• Journal of Embryo Transfer
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• v.19 no.2
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• pp.147-153
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• 2004

본 실험에서는 수술적 방법을 이용하여 난관 절제술을 실시한 성숙 난자의 회수율과 카데터를 이용한 난자 회수율 그리고 새롭게 고안된 개 난자 회수용 니들을 이용한 회수율을 비교하였으며, 각각의 회수 방법이 성숙난자의 외형에 미치는 영향을 조사한 결과는 12두에서 난관절제술로 채취한 성숙난자의 회수율은 89.7% 이었다. 수술적 회수방법에서는 본 연구실에서 개발한 난자 회수용 니들을 난관내에 삽입-결찰한 후 난관-자궁 접합부에서 난자 회수용 배지를 관류하는 방법으로 평균 83.0%의 회수율을 얻었다. 이 같은 결과는 TomCat 카테터를 이용한 회수율 (68.9%)과 난자 회수용 니들을 결찰하지 않고 관류한 방법 (73.5%) 보다 유의적으로 높은 회수율을 나타내었다 (p<0.05). 또한 난관 절제술과 각각의 수술적 방법으로 회수한 난자의 형태학적 차이는 관찰할 수 없었으나 난관 절제술과 난자회수용 니들을 결찰하여 회수한 난자의 형태와 난질이 Tom Cat 카테터나 결찰하지 않은 니들을 이용하였을 때보다 영향을 덜 받는 경향을 나타내었다 (각각 72.0%, 73.8%와 62.8%, 69.6%).

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2003.06a
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• pp.59-59
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• 2003

재래산양은 우리나라 고유의 유전자원으로서 보존뿐만 아니라 개량이 절실히 요구됨에도 불구하고 첨단생명공학기술을 이용한 연구가 극히 미진한 실정이다. 본 연구는 재래산양에 있어서 과배란처리에 의한 미수정 난자의 회수율 개선과 최적의 quality를 확보하기 위하여 과배란 처리 후 회수시간이 난포의 발달과 난자의 회수율에 미치는 영향을 조사하였다. 공시동물은 체중 15kg 전후의 성숙한 미경산 재래산양으로서 발정동기화를 위하여 CIDR(Eazi Breed, InterAg, New Zealand)를 10일간 질내에 삽입하고 과배란 처리는 FSH를 CIDR 삽입 8, 9, 10일째에 12시간 간격으로 70mg을 감량법으로 투여하였으며, PGF2$\alpha$는 8일째에 FSH와 함께 투여하고 CIDR제거는 10일째에 제거와 동시에 hCG 400IU를 투여하였다. 수정란회수는 외과적인 방법으로 실시하였으며, 난관에서 관류방법으로 난자를 회수한 다음 난포에서 흡입방법으로 난포란을 회수하였다. hCG 투여 후 29~34시간과 46~50시간에 관찰된 난포수는 두당 10.29개(144/14) 및 7.83개(47/6)였다. 또한 난포로부터 난포란의 채란율은 각각 66.0%(95/144) 및 53.2%(25/47)였으며, 두당 6.79$\pm$0.9개 및 4.17$\pm$1.1개의 난자를 채란하였다. hCG 투여 후 회수시간에 따른 난관에서 회수한 난자 수는 29~34시간 및 46~50시간 후 채란시 배란점은 평균 4.36개(61/14) 및 7.33개 (44/6)였으며, 난관에서 난자 채란율은 39.3%(24/61) 및 29.5%(13/44)였으며, 재래산양 한마리당 평균 1.71$\pm$0.5개 및 2.17$\pm$1.4개의 난자를 채란하였다. 난관으로부터 회수한 난자의 회수율은 29~34시간째에는 61개의 배란점을 확인하였으나 회수한 난자수는 24개로서 39.3%의 회수율을 보였고 두당 회수율은 1.71$\pm$0.5개였으며, 46~50시간에서는 29.5%의 회수율과 2.17$\pm$1.4개의 두당 회수율을 보였다. 회수한 난포란의 등급에 있어서 29~34시간에 등급별 회수율이 각각 GI(27.4%), GII(14.7%), GIII(43.2%), GIV(14.7%)로 나타났으며, 46~50시간에는 GI(12.0%), GII(12.0%), GIII(28.0%), GIV(48.0%)로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 미성숙 난자의 회수는 hCG 투여 후 29~34시간이 적합한 것으로 생각된다.

• Journal of Embryo Transfer
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• v.19 no.2
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• pp.121-126
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• 2004

본 연구는 개의 불임해결과 체외수정란을 생산할 목적으로 난소의 보존 및 난구세포의 부착 여부가 신선 및 동결 개 정자를 이용한 투명대 반응에 미치는 영향을 조사하였다. 1. 적출한 난소를 4$^{\circ}C$ 와 salt에 각각 48시간 보존 후 회수한 난구세포 부착 난자와 나화난자의 정자침입율은 각각 62.5%, 37.5% 및 42.5% 및 22.4%로서 난소를 적출 후 곧 바로 회수한 난구세포 부착 및 나화난자 내 정자침입율인 93.3%와 56.7%에 비해 현저히 낮게 나타났다. 2. 적출한 난소를 4$^{\circ}C$ 에 각각 4시간, 14시간 및 48시간 보존 후 회수한 난구세포부착 난자의 정자침입율은 각각 92.5%, 90.0%, 85.0%로서 신선 난소 난자의 정자침입율 93.3%에 비해 유사하거나 약간 낮게 나타났다. 3. 적출한 난소를 salt에 각각 4시간, 14시간 및 48시간 보존 후 회수한 난구세포부착 난자의 정자침입율은 각각 85.0%, 77.5%, 72.5%로서 신선난소로부터 회수한 난자의 정자침입율 93.3%에 비해 낮게 나타났다. 4. 적출한 난소를 4$^{\circ}C$ 와 salt에 각각 24시간 보존 후 회수한 난구세포부착 난자의 체외수정율과 체외발생율은 각각 50.0%, 22.5% 및 40.0%, 15.0%로서 신선난소로부터 회수한 난구세포부착 난자의 체외수정율과 체외발생율 72.5%와 32.5%에 비해 낮게 나타났다.

• Journal of Embryo Transfer
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• v.20 no.1
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• pp.63-69
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• 2005

This study were carried out to evaluate the possibility of nuclear progression of canine immature oocytes, of which was cultured in a reproductive tract, such as oviduct, ovarian bursa and uterus of estrus bitch for 4, 5 and 6 days following immediately collection. Cumulus intact oocytes(COC) fore collected from domestic dog following ovariohysterectomy at local veterinary clinics. In Exp. 1, COCs $of>110\;{\mu}m$ diameter were selected and cultured in vitro at $39^{\circ}C$, $5\%\;CO\_{2} $ in air atmosphere. The nuclear progression of canine oocytes checked at 24, 48 or 72 h after in vitro maturation. There was not increased the nuclear progression to the M II stage depending on culture periods at 24, 48 and 72h $(1.3\%,\;3.7\%\;and\;4.7\%)$. In Exp. 2, to evaluate of nuclear progression of immature oocytes, collected or in vitro cultured oocytes were transfer into a canine reproductive tract (oviduct, ovarian bursa and uterus). The recovery rates of canine oocytes from a reproductive tract after 4 days $(33.7\%)$ in vivo culture were significantly higher than those 5 $(17.7\%)$ 6 day $(3.4\%)$ (P<0.05). The survival rates of collected oocytes after 4 days $(60.0\%)$ were also significantly higher than those of 5 days $(30.2\%)$ and 6 days $(38.9\%)$ (P<0.05). The meiotic resumption rates of canine oocytes were not significantly difference among the culture periods at 4 days $(5.9\%)$, 5 days $(0.0\%)$ and 6 days $(0.0\%)$. These results show that the nuclear progression of canine immature oocytes from in in vivo culture was not affect the nuclear resumption of oocytes.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2004.06a
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• pp.293-293
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• 2004

본 실험은 도축전 암소에 성선자극호르몬(Gonadon, 동방(주) : 3 ㎖ 목근육 주사, Gonadorelin 100 ㎍/㎖)을 처리하여 인위적으로 새로운 발정주기를 유도하여 난자 회수율 및 수정란 생산성을 향상시키고자 실시하였다. ① 실험대조군으로 85두(T1), 호르몬처리 37두를 대상으로 처리시간(T2 ; 72hrs, T3 ; 96 hrs, T4 ; 120. T5 ; 148 hrs.)에 따라 도축 후 난소로부터 혈통수정란 생산을 위해 개체별로 난자 회수량을 확인하였다. 회수된 난자를 이용하여 체외성숙 및 체외수정을 실시하였고, 이들 난자의 발육상태, 난발달 및 동결가능 수정란수를 각각 확인하였다. (중략)

• Journal of Veterinary Clinics
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• v.32 no.6
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• pp.536-539
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• 2015

One year old mixed-breed bitch was examined to retrieve in vivo matured oocytes. Laparotomy was performed 72 hr after ovulation determined by serum progesterone concentration, and abnormally enlarged left uterus horn was found. Both ovaries had eight corpus lutea, and a total 16 in vivo matured oocytes having perivitelline space within $25{\mu}m$, polar body, and metaphase II nucleus were recovered by flushing oviducts. This is the first study to confirm in vivo maturation of oocytes from a bitch with hydrometra, which suggests that oocytes recovered from canids with reproductive disease could be valuable sources for assisted reproductive technologies.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2004.06a
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• pp.266-266
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• 2004

재래산양은 우리나라 고유의 재래가축이라는 특성과 산양육의 경우 건강보조식품으로서의 인식이 팽배해 왔기 때문에 그동안 체계적인 개량이 이루어지지 못하였다. 동물복제 또는 형질전환 등과 같은 첨단생명공학연구를 위해서는 무엇보다도 oocyte의 대량확보가 가능해야 한다. 본 연구는 재래산양에 있어서 과배란 처리에 의한 oocyte의 회수방법과 회수란의 질적 개선을 확립하기 위하여 과배란 처리 후 회수시간이 난포의 발달과 난자의 회수율에 미치는 영향을 조사하였다. (중략)

• Journal of Embryo Transfer
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• v.3 no.1
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• pp.43-47
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• 1988

공란우 89두와 수라우 94두를 사용하여 호르몬 투여에 대한 난소반응, glycerol의 평형과 제거방법에 따른 융해란자의 형태적 정상성과 동결 융해란의 이식후 임신율과 쌍태유기율을 조사하였다. 1. 호르몬처리에 대한 난소반응 :1) 과배란 처리후 배란된 난자수는 A.B.C군에서 각각 8.3, 7.8, 9.5개로서 C군이 전체 평균의 8.3개보다 증가되었다. 2) 난자의 회수율은 42.1%, 두당회수된 난자수는 3.5개였으며, 회수란자중 정상발육한 상실배와 배반포기의 난자는 63.3%, 36.7%(114/311)가 형태적 이상란자로 확인되었다. 2. 수정란의 동결 융해후 형태적 정상성 :1) 동결융해후 회수된 난자중 정상 난자의 비율은 60.4%였으며, 배반포(62.3%)가 상실배(58.3) 보다 우수하였다. 2) 1단계 glycerol의 제거시에는 동결전 glycerol의 평형을 3단계로 실시한 군(C.G)이 1단계 평형군 (A.E)보다 우수하였다. 3. 동결융해란의 이식후 쌍태유기 :1) 수정란의 이식후 임신율은 단태(대조)구에서 30.0%, 쌍태유기군인 A(AI+단태), B(편각쌍태) 및 C(쌍각쌍태)구에서 각각 55.6, 44.4, 37.5%로서 대조구보다 증가되었다. 2) 쌍태유기에 공용된 26두의 수란우에 착상된 수정란수는 17(65.4%)개로서 딘태구(30.0%) 보다 배가되었다.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2004.06a
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• pp.268-268
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• 2004

재래산양은 우리나라 고유의 유전자원으로서 첨단생명공학 연구에 매우 적합한 동물이다. 본 연구는 동물복제 및 형질전환동물 생산 등의 연구에 기초자료를 제공하고자 재래산양의 체내 및 체외유래 난자에 단위발생을 유도하여 회수난자의 조건, 활성화방법, 배양조건 등이 단위발생란의 체외발달율에 미치는 영향을 조사하여 최적의 배양조건을 확립하고자 실시하였다. 난자의 회수는 체중 15∼25 ㎏ 전ㆍ후의 성숙한 미경산 재래산양에 FSH와 PMSG를 사용하여 과배란을 유기하였다. (중략)

• Journal of Embryo Transfer
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• v.12 no.2
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• pp.127-132
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• 1997

본 연구는 rat에서 PMSG도는 FSH 처리에 의한 과배란 유도가 배란율과 수정란의 질에 미치는 영향을 알아보기 위해 호르몬 처리하고 교미시킨 후 4일령에 난관과 자궁을 세척하여 정상 8-세포기 난자와 비정상 난자를 조사하였고 각 처리에서 채란된 난자 중에 정상난자를 골라 체외 배양하여 발육율을 비교 평가하였다. 미성숙 rat에서는 평균19.1개의 수정란이 채취되었으며 성숙rat에서는 14.2개가 채취되었고 미성숙 rat에서는 성숙 rat에 비해 더 많은 비율의 비정상적인 난자가 회수되었다. FSH와 LH-RH에 의한 방법이 PMSG와 HCG에 의한 방법보다 유의성 있게 많은 난자를 배란시켰으며, 비정상란의 빈도도 낮은 것으로 나타났다. 그러나 호르몬 처리에 의한 두 가지 방법은 자연배란에 의한 방법에 비해 훨씬 높은 비정상난자의 배란을 유도하였다(FSH, 20.1%;PMSG, 41.2%;자연배란 13.4%). 또한 FSH처리에 의해 회수된 난자보다 체외 발육율이 높은 것으로 나타났다. 그러므로 rat에서 PMSG와 FSH를 이용하여 과배란을 유도할 수 있으나 배란된 난자의 비정상율은 자연배란에 비해 훨씬 높았고, 과배란 유도시 호르몬의 종류에 따라 체외 배양율에도 영향을 미치는 것으로 나타났다.