A microorganism (strain AR1) producing an extracellular lipolytic enzyme was isolated from hot springs located in Beppu, Japan. Phylogenetic analysis based on the 16S rDNA sequence and biochemical studies indicated that AR1 belongs to the genus Geobacillus. This study focused on novel strategies to increase extracellular lipolytic enzyme production by this novel Geobacillus sp. AR1. Cultures of the AR1 strain grew within a wide temperature range (from 35 to $75^{\circ}C$); the optimum temperature was $65^{\circ}C$. The pH for optimal growth was 6.5, whereas the optimum pH for lipolytic enzyme production was 8.5. The presence of oils in the culture medium led to improvements in lipolytic enzyme activity. Soybean oil was the most efficient inducer, and it yielded better results when added in the exponential phase. On the other hand, the addition of chemical surfactants led to lipolytic enzyme production. Their addition to the culture could affect the location of the enzyme activity. The addition of Tween 20 in the stationary phase significantly increased the proportion of the extracellular enzyme activity. According to the results, following the addition of soybean oil and Tween 20 in the exponential and stationary phases, the extracellular lipolytic activity was increased 2.4-fold compared with that of a control.
The $in$$vivo$ single-dose acute toxicity of $Lactobacillus$$plantarum$ AF1, a lactic acid bacterium isolated from kimchi, in ICR male and female mice was investigated. The test article was intraperitoneally or orally administered once to both sexes of mice. The motalites, clinical findings, autopsy findings, and body weight changes were monitored daily for 14 days. In the oral acute toxicity test, the male and female mice were gavaged with four doses (5.0, 2.5, 1.25 and 0.625 g/kg) of $Lb.$$plantarum$ AF1. The oral $LD_{50}$ of the $Lb.$$plantarum$ AF1 was considered higher than 5.0 g/kg. In the intraperitoneal acute toxicity test, mice were injected intraperitoneally with dosages of 0.7, 0.9, 1.1, 1.3, 1.5, 1.7, 1.9, 2.1, 2.3 and 2.5 g/kg. The intraperitoneal 50% lethal dose ($LD_{50}$) of the $Lb.$$plantarum$ AF1 was >2.5 g/kg in the male and female mice. No significant changes in the general conditions, body weights, clinical signs, and gross lesions were observed in both sexes of mice to which $Lb.$$plantarum$ AF1 was administered intraperitoneally or orally. The results suggest that the no-adverse-effect level of $Lb.$$plantarum$ AF1 is estimated to be more than 5.0 g/kg in the oral route and 2.5 g/kg in the intraperitoneal route.
Abalone (genus Haliotis) is a woody species with a long life span that is primarily distributed throughout the world, including Asia. This species is regarded as a very important marine gastropod mollusk in Korea and China, and also in food industries around the world. We evaluated a representative sample of the five species with nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer sequences (ITS) to estimate genetic relationships within the genus. Aligned nucleotide sequences of the length of the 5.8S subunit of all taxa of Haliotis were found to constant of 160 bp nucleotides. However, aligned nucleotide sequences of the length of ITS1 were varied within genus Haliotis, varying from 272 in H. diversicolor aquatilis to 292 in H. discus hannai. Aligned nucleotide sequences of the length of ITS2, especially, vary from 722 in H. diversicolor aquatilis to 752 in H. sieboldii. Total alignment length is 763 positions, of which 78 are parsimony-informative, 57 variable but parsimony-uninformative, and 459 constant characters. H. discus hannai was similar to H. discus, while H. diversicolor aquatilis was more distinct. ITS analysis may be useful in germ-plasm classification several taxa of genus Haliotis.
To explain the origin of the Korean mandarin fish (Siniperca scherzeri), phylogenetic relationships and DNA polymorphism among Siniperca fishes have been investigated based on mitochondrial cytochrome b DNA sequences. As a result, S. roulei were firstly differentiated early in the evolution of Siniperca fishes and the other six species (S. schezeri, S. undulata, S. fortis, S. obscura, S. knerii and S. chuatsi) were evolved slightly later. However, the order of species differentiation among six species was not clear because the nodes of their phylogeny were poorly resolved. The constructed molecular phylogeny revealed three genetically distinct groups of local populations of S. scherzeri. The first group (group 1) is the local populations of Korean peninsula and northern China including Lioaning and Henan. The second one (group 2) is the local populations of Anhui, Fujian and Guangxi. The third one (group 3) is the local population of Zhejiang. The number of nucleotide differences in base pairs were 31~43 between group 1 and 2; 37~44 between group 2 and 3; 27~29 between group 1 and 3; and 1~5 within group 1. Thus, the Korean mandarin fish was likely to be originated from the northern China local population which was isolated from the middle or southern China local populations during the Cenozoic Pliocene. Low level of sequence divergence between Korean mandarin fish populations and northern China population indicated a recent expansion of distribution ranges from northern China to Korean peninsula.
Kim, Cheng-Yun;Lee, Jae-Yun;Kim, Gi-Young;Lee, Ki-Won;Park, Jae-Min;Kim, Mun-Ok;Lee, Tae-Ho;Lee, Jae-Dong
The Korean Journal of Mycology
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v.31
no.3
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pp.121-128
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2003
This study was carried out to identify the phylogenetic relationship of Phellinus species and to know its distribution by comparing the DNA sequences of internal transcribed spacer regions(ITS1 and IST2) and 5.8S ribosomal DNA (rDNA) repeat unit. The Phellinus species had their specific sequences in IST1 and 2 regions depending on suedes. The comparison of the ITS sequences of standard strains indicated that the sequences of ITS1 were more variable than those of ITS2. Nine strains of the commercial products of Phellinus species used in this study were identified as P. lintues, P. baumii, P. igniarius, and P. pini. Most of commercial species were P. pini and P. baumii, and P. gilvus was not found. Also, P. linteus was only found in form of mycelial culture rather than fruiting body. Moreover, the species-specific primers were designed based on ITS sequence data. Each species-specific primers were bound in P. lintues(ITSF-PL2R), P. baumii(PB1F-ITS4R), P. igniarius(IF1-IR3), P. pini(PF1-PR3), and P. gilvus(GF2-GR4), respectively. These primer sets would be useful fer the detection of specific-species among unidentified Phellinus species rapidly.
Genus Sorbus is a long lived woody species that is primarily distributed throughout Asia and Europe. This species is regarded as very important herbal medicines in Korea and China. Sorbus commixta is primarily distributed throughout Europe. We evaluated a representative sample of the four taxa with nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer sequences (ITS) to estimate genetic relationships within genus. Aligned nucleotide sequences of the length of ITS1 were nearly constant within genus Sorbus varying from 219 in S. aucuparia to 218 in the rest species. Especially, the 5.8S subunit of all taxa of Sorbus was found to constant of 165 bp nucleotides. However, aligned nucleotide sequences of the length of ITS2 vary from 240 in S. sambucifolia var. pseudogrcilisto 245 in S. aucuparia. Total alignment length is 629 positions, of which 35 are parsimony-informative, 32 variable but parsimony-uninformative, and 552 constant characters. The base furtherance showed the difference to the by a total taxon: an average A and T are 17.7% and G and C are 30.4%, 34.2%, respectively. All the four taxa beginning with conserved base paired triplets emerging from single strand regions (domain I). Noteworthy, in the RNA secondary structure proposed for the three Korean Sorbus taxa RNA transcript ITS2, which shows a remarkedly well-conserved folding (domain II). When compared to the European Sorbus (S. aucuparia) of ITS2. ITS analysis may be useful in germ-plasm classification several taxa of genus Sorbus.
The JS18 strain was isolated from an old tree forest and produced extracellular enzymes that decolorize synthetic melanin. Phylogenetic analysis, based on the internal transcribed spacer (ITS) sequence, indicate that JS18 belongs to the Trametes velutina species. JS18 demonstrated laccase activity but no manganese peroxidase or lignin peroxidase activity. Batch culture indicated that the melanin decolorization activity of JS18 strain originated from the laccase. Syringic acid and CuSO4 induced maximum laccase production, yielding 98 U/ml laccase activity after cultivation for 7 days at 25℃. T. velutina secretes an extracellular laccase in GYP medium, and this enzyme was purified using (NH4)2SO4 precipitation, Hi-trap Q Sepharose columns and gel filtration. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 67 kDa using sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. This enzyme produced 80% of its melanin decolorization activity within the first 24 h of evaluation in the presence of 1-hydroxybenzotriazole (HBT), while only about 4% of the melanin was decolorized in the absence of the mediator. The greatest decolorization was observed at 1.5 mM/l HBT, which decolorized 81% of the melanin within the first 24 h. The optimum pH and temperature for this decolorization were found to be 5.0 and 37℃, respectively. Our results suggest the possibility of applying HBT induced T. velutina JS18 laccase-catalyzed melanin decolorization.
Park, Byung-Ju;Oh, Hae-Ri;Kang, Ho-Young;Jang, Kyung-Lib
Journal of Life Science
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v.21
no.6
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pp.819-828
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2011
To inspect norovirus contamination of groundwater in south eastern areas of Korea, a systematic survey of groundwater in Busan, Ulsan, and Gyeongsangnam-do was performed for two years from 2009 to 2010. For this purpose, we first optimized the nested reverse transcription-PCR condition by designing two sets of primers for the detection of norovirus genogroups, GI and GII. Of 145 samples, 21 (25.9%) and 15 (23.4%) were norovirus positive in the dry season (April to June) and wet season (July to August), respectively. The detection frequencies of norovirus in Busan, Ulsan, and Gyeongsangnam-do were 15%, 7%, and 32%, respectively, reflecting a geographical difference in their distribution. The GI and GII isolates were 5 and 31, respectively, indicating the prevalence of GII in the tested areas. According to phylogenetic analysis of their nucleotide sequences, all of the GI isolates were identified to genotype GI.5 whilst the GII isolates were divided into two genotypes, GII.3 and GII.4. Neither physical-chemical parameters such as pH, temperature, oxidation-reduction potential, and dissolved oxygen, nor microbial indicators of water quality such as total bacteria, total coliforms, and Escherichia coli were statistically correlated with contamination of norovirus in the groundwater. Interestingly, however, the presence of norovirus was closely correlated with low turbidity (<0.50 NTU). The present study suggests that periodical monitoring of norovirus in groundwater is necessary to prevent epidemic waterborne diseases and to secure better sanitary conditions for public health.
Journal of Korean Society for Geospatial Information Science
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v.3
no.2
s.6
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pp.101-113
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1995
In pipeline planning, the systematic and reasonal management of topographical and spatial data are needed in order to omprove the availibilities for data analysis and the effective combinations of spatial informations. According to that fact, DBMS (Database Management System) and DSS(Decision making Support System) have to be developed for the planning of water supply system Also, the economic selection for harmonious delivery of water to target area, since the alternatives of pre-designed pipeline are influenced by hydraulic stability and geographic characteristics. In this study, GIS technique for water supply planning and management which stores graphic features and attributes as digital data sets is considered and engineering application programs are integrated for effective planning of water supply system. Decision making support system based on analyzing technical, Social and economical aspects is developed for the extension of water supply facilities and pipeline configurations. Especially, Hydraulic, land-use and economic influences are considered as important factors for the purpose of developing the system. Hydraulic analysis program(SAPID) for pipeline flow which is already developed in Water Resources Research Institute and economic analysis program(ECOVEL) are integrated with GIS for resonable decision making. Every possible aspects in pipeline planning for water supply is reviewed and the applicabilities of developed system into the field are evaluated.
To investigate genetic relationships either interspecies or intraspecies of 14 Korean Phytophthora species, sequence analyses of nuclear DNA (ypt gene and rDNA-IGS region) and mitochondrial DNA (Cox gene, $\beta$-tubuline gene, and EF1A gene) were performed. All of 14 Korean Phytophthora species clearly clustered into foreign isolates of each species. These Korean isolates in Phytophthora species also showed no correlation between molecular classification and morphological classification like as in case of foreigners. P. palmivora KACC 40167 reported previously from genetic groups of Phytophthora species in Korea was not consistent with the classification system, and therefore was required re-examination for the genetic group analysis. Korean isolates of P. drechsleri KACC 40195 showed very close relationship with P. cryptogea KACC 40161 above 94% bootstrap value in P. cryptogea-P. drechsleri complex group. Identification of these isolates is still unclear, because P. cryptogea and P. drechsleri were not differentiated in this study. On the other hand, it was required to unify species for these two species, since P. parasitica and P. nicotianae were clustered into a group on the level of 99 to 100% sequence homology. Comparing to the sequences of foreigners, Korean isolates were newly divided to ten groups in the phylogenic system. These results could be prepared useful informations to understand genetic diversity of Phytophthora species in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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