter. Five different species of precursor and mature ribose-binding proteins were purified to homogeneity using DEAE-Sephadex column chromatography, osmotic shock pocedure, CM-Sephadex column chromatography, and Chromatofocusing column chromaography. pI of the precursor proteins and mature proteins were determined and found to be pH 8.0 and 7.5, respectively. The purified proteins were subjected to amino acid sequencing. The results confirmed the amino acid changes deduced from the DNA sequencing.
Kim, Min-A;Jeong, Yong-Seob;Chun, Gei-Taek;Cha, Youn-Soo
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.6
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pp.667-673
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2009
The antihyperlipidemic and glycemic control effects of mycelia of Inonotus obliquus including protein-bound polysaccharides extract were investigated. In high fat diet-induced obese C57BL/6J mice, the mycelia of Inonotus obliquus including protein-bound polysaccharides extract showed significant decrease in epididymal fat tissue weight, blood triglyceride and VLDL level, triglyceride and total cholesterol level in liver, serum insulin and HOMA-IR level and AUC. Oral glucose tolerance test glucose level reduction were 4.9% (M150L; ${\beta}$-glucan 1.303 mg/kg bw), 9.5% (M150; ${\beta}$-glucan 2.606 mg/kg bw) after 180 min of glucose loading compared to H-C group. Besides, the mycelia of Inonotus obliquus including protein-bound polysaccharides extract treatment significantly increased glycogen contents in liver and adiponectin level in high fat diet-induced obese mice. In conclusion, the results showed that the mycelia of Inonotus obliquus including protein-bound polysaccharides extract possesses significant antihyperlipidemic and glycemic control effects in C57BL/6J mice.
A 40 kDa cysteine protease was purified from the crude extract of adult worms of GMnnophalloines seoi by two consecutive steps: Sephacryl S-200 HR and DEAE- Sephacel chromatography. Enzyme activities were completely inhibited by cysteine protease inhibitors, L-lorans-epoxysuccinylleucylamido (4-guanidino) butane (E-64) and iodoacetic acid, strongly suggesting that the purified enzyme belongs to the cysteine family of proteases. The enzyme was maximally acive at pH 4.5 in 0.1 M of buffer, and its activity was greatly potentiated in the presence of 5 mM dithiothreitol. The protease degraded macromolecules with differential capabilities : it degraded extracellular matrix proteins, such as collagen and fibronectin, with a stronger activity against collagen than fibronectin . However, the enzyme digested hemoglobin and human immunoglobulins only slightly. leaving them nearly intact after an overnight reaction. Our results suggest that the cysteine protease of G. seoi adults is potentially significant in the nutrient uptake from the host intestine.
Purpose : The pathophysiologic mechanism of nephrotic syndrome is not yet known clearly. At least in some cases, certain 'circulating factors' are thought to increase the glomerular protein permeability. Considering the systemic effect of the circulating factor on peritoneal membrane, we evaluated the loss of protein through peritoneal membrane in patients on peritoneal dialysis due to the end stage renal disease (ESRD) caused by steroid resistant nephrotic syndrome (SRNS). Methods : We retrospectively reviewed the medical records of 26 pediatric patients on peritoneal dialysis ensued during the period from 2001 to 2007 at our clinic. Twelve patients had SRNS, while 14 patients had ESRD caused by the congenital anomalies of urinary system. Results : While the other parameters including nPNA indicating the adequacy of protein intake were similar between the two groups, serum albumin was lower in SRNS patients than the non-SRNS patients ($3.7{\pm}0.3$ g/dL vs. $4.0{\pm}0.4$ g/dL, P=0.021). Peritoneal protein loss was higher in SRNS patients than in non-SRNS patients ($3,044.4{\pm}837.6\;mg/m^2$/day vs. $1,791.6{\pm}1,244.0\;mg/m^2$/day, P=0.007). The protein permeability of the peritoneal membrane measured by the ratio of total protein concentration in dialysate to plasma was twice as high in SRNS patients as the non-SRNS ($1.06{\pm}0.46%$ vs. $0.58{\pm}0.43%$, P=0.010). After 1 year, peritoneal protein loss increased in both patient groups, but to a significantly greater degree in non-SRNS patient (P=0.023). Conclusion : The results of our study support the notion that in nephrotic syndrome there are some 'circulating factors' with the systemic effect. Since the greater protein loss through peritoneal membrane in SRNS was confirmed in this study, more meticulous nutritional support and close monitoring on the nutrition are required in these patients.
To identify the histological site of synthesis of yolk protein precursor, vitellogenin, by immunocytochemical method in the freshwater crab Eriocheir japonicus, we purified the yolk protein, vitellin, from crude egg extracts, and prepared the anti-rabbit serum against vitellin. Then, the site of vitellogenin synthesis was demonstrated by immunotytochemical method with PAP(peroxidase-antiperoxidase) reaction using the rabbit antiserum aganist vitellin. Female specific serum protein was identified in female serum by immunoelectrophoresis and Ouchterlony's immunodiffusion test for mature male and female sera. Based on the immunoelectrophoresis and Ouchterlony's diffusion test for mature male and female sera and crude egg extracts using antiserum against vitellogenic female serum absorbed with male serum, the female specific serum protein was identified as vitellogenin, detected in female serum only. The major yolk protein, vitellin, was purified from the crude egg extracts by DEAE-cellulose ion exchange chromatography, followed by sepharose CL-4B gel filteration chromatography. The molecular weight of vitellin was estimated to be about 245,000 dalton by sepharose CL-4B gel filteration chromatography. from the results of immunological analysis for vitellin, it was found that the vitellin antiserum contained the antibody against vitellogenin. In the results of immunocytochemical reaction by PAP method with the rabbit antiserum against vitellin, the vitellogenic oocytes and the hepatopancreas of mature female showed positive PAP reaction, but not in follicle cells and previtellogenic oocytes nf ovary, muscle of female and mature male hepatopancreas. Therefore, it showed that the hepatopancreas of mature female is the site of vitellogenic synthesis.
Proceedings of the Korea Society of Environmental Toocicology Conference
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2001.05a
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pp.132-132
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2001
Vitellogenin은 난황단백질의 전구체로서 생체내 발현은 에스트로젠과 에스트로젠 수용체가 반응함으로써 활성화되는 것으로 알려져 있다. 어류의 경우 간에서의 vitellogenin의 합성 및 분비는 성숙된 암컷에서만 일어날 수 있는 현상이나, 과거 여러 실험 결과를 바탕으로 수컷이나 미성숙한 암컷에서도 에스트로젠성 물질에 의해 합성이 유도되는 것으로 밝혀졌다. 따라서 수컷 또는 치어 plasma에서 vitellogenin의 측정은 외인성에스트로젠에 대한 노출을 평가할 수 있는 좋은 수단이 될 수 있다. (중략)
The characteristics of the amyloid proteins were histochemically investigated with the amyloidladen organs from bovine(15 cases), canine(1 case), feline(1 case), and artificially induced rabbit amyloidosis(1 case). The amyloid-laden organs from bovine, canine and experimental rabbit amyloidosis showed potassium-permanganate-senstive reaction, revealing complete disappearance for Congo red affinity, loss of brick-red colored fluorescence and green birefringence. From these findings, the amyloids from bovine, canine and experimentally induced rabbit amyloidosis were thought to be equivalent to amyloid protein A (AA protein). In the present feline case with amyloidosis, however, the amyloid proteins revealed potassium permanganate-resistant reaction, showing unchanged affinity for Congo red, and immunoglobulin was also deposited in the glomeruli of the kidney. From these findings, the amyloid proteins from feline case with amyloidosis were considered to be equivalent to amyloid light chain-related proteins (AL protein).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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