Kim, Moo-Key;Park, Kun-Ho;So, Jae-Don;Choi, Dae-Ung
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.25
no.1
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pp.89-98
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1992
Glasshouse experiments were conducted to evaluate nodulation, and $N_2$ fixation of 73 strains of Bradyrhizobia isolated from nodules of groundnuts and/or cowpeas grown at various location in Korea and 31 strains of cowpea Bradyrhizobia obtained from overseas sources. Of the strains tested 51.9%, 26.4%, and 21.7% were rated fully effective, partially effective, and ineffective, respectively. Eight very effective strains were selected. Nodulation, shoot dry mass, whole plant dry mass, and plant total N content were significantly correlated with each other. The highly significant correlation of total N content and plant dry mass ($r=0.98^{**}$) indicates that plant dry mass can be used as a measure of strain effectiveness in preliminary test.
Rhizobium fredii USDA193 is one of the causal organism for root nodule formation in soybean (peking). Previously we cloned the pectate lyase gene (SY1) of R. fredii USDA193. The $pel^-$ mutants (SY1$\Omega$ and SY1$\Omega$1) of SY1 were obtained using the in vitro insertional omega mutagenesis of RpelB (of Rhizobium pel) and fill-in reaction of RpelE (of Rhizobium pel) gene respectively, and we constructed two mutants (R, fredii USDA193$\Omega$ and R. fredii USDA193$\Omega$1) in pectate lyase function by marker-exchange with pe1B::$\Omega$ and R. fredii USDA193 strain (rif). The pectate lyase activity of two pel- mutant of R. fredii USDA193 was determined by spectrophotometric method. However, all pectate lyase activity of these mutants was not lost upon the mutagenesis by marker-exchange. This suggests that other pectate lyase genes may be present on the plasmid or the chromosome of R. fredii. As yet we do not have evidence linking RpelB and RpelE genes of R. fredii directly to the early nodulation process.
Alfalfa (Medicago sativa L. cv. Luna) seeded in agar was inoculated with two strains of Rhizobium meliloti isolated from root nodules of alfalfa for assessment of nodulation. The seedling growth after six weeks was remarkably increased by adding each rhizobia strains into agar media and also by nitrate application (70ug N/ml), but there was no significant difference among them. Nodulations started one week after inoculation and increased its numbers and sizes as seedling grew. Therefore, the two strains isolated from alfalfa root were concluded to be effective strains. For determining seed inoculation method the same cultivar was inoculated with both rhizobia strains using different inoculation methods such as broth-vacuum, peat-adhesive, peat & lime pelleting. They were seeded in pots of river sand and supplied with culture solution excluded nitrogen. The peat & lime pelleting was recognized the best method in both of nodulation and seedling growth after eight weeks growth. There were significant correlations between the weight of nodules and the shoot or root dry weight of alfalfa in both rhizobia strains.
This experiment was conducted to isolate the mutants from S118 and to investigate the physiological characteristics of R. japonicum mutants. The results obtained were as follows; Based on nodulation and acetylene reduction, nodulation of rhizobia was divided into 4 groups, i.e. slow-nodulation, earlier-nodulation, infrequent-nodulation and non-nodulation. At 5% significant level, the growth of inoculated plant with SM255 was bad, but that of HP277 was good. Root-hairs curling was induced by strains S118 and HP277 on soybean, but not by strain SM255. S118 and SM255 were found to be slow-gorwers and produced alkali, whereas strain HP277 was fast-grower and produced acid in YEM broth. In litmus milk reaction, all strains indicated alkaline reaction, and serume-zone was induced weakly by HP277. All of the strains tested in this experiment utilized sucrose. HP277 and LP268 utilized xylose, whereas S118 and SM255 did not. SM255 showed bad growth in nitrogen carriers however utilization of $Ca(NO_3)_2{\cdot}4H_2O$ by HP277 was possible at 25mM and 10mM level. To compare with S118, the protein band of SM255's cell protein electrophoresis was not developed at 0.62 Rm position.
A series of experiments over three years was planned for practical application of rhizobia in farms and grass lands in Korea. This is the report for the studies of the first year mainly on the isolation and characterization of rhizobial strains, and on the assessment of their nodulation abilities and nitrogen fixation capacities. 1. Total number of 88 strains for soybean group and 22 st ra ins for pea and vetch group was isolated from nodules which were taken from legumes grown in Daekwanyong, Cheju and various places in Korea. 2. Morphological and cultural characteristics of the strains were studied, and attempts were also made to investigate their antigenic properties and to demonstrate lysogenic strains in these groups. The results were : i) the isolates varied in cultural characteristics on yeast mannitol broth and agar, and in degree of congo reel absorption ; ii) similarities in their antigenic properties were found between/among the strains: G-3/G-9/D216, G-20/G-52 in soybean group; iii) no lysogeny was found in the strains of these groups. 3. Plant infection tests by test tube and bottle method in light room were carried out to elucidate the ability of the strains to nodulate specific legumes and of the capacity of such nodules to fix atmospheric nitrogen. The isolates were grouped into non- invasive, ineffective, or effective to the legumes. Those strains which produced effective nodules, supporting similar level of growth as nitrate control, were: P-3, 4 and 8 in pea and vetch group; G-23, 27, and, D-216 in soybean group.
Studies were carried out to find the effect of various soil properties on the growth, nodulation and yield using a soybean variety, 'Tongbuktae', at various soils. The results of the study are summarized as follow: 1. The formation ratios of various characters in soybeans were different before and after flowering. The root length(89.3%), stem diameter(82.1%), plant height(77.8%), number of nodes(67.4%), and number of nodes(67.9%) gave the high formation ratio before flowering. However, the formation of number of nodules(66.3%), top dry weight(74.9%) and total dry weight(71.7%)was accomplished mainly after flowering. The ratio of the formation in root dry weight was appeared to be about same in the growth period before and after flowering. 2. Nodulation ratio after flowering shelved significantly positive correlation with dry matter accumulation. 3. T/R, top dry weight/plant height and plant height/root length were significantly associated with yield. The tested soils with higher ratio mentioned above, also showed higher yield. 4. pH, oraganic matter, phosphate, potassium, total nitrogen and molybdenum in the soils were significantly correlated with nodulation and yield. Content of calcium in the soils only showed significant association with yield. 5. Soil properties influenced yield were molybdenum, calcium, organic matter, pH, number of nodules, magnesium, phosphate, total nitrogen and potassium in the order of importance. This order was varied according to the soils employed in these studies.
Greenhouse experiments were conducted to avaluate strain competition, nodulation, patterns of nodule occupancy and population changes of Bradyrhizobium sp. strain HCR-46 $str^{r}cep^{r}$ and CB756 $str^{r}rif^{r}$ in the rhizosphere of peanut(Arachis hypogaea L.) under different root temperatures. Inoculated with two strains using seed coating with peat slurry under different root temperatures, population of each strain in the rhizosphere increased with plant growth and multiplication rate of inoculum in the unit weight of root were showed the highest from 10 to 15days after sowing. The multiplication rate of inoculum in the rhizosphere was $28^{\circ}C$>$34^{\circ}C$>$22^{\circ}C$. The density of HCR-46 $str^{r}cep^{r}$ was more increased than that of CB756 $str^{r}rif^{r}$ under $22^{\circ}C$ and $28^{\circ}C$. While the density of two strains showed no difference under $34^{\circ}C$. Inoculated with HCR-46 $str^{r}cep^{r}$ and CB756 $str^{r}rif^{r}$, respectively at 22, 28 and $34^{\circ}C$, nodulation of each strain was dominated in its inoculation portion. Inoculated with the mixture of HCR-46 $str^{r}cep^{r}$ and CB756 $str^{r}rif^{r}$, occupancy rate of HCR-46 $str^{r}cep^{r}$ was dominated over that of CB756 $str^{r}rif^{r}$ at $22^{\circ}C$ and $28^{\circ}C$, but that was similar between them at $34^{\circ}C$. Dry mass, nodulation, nitrogen content per plant and nitrogenase activity showed higher at $28^{\circ}C$ than at $32^{\circ}C$ and $22^{\circ}C$, while those were higher in HCR-46 $str^{r}cep^{r}$ and mixing HCR-46 $str^{r}cep^{r}$ with CB756 $str^{r}rif^{r}$ than in CB756 $str^{r}rif^{r}$.
Lee Sang-Eun;Yi Hwe-Su;Park Seung-Hwan;Ghim Sa-Youl
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.33
no.1
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pp.70-73
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2005
A soil bacterium was isolated from maize roots cultivated in Korea (KNUC153). The isolate was partially classified on basis of l6S rDNA sequence analysis as Stenotrophomonas maltophilia. By the acetylene reduction assay (ARA), the strain KNUC153 contained nitrogen-fixing abilities. The amount of auxin produced by the strain KNUC153 was $77.6\;{\mu}g/ml$. The strain KNUC153 produced 4 times higher amount of l-amino-cyclopropane-l-carboxylic acid deaminase than that of the other known strain Azospirillum sp. KNUC82. Inoculation treatment with the strain KNUC153 for maize seeds showed positive effect on early growth of the plants.
These experiments were conducted to investigate the nematicidal effects of the insecticides, Mocap(O-Ethyl-S, S-dipropyl phosphorodithioate), Carbofuran(2,3-Dihydro-2,2-dimethyl benzofuranyl ethyl carbamate), Terbufos (S-tert-buthylthio methyl O,O-diethyl phosphordithioate) and their mixtures (Mocap+carbofuran, Mocap+Terbufos, Carbofuran+Terbufos) on growth of 2year-old ginseng, Panax ginseng C.A. Meyer, and the control of root-knot nematodes. There was no evidence of plant injury from insecticide treatment of ginseng, although the rate of emergence of the treated ginseng was slightly inhibited. The insecticide treatments showed no of-flavor of ginseng plant. Terbufos and Mocap provided heifer confrol of the root-knot nematodes than carbofuran alone and their mixtures. Mixtures of the insecticides showed antagonisitic effect to the root-knot nematodes.
Symbiotic effectiveness and significance of Bradyrhizobium japonicum strains in five serogroups which were consisted of three corresponding serotype strains, respectively, indigenous to Korean soils were evaluated in terms of utility of strain serogroup for symbiotic improvement on soybean plant. The nodulation by rhizobia of each serogroup on four soybean cultivars(Danweonkong, Kwangkyo, Pangsakong, and Eunhakong) was good in order of USDA 123 > YCK 150 > YCK 117 > YCK 141 > USDA 110 serogroup members. Shoot dry weight of soybean was relatively high with USDA 110 serogroup members as well as with YCK 141 serogroup members, whereas the effectiveness of USDA 123 serogroup members was the lowest among the serogroups examined. In particular, Pangsakong among soybeans inoculated with five-serogroup members was positively outstanding on nodulation and shoot dry weight of the plant. Overall, symbiotic parameters of serogroup members associated with soybean plant such as nodule number, nodule mass, $N_2$ase activity, and shoot dry weight showed significantly different responses at level of 1% probability among both rhizobial serogroups and soybean cultivars, respectively. The rate in symbiotic similarity of the members of each serogroup from F-test ($$P{\leq_-}0.05$$) was 100% for nodule No., 90% for $N_2$ase activity. and 80% for soybean shoot dry weight. Taken together, the results indicated that the serological grouping of B. japonicum could be strongly useful for improving the symbiotic effectiveness hetween soybean and Rhizobium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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