• Korean Journal of Plant Resources
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• v.24 no.1
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• pp.17-22
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• 2011

This study was for developing leaf chlorophyll mutant cultivars of Cymbidium goeringii by ethyl-methanesulfonate(EMS) treatment. Chlorophyll mutant rhizomes were easily produced by 0.2% EMS treatment in this genus. Among the mutants, they became dark brown about 50% of the rhizomes. When the dark-brown rhizomes were cultured in a solidified MS medium, new rhizomes were formed from part of the old ones. Chlorophyll mutant rhizomes were obtained from subcultured meristem tissues of newly-formed rhizomes. The rhizomes were cut and subcultured for a year and then became mutant plants. As the results, they produced 4 kinds of leaf mutant cultivars; zigzag-striped, comb-striped, net-striped, and dwarf types, indicating that the EMS treatment in the rhizome could produce versatile leaf chlorophyll regulating mutants. These results suggest that our method is useful for developing leaf mutant cultivars of this planta which they are estimated as higher commercial values.

• Korean Journal of Poultry Science
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• v.39 no.2
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• pp.113-120
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• 2012

Newcastle disease virus (NDV) Kr005/V strain was generated through 55 serial passages of NDV Kr005 strain in Vero cells. The Kr005/V virus yielded high infective titers of $10^{7.8}$ $TCID_{50}/mL$ in Vero cells and the infected cells showed cytopathic effects such as marked cell rounding, though less frequent syncytia. The Kr005/V virus was heat-stable and classified into the lentogenic type with a Mean Death Time (MDT) of 120h or greater while the Kr005 strain was heat-labile and velogenic (MDT of 49.6 h). Only the single amino acid substitution (T to S) was observed at position 433 of the HN protein of the Kr005/V strain, whereas no amino acid change was found in the F protein. The Kr005/V input virus correlated well (correlation coefficient $r^2$=0.97) with the Kr005 virus when ten field sera were tested by virus neutralization test. The biological properties and usefulness of Vero cell-adapted Kr005/V virus were discussed.

• The Korean Journal of Mycology
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• v.27 no.4 s.91
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• pp.243-248
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• 1999

To compare the morphological and cultural characteristics of Cordyceps militaris, forming conditions of artificial fruiting body production were investigated in this experiment. The stroma shapes of artificial fruiting body were confirmed to club and/or stick. However, both shapes were same color as a orange. Perithecia of stroma was semi-egg shape and was ranged from $30{\sim}90{\times}90{\sim}130\;{\mu}m$ and it's asci was narrowly cylindric. Ascospore of perithecia was belong to filiform and multiseptate. The conidia of C. militaris was centurally grown and shaped with globose, long clavate type, floccose, centrally raised during anamorph stage. When it was cultured between glass and PP bottle, production of artificial fruiting body, pinheading ratio and total yield were higher in PP bottle. The optimum illumination was 1,000 lx for the those production. The culture medium of barley, wheat and hulled rice showed higher artificial fruiting body compared to that of silkworm. Pinheading and yield of it's isolates was decreased at more than three subsequent transculture.

• Korean Journal of Plant Tissue Culture
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• v.26 no.2
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• pp.103-107
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• 1999

The effects of MS salt strength, sucrose, and cultural conditions on bulblet formation and growth were investigated to optimize the conditions for micropropagating bulblets from in vitro bulb scales of Lilium Oriental Hybrid 'Casa Blanca'. There was no difference on bulblet formation in the range of 1/2~2 $\times$ strength of MS salt, but it was inhibited remarkably in 3 $\times$ strength of MS salt. The growth of regenerated bulblets was most stimulated on MS basal medium. Favorable bulblet formation and its growth from bulb scales were achieved when grown on the media with 1 : 2 or 1 : 3 in the ratio of NH$_4$^+ : NO$_3$^- , as well as on MS basal medium (NH$_4$^+ : NO$_3$^- = about l : 2). Therefore, MS basal medium was very suitable for bulblet formation and growth from bulb scales. Bulblet formation was inhibited but its growth was stimulated with increase sucrose concentration in the medium. The growth of regenerated bulblets was very effective on the media with 9~12% sucrose. Addition of activated charcoal (AC) to the medium inhibited bulblet formation from bulb scales, but enhanced the growth of regenerated bulblets. Especially, the medium containing 1 g/L AC was most effective on the growth of bulblets. No difference was found on bulblet formation and growth from bulb scales under light and dark conditions. In vitro micropropagation of L. Oriental Hybrid 'Casa Blanca' was supposed very reasonable to enhance the growth of the bulblets after forming of bulblets from in vitro bulb scales, and then, subculture the bulb scales from the grown bulblets on MS medium with 9% sucrose and 1 g/L AC.

• Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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• 2018.04a
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• pp.24-24
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• 2018

본 연구는 응달고사리[Cornopteris crenulatoserrulata (Makino) Nakai]의 전엽체 대량증식 및 포자체 형성을 위한 배지구성물질 및 배양토의 최적조건을 구명하고자 수행되었다. 실험재료는 기내에서 포자발아를 통해 획득한 전엽체를 계대배양하여 실험에 사용하였다. 배지구성물질이 전엽체의 증식 및 형태 형성에 미치는 영향을 알아보고자, 배지구성물질의 농도를 1/4, 1/2, 1배로 조절한 MS배지와 Knop배지를 조성하였다. 기내 배양된 전엽체 300mg을 메스로 다진 후 상기 5종의 배지에 배양하였다. 실험의 결과, 전엽체의 생체중은 Knop배지에서 3.93g으로 가장 많이 증가되었으며, 현미경으로 관찰한 결과 기관형성도 정상적으로 이루어졌다. 선행연구에서 선발된 Knop배지를 기준으로 sucrose(0, 0.5, 1.0, 2.0 및 3.0%) 및 활성탄(0, 0.1, 0.2 및 0.4%)의 농도를 달리 첨가하여 전엽체에 미치는 영향을 확인하였다. 실험결과, 0.5%의 sucrose를 첨가한 배지에서 생체중이 5.90g으로 증가하였으며, 활성탄은 첨가하지 않는 것이 효과적이었다. 포자체 형성을 위한 최적의 토양조건을 구명하고자, 원예상토와 피트모스, 펄라이트, 마사토 등 인공토양의 비율을 달리하여 8종류의 토양을 사각분에 충진하였으며, 기내에서 배양된 전엽체를 10초간 분쇄한 후 사각분에 1g씩 균일하게 분주하여 16주간 배양하였다. 배양결과, 원예상토를 단용으로 처리한 실험구에서 포자체가 171.5개로 가장 많이 발생하였으며, 원예상토와 마사토를 2:1(v:v)로 혼합한 토양에서 125.0개, 원예상토, 피트모스, 마사토를 1:1:1(v:v:v)로 혼합한 토양에서 113.3개 순으로 포자체가 발생하였다. 포자체의 생육은 포자체의 형성이 가장 많았던 원예상토를 단용한 토양에 비해 원예상토와 마사토를 2:1(v:v)로 혼합한 토양에서 생체중, 엽장, 엽폭, 근장 등이 우수하였다. 한편 피트모스가 혼합된 토양에서는 전엽체와 포자체 형성이 억제되는 경향을 보였다. 위 결과로 보아 응달고사리의 전엽체 기내배양에는 sucrose 0.5%가 첨가된 Knop배지가 적합하며, 포자체 대량생산을 위해서는 원예상토를 단용한 토양을 사용하는 것이 좋다고 판단되었다.

• Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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• 2018.04a
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• pp.21-21
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• 2018

본 연구는 북방계 식물에 속하는 두메우드풀[Woodsia ilvensis (L.) R.Br.]의 전엽체 증식 및 포자체 형성을 위한 적정방법을 구명하고자 수행되었다. 식물재료는 경상북도 의성군 일대에서 채취한 후 청주의 일반하우스에 이식하여 재배하였다. 포자 성숙기인 8월에 채종하여 발아시켰으며, 포자로부터 획득한 전엽체를 8주간 계대하면서 실험재료로 사용하였다. 전엽체 300mg을 메스로 다진 후 배지농도 및 종류(Knop, 1/4, 1/2, 1 및 2MS)를 달리하여 8주간 배양하였다. 배양실의 온도는 $25{\pm}1.0^{\circ}C$, 광도는 $30{\pm}1.0{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$(16/8h)로 조절되었다. 연구의 결과, 배지구성물질의 농도가 높았던 2MS배지에서 전엽체의 생체중이 12.4g으로 41배 증가하여 가장 높은 증식율을 나타냈다. 또한 배지구성물질의 농도가 적을수록 생체중의 증가폭도 함께 감소하는 경향을 보였다. 포자체 형성에 적합한 토양조건을 확인하고자, 원예상토, 피트모스, 펄라이트 및 마사토의 비율을 달리한 5종류의 혼합토양을 조성하여 사각분($7.5{\times}7.5{\times}7.5cm$)에 충진하였다. 다음으로 전엽체 1g을 핸드블랜더로 10초간 분쇄 후 충진된 사각분 위에 고르게 분주하여 14주간 재배하였다. 재배환경은 온도 $25{\pm}1.0^{\circ}C$, 광도 $43{\pm}2.0{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$(16/8h) 및 습도 $72{\pm}2.0%$로 조절되었다. 지베렐린 수용액이 포자체 형성에 미치는 영향을 조사하고자, 선행연구에서 선발된 토양조건을 기준으로 침지농도(0, 50, 100, $200mg{\cdot}L^{-1}$)를 조절하여 1시간 침지 후 상기와 동일한 방법으로 재배하였다. 연구의 결과, 원예상토와 펄라이트 또는 마사토를 2:1(v:v)로 혼용한 토양에서 사각분 당 109.5, 128.8개의 포자체가 형성되었다. 한편, 피트모스가 첨가된 처리는 포자체의 형성이 억제되는 경향을 나타냈다. 지베렐린 50과 $100mg{\cdot}L^{-1}$ 수용액에 침지한 처리에서 무처리에 비해 많은 사각분 당 각 177.0, 181.7개의 포자체가 형성되었으며, 생육도 양호하였다.

• Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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• 2018.04a
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• pp.22-22
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• 2018

실고사리[Lygodium japonicum (Thunb.) Sw.]는 국내 자생하는 덩굴성 양치식물로 유인재배가 용이하여 실내 외 조경 및 관상소재로 활용이 가능하다. 한방에서는 전초를 해금사초, 포자를 해금사, 뿌리와 지하경을 해금사근이라 약재로 사용한다. 본 연구는 관상 및 약재로 이용이 가능한 실고사리의 대량생산을 위한 기내 외 번식방법을 개발하고자 수행되었다. 식물재료는 경상북도 의성군 일대에서 성체를 수집하여 청주의 일반하우스에 식재하여 성숙한 포자를 채취하였다. 포자를 기내 발아시켜 전엽체를 획득한 다음 8주 간격으로 계대하면서 연구의 재료를 확보하였다. 전엽체의 증식과 생육에 적합한 배지를 비교 하고자, 1/4, 1/2, 1, 2MS배지와 Knop배지를 조성하여 배양하였다. 배양방법은 전엽체 300mg을 메스로 균일하게 다져서 배양하는 방법을 이용하였으며, 배양환경은 온도($25{\pm}1.0^{\circ}C$), 광도($30{\pm}1.0{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$), 광주기(16/8h light/dark)로 조절되었다. 연구결과, 모든 처리구의 생체중은 초기접종량 보다 11배 이상 증가하였고, 그 중 1MS배지에서는 전엽체의 생체중이 7.3g으로 가장 많이 증가하였다. 뿐만 아니라, 형태형성도 우수하여 모두 정상적인 전엽체의 형태인 하트형으로 발달이 유도되었다. 전엽체로부터 포자체 형성을 유도하고자, 원예상토, 피트모스, 펄라이트 및 마사토의 혼합비율을 5종류로 달리하여 사각분($7.5{\times}7.5{\times}7.5cm$)에 혼합토양을 충진하였다. 전엽체 1g과 증류수 25mL를 핸드블랜더로 10초간 분쇄하여 사각분의 토양표면에 균일하게 분주하는 방법을 사용하였다. 이후 온도($25{\pm}1.0^{\circ}C$), 광도($43{\pm}2.0{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$), 광주기(16/8h light/dark), 습도($72{\pm}2.0%$)를 유지하면서 10주간 재배되었다. 연구결과, 원예상토 단용, 원예상토와 펄라이트 및 마사토가 2:1(v:v)로 혼합된 토양에서 각 498.0, 402.5, 482.5개의 포자체가 형성되어 사각분 면적대비 7.16개($cm^2$)가 생산되었다. 한편 포자체의 생육은 원예상토와 펄라이트가 2:1(v:v)로 혼합된 토양에서 생체중, 엽장, 엽폭, 근장 및 SPAD value 등이 우수하였다.

• Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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• 2018.04a
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• pp.23-23
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• 2018

본 연구는 참우드풀과 우드풀의 중간형으로 알려진 좀우드풀(Woodsia intermedia Tagawa)의 전엽체 증식 및 포자체 형성을 위한 기내 외 번식조건을 구명하고자 수행되었다. 실험재료는 포자를 발아시켜 획득한 전엽체를 8주 간격으로 계대배양하면서 확보하였다. 전엽체 증식에 적합한 배양조건을 탐색하고자, 전엽체 300mg을 다진 후 배지종류(Knop, 1/4, 1/2 및 1MS)와 배지구성물질(sucrose와 활성탄)의 농도를 달리하여 8주간 배양하였다. 배양실은 온도 $25{\pm}1.0^{\circ}C$와 광도 $30{\pm}1.0{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$(16/8h)로 조절되었다. 연구결과, Knop배지에서 생체중이 2.4g으로 전엽체의 증식이 가장 왕성하였다. 한편 MS계열 배지는 농도에 관계없이 매우 저조한 증식을 보였다. Sucrose는 0.5%를 첨가한 배지에서 생체중의 증가량이 가장 컸으며, 활성탄은 첨가농도에 관계없이 유사한 증식수준을 나타냈다. 포자체 형성에 적합한 토양조건을 확인하고자, 인공토양(원예상토, 피트모스, 펄라이트 및 마사토)의 비율을 달리하여 5종류의 혼합토양을 조성하였다. 혼합토양을 사각분($7.5{\times}7.5{\times}7.5cm$)에 충진하고, 준비된 전엽체 1g을 10초간 분쇄한 다음 토양표면에 분주하여 11주간 재배하였다. 재배환경은 온도 $25{\pm}1.0^{\circ}C$, 광도 $43{\pm}2.0{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$(16/8h) 및 습도 $72{\pm}2.0%$로 조절되었다. 연구결과, 모든 처리구에서 포자체의 형성이 확인되었으며, 특히 원예상토와 마사토를 2:1(v:v)로 혼합한 토양에서 포트당 421.0개의 많은 포자체가 형성되었다. 다음으로 원예상토와 펄라이트를 2:1(v:v)로 혼용한 토양, 원예상토, 피트모스, 마사토를 1:1:1(v:v:v)로 혼합한 토양, 원예상토 단용, 원예상토, 피트모스, 펄라이트를 1:1:1(v:v:v)로 혼합한 토양 순으로 각 228.0, 203.3, 126.8, 91.5개 형성되었다. 따라서 좀우드풀의 포자체를 대량으로 생산하기 위해서는 원예상토와 마사토를 2:1(v:v)로 혼용한 토양에 전엽체를 분주하여 재배하는 방법이 효과적일 것으로 판단된다.

• Korean Journal of Microbiology
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• v.28 no.1
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• pp.55-64
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• 1990

Cell volume and DNA contents of the fusants were similar to those of parents. Genetic stability of the fusants was increased when they were cultured on minimal medium (MM) rather than on complete medium (CM), and the fusants were stabilized by subculturing 7 generations each 7 day on MM agar. The finally selected fusants after being cultured for 6 months on CM were stable without segregation. The fusants could also form nuclein and ascospores, and show red and pink colors by the test of TTC colorization. Assimilability and fermentability of carbon sources of the fusants were similarto those of parents. The tolerance of KCl, NaCl, sodium propionate and cycloheximide showed the traits of one strain of parents. When the fusants were cultured for 72 hr and 60 hr in the medium containing 20% glucose and sucrose, respectively, the yield of ethanol for FWKS 260 was reached to 9.6 v/v% and 9.8v/v%, respectively. The sensitive strain Kyokai 7 was found to be killed entirely after cultivation of 48 hr by the killer toxin from the fusants. The recipient S 29 and Kyokai 7 were found to have neither L nor M dsRNA plasmid. However, K 52 and fusants had both L and M dsRNA plasmid of 4.7 kb and 2.5 kb, respectively. The curants treated by heat and cycloheximide did not contain M dsRNA plasmid, but had large amounts of L dsRNA plasmid of those of killer yeasts.

• The Korean Journal of Ecology
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• v.22 no.1
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• pp.39-43
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• 1999

Serratia marcescens, an enterobacterium of gram-negative bacteria, is characterized by resistance of the admium. Cadmium sensitive PM strain did not grow in the medium at cadmium concentration of 50 ppm. PA strain was induced to accommodate to cadmium by cultivating the mother strain (PC strain) in the medium with 50 ppm cadmium. As compared with PC and PM strains, PA strain revealed the excellent growth in cadmium media and accumulated four to five times higher cadmium concentration in cell than other strains. PA strain accumulated 23% of cadmium in cells when cultured in medium treated with 100 ppm cadmium and this cadmium was more accumulated in cytosol fractions than membrane fractions. Analysis by TEM indicated that cadmium was concentrated as a form of granule in cytosol. In protein patterns of cell after the treatment of cadmium, two inducible proteins (28 KDa and 64 KDa) and one reducible protein (45 KDa) were detected by SDS-PAGE. By Atomic Absorption Spectrophotometer, the amounts of cadmium attached to inducible proteins of 28 KDa and 64 KDa were 318.28 ㎍ and 325.37 ㎍ per gram of protein, respectively. It is assumed that these inducible proteins play an important role in the mechanism of cadmium accumulation in cells. A plasmid of 23Kbp was found in S. marcescens. The ability of resistance to cadmium in plasmid was confirmed by curing experiments.