Mutations in the cystathionine ${\beta}$-synthase (CBS) gene cause homocystinuria, the most frequent inherited disorder in sulfur metabolism. CBS is the unique enzyme using both heme and pyridoxal 5-phosphate (PLP) for activity. Among the reported 140 mutations, one of the most common disease-causing alterations in human CBS is G307S mutation. To investigate the pathogenic mechanism of G307S by spectroscopic methods, we engineered the full length and the truncated G247S mutation of yeast CBS that is corresponding mutation to human G307S. Yeast CBS does not contain heme and thus gives a merit to study the spectroscopic properties. The UV-visible spectra of the purified full length and the truncated G247S yeast CBSs showed the total absence of PLP in the protein. The absence of PLP in G247S mutation was also confirmed by the PLP-cyanide adduct formation experiment, which was conducted by the incubation of the purified enzyme with KCN. The adducts were detected using a circular dichroism (CD) and a spectrofluorimeter. Radio isotope activity assay of full length and truncated G247S proteins also gave no activity. Our yeast G247S mutation data suggested that G307S might make the distortion of the active site so that cofactor PLP and substrate can not fit inside the active site. Our yeast CBS study addressed the reason why the G307S mutation in human CBS makes the enzyme inactive that consequently leads to severe clinical phenotype.
Kim, So-Yeun;Kim, Myoung-Hee;Woo, Hee-Gweon;Kim, Bo-Hye;Sohn, Tsang-Uk;Jung, Jin-Wook;Baek, Dae-Heoun
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.35
no.2
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pp.163-172
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2007
This study was designed to investigate that inorganic germanium $(GeO_2)$ did not exist in germanium-fortified yeast or obtained to non-detectable value by current analytical methods and equipments. For this purpose, we achieved $GeO_2$ qualitative analysis protocol which could be the scientific basis of the study. Since reddish brown precipitate was formed from the reaction of $GeO_2$ with 1 equiv $NaBH_4$, and dark brown precipitate was also formed from the reaction of $GeO_2$ with 2 equiv $NaBH_4$, $GeO_2$ was qualitatively analyzed by observing these particular colored-precipitates. Because no color change was showed from the reaction between $NaBH_4$ and $SiO_2$, the color change could be caused by charge transfer transition on Ge-O and B binding properties. The reaction between $NaBH_4$ and germanium-fortified yeast did not show any color change and precipitate formation which meant no $GeO_2$ existed in germanium-fortified yeast. The reaction between $NaBH_4$ and supernatant specimen collected from the outside of dialysis membrane (MWCO 1,200 dalton) did not show any color change and precipitate formation. Therefore, we considered that the both germaniums in and outside of the dialysis membrane were organic germaniums. Germanium-fortified yeast which was biosynthesized organic germanium can be applied not only as a new functional material for improving health, prevention and treatment of chronic degenerative diseases including cancers, and the regulation of immune system, but also as a new materials.
To obtain low switching field ($H_{SW}$) we introduced amorphous ferromagnetic $Co_{70.5}Fe_{4,5}Si_{15}B_{10}$ single and synthetic antiferromagnet (SAF) free layers in magnetic tunnel junctions (MTJs). The switching characteristics for MTJs with structures $Si/SiO_2/Ta$ 45/Ru 9.5/IrMn 10/CoFe 7/AlOx/CoFeSiB 7 or CoFeSiB (t)/Ru 1.0/CoFeSiB (7-t)/Ru 60 (in nm) were investigated and compared to MTJs with $Co_{75}Fe_{25}$ and $Ni_{80}Fe_{20}$ free layers. CoFeSiB showed a lower saturation magnetization of $560 emu/cm^3$ and a higher anisotropy constant of $2800\;erg/cm^3$ than CoFe and NiFe, respectively. An exchange coupling energy ($J_{ex}$) of $-0.003erg/cm^2$ was observed by inserting a 1.0 nm Ru layer in between CoFeSiB layers. In the CoFeSiB single and SAF free layer MTJs, it was frond that the size dependence of the $H_{SW}$ originated from the lower $J_{ex}$ experimentally and by micromagnetic simulation based on the Landau-Lisfschitz-Gilbert equation. The CoFeSiB SAF structures showed lower $H_{SW}$ than that of NiFe, CoFe and CoFeSiB single structures. The CoFeSiB SAF structures were proved to be beneficial far the switching characteristics such as reducing the coercivity and increasing the sensitivity in micrometer to submicrometer-sized elements.
Recently a nano-scale diamond is possible to manufacture forms of powder(below 100 nm) by new processing of explosion or deposition method. Using a sintering of nano-scale diamond is possible to manufacture of grinding tools. We have need of a processing development of coated uniformly inorganic to prevent an abnormal grain growth of nano-crystal and bonding obstacle caused by sintering process. This paper, in order to improve the sintering property of nano-scale diamond, we coated ZnO thin films(thickness: $20{\sim}30\;nm$) in a vacuum by ALD(atomic layer deposition) Economically, in order to deposit ZnO all over the surface of nano-scale diamond powder, we used a new modified fluidized bed processing replaced mechanical vibration effect or fluidized bed reactor which utilized diamond floating owing to pressure of pulse(or purge) processing after inserted diamond powders in quartz tube(L: 20 mm) then closed quartz tube by porosity glass filter. We deposited ZnO thin films by ALD in closed both sides of quartz tube by porosity glass filter by ALD(precursor: DEZn($C_4H_{10}Zn$), reaction gas: $H_2O$) at $10^{\circ}C$(in canister). Processing procedure and injection time of reaction materials set up DEZn pulse-0.1 sec, DEZn purge-20 sec, $H_2O$ pulse-0.1 sec, $H_2O$ purge-40 sec and we put in operation repetitive 100 cycles(1 cycle is 4 steps) We confirmed microstructure of diamond powder and diamond powder doped ZnO thin film by TEM(transmission electron microscope) Through TEM analysis, we confirmed that diamond powder diameter was some $70{\sim}120\;nm$ and shape was tetragonal, hexagonal, etc before ALD. We confirmed that diameter of diamond powders doped ZnO thin film was some $70{\sim}120\;nm$ and uniform ZnO(thickness: $20{\sim}30\;nm$) thin film was successfully deposited on diamond powder surface according to brightness difference between diamond powder and ZnO.
Effects of soaking time and particle size on physicochemical properties of nonwaxy rice flour were investigated. Nonwaxy rice grains were soaked at $4^{\circ}C$ for 0, 1, 12, and 24 hr, dried at room temperature, and milled, Resulting flours were passed through 45-mesh ($<355{\mu}m,\;IL45$) and 100-mesh ($<150{\mu}m\;IL100$) sieves and separated into $<40{\mu}m\;and\;40-100{\mu}m$ series. IL45 series showed higher amount of large particles ($40-100{\mu}m$) than IL100 series. As the soaking time increased, protein and ash contents decreased, and amylose content, water-binding capacity, swelling power, and solubity of nonwaxy rice flours increased. Swelling power and solibility of nonwaxy rice flours also increased between $65-85^{\circ}C$. Water-binding capacity, swelling power, and solubility of IL100 series were higher than those of IL45 series. 12 hr-soaked nonwaxy rice flour pastes showed higher peak viscosity and breakdown but lower setback and visicosity at $95\;and\;50^{\circ}C$ than 1 hr-soaked ones. X-Ray diffractograms of nonwaxy rice flours were not affected, whereas surface appearance was affected, by soaking time and particle size.
Kim, Hyun-Sik;Lee, Hae-Yon;Huh, Jeoung-Sub;Kim, Jong-Ryung;Lee, Dong-Yoon
Proceedings of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers Conference
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2003.11a
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pp.348-351
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2003
산소 과전압이 낮은 $MnO_2$를 촉매로 사용하여 반도체 산화물계의 산소선택성 전극을 제조하고 산화물 coating층의 미세구조와 전기화학적 특성을 분석하였다. Ti 기판에 열분해 법을 이용하여 $MnO_2$ 피막을 형성하였고, 또한 PVDF : $MnO_2$의 함량비를 1 : 1에서 1 : 40까지 정량적으로 변화시키고 DMF의 함량을 각각의 고정된 PVDF : $MnO_2$의 함량비에서 변화시켜 Pb전극에 1.5 mm/sec의 속도로 5회 dipping하여 $MnO_2$ 피막층을 형성 하였다. $450^{\circ}C$에서 1시간 열분해하여 약 $1\;{\mu}m$의 $MnO_2$ 피막층이 형성되었으나 Ti 기판과의 접착력이 약하여 피막자체에 대한 전기화학적 특성을 관찰할 수 없었다. PVDF : DMF = 4 : 96인 경우 pb 전극의 피막층이 얇기 때문에 박리현상이 일어났으며 이는 산화물 용제의 낮은 점도 때문인 것으로 판단된다. 또한 PVDF : DMF = 10 : 90의 경우는 5회 dipping 하여 약 $150\;{\mu}m$의 피막층을 형성하였다. PVDF : $MnO_2$의 함량비가 1:1에서 1:6 까지는 DMF의 함량에 무관하게 전극 특성이 나타나지 않았지만 $MnO_2$의 양이 상대적으로 증가하면 cycle이 증가하더라도 거의 일정한 전류 값을 갖고 $MnO_2$와 PVDF의 비가 20:1 이상의 조성에서는 균일한 CV 특성을 나타냈다. 이는 $MnO_2$가 효과적으로 촉매 작용을 한 것으로 판단되며 anodic polarization에 의한 산소 발생 과전압도 약 1.4V 정도로 감소되었다.동등한 MSIL 코드를 생성하도록 시스템을 컴파일러 기법을 이용하여 모듈별로 구성하였다.적용하였다.n rate compared with conventional face recognition algorithms. 아니라 실내에서도 발생하고 있었다. 정량한 8개 화합물 각각과 총 휘발성 유기화합물의 스피어만 상관계수는 벤젠을 제외하고는 모두 유의하였다. 이중 톨루엔과 크실렌은 총 휘발성 유기화합물과 좋은 상관성 (톨루엔 0.76, 크실렌, 0.87)을 나타내었다. 이 연구는 톨루엔과 크실렌이 총 휘발성 유기화합물의 좋은 지표를 사용될 있고, 톨루엔, 에틸벤젠, 크실렌 등 많은 휘발성 유기화합물의 발생원은 실외뿐 아니라 실내에도 있음을 나타내고 있다.>10)의 $[^{18}F]F_2$를 얻었다. 결론: $^{18}O(p,n)^{18}F$ 핵반응을 이용하여 친전자성 방사성동위원소 $[^{18}F]F_2$를 생산하였다. 표적 챔버는 알루미늄으로 제작하였으며 본 연구에서 연구된 $[^{18}F]F_2$가스는 친핵성 치환반응으로 방사성동위원소를 도입하기 어려운 다양한 방사성의 약품개발에 유용하게 이용될 수 있을 것이다.었으나 움직임 보정 후 영상을 이용하여 비교한 경우, 결합능 변화가 선조체 영역에서 국한되어 나타나며 그 유의성이 움직임 보정 전에 비하여 낮음을 알 수 있었다. 결론: 뇌활성화 과제 수행시에 동반되는 피험자의 머리 움직임에 의하여 도파민 유리가 과대평가되었으며 이는 이 연구에서 제안한 영상정합을 이용한 움직임 보정기법에 의해서 개선되었다. 답이 없는 문제, 문제 만들기, 일반화가 가능한 문제 등으로 보고, 수학적 창의성 중 특히 확산적 사고에 초점을 맞추어 개방형 문제가 확산적 사고의 요소인 유창성, 독창성, 유연성 등에 각각 어떤 영향을 미치는지 20주의 프로그램을 개발, 진행하여 그 효과를 검증하고자
Sox4, a transcription factor, consists of three functional domains: an HMG-box domain as a DNA binding domain, serine rich region as a transactivation domain and glycine rich region (GRR), an unknown functional domain. Although Sox4 is known to be functionally involved in heart, B-cell and reproductive system development, its physiological function remains to be elucidated. We used pGEX expression system to develop a simple and rapid method for purifying Sox4 protein in suitable forms for biochemical studies of their functions. Unexpectedly, we observed that full-length Sox4 appears to be protease-sensitive during expression and purification in E. coli. To map the protease-sensitive site in Sox4, we generated various constructs with each of functional domains of Sox4 and purified as the GST-Sox4 fusion proteins using glutathione beads. We found that the specific cleavage site for the proteolytic enzyme, which exists in E. coli, is localized within the novel GRR of Sox4. Our study suggest that the GRR of Sox4 may a target for the cellular protease action and this cleavage in the GRR may be involved in regulating physiological function of Sox4. Additionally, our study may provide a useful method for investigating the proteolytic cleavage of the target molecule in E. coli.
Kim Sang-Soo;Kim Kyung-Hee;Park Hyo-Jin;Hur Eun-hye;Rhim Hyangshuk
Journal of Life Science
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v.15
no.6
s.73
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pp.961-967
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2005
Macrophage migration inhibitory fartor (MIF), known as a cytokine, is a multifunctional protein that is ubiquitously expressed in a variety of cells and tissues; however, enzymatic function of MIF still remains elusive in cells. In this study, we assessed details of the tautomerase activity of MIF. We established rapid purification condition for MIF by using pGEX system and compared the L-dopachrome tautomerase activity of GST-MIF, tMIF, and MIF. The results show that GST (glutathione S-transferase)-epitope tag or N-terminal amino acids flanking the essential $P^{2}$ almost completely abrogated L-dopachrome tautomerase activity of MIF. Subsequently, to determine whether the N-terminal tags have effects on oligomerization of MIF, protein cross-linking products were analyzed on $15\%$ SDS-PACE. The result demonstrates that N-terminal tags are dispensable for the formation of MIF's homooligomers. Thus, the results imply that exposure of If containing hydrophobic pocket in the active site is critical for L-dopachrome tautomerase activity of MIF. In addition, our study suggest that the MIF's tautomerase activity might be influenced by interacting with cellular partners.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.26
no.1
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pp.163-186
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2000
We have previously screened 150 medicinal plants on the inhibition of elastase and found a significant inhibitory effects of the extracts of Areca catechu L. on the aging and inflammation against the skin tissues. To isolate and identify the compounds having biological activity, we was further purified by each of the solvent fractions, silica gel column chromatography, preparative TLC and reversed-Phase HPLC. Peak in HPLC, which coincided with the inhibitory activity against elastase, was identified as Phenolic substance using various colorimetric methods, UV, and IR. $IC_{50}$/ values of phenolic substance purified from Areca catechu were 26.9 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for porcine pancreatic elastase (PPE) and 60.8 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for human neutrophil elastase (HNE). This Phenolic substance showed more potent activity than those of reference compounds, oleanolic acid (76.5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for PPE, 219.2 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for HNE) and ursolic acid (31.0 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for PPE, 118.6 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for HNE). According to the Lineweaver-Burk Plots, the inhibition against both PPE and HNE by this phenolic substance was competitive with substrate. Phenolic substance from Areca catechu exhibited high free radical scavenging effect ($SC_{50}$/ : 6 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$) and inhibited effectively hyaluronidase activity ($IC_{50}$/: 210 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$). These results suggest that the Phenolic substance Purified from Areca catechu showed anti-aging effect by protecting connective tissue proteins.
First-order cybernetics during the 1940s and 1950s aimed for control of an observed system, while second-order cybernetics during the mid-1970s aspired to address the mechanism of an observing system. The former pursues an objective, subjectless, approach to a system, whereas the latter prefers a subjective, personal approach to a system. Second-order observation must be noted since a human observer is a living system that has its unique cognition. Maturana and Varela place the autopoiesis of this biological system at the core of second-order cybernetics. They contend that an autpoietic system maintains, transforms and produces itself. Technoscientific recreation of biological autopoiesis opens up to a new step in cybernetics: what I describe as third-order cybernetics. The formation of technoscientific autopoiesis overlaps with the Fourth Industrial Revolution or what Erik Brynjolfsson and Andrew McAfee call the Second Machine Age. It leads to a radical shift from human centrism to posthumanity whereby humanity is mechanized, and machinery is biologized. In two versions of the novel Demon Seed, American novelist Dean Koontz explores the significance of technoscientific autopoiesis. The 1973 version dramatizes two kinds of observers: the technophobic human observer and the technology-friendly machine observer Proteus. As the story concludes, the former dominates the latter with the result that an anthropocentric position still works. The 1997 version, however, reveals the victory of the techno-friendly narrator Proteus over the anthropocentric narrator. Losing his narrational position, the technophobic human narrator of the story disappears. In the 1997 version, Proteus becomes the subject of desire in luring divorcee Susan. He longs to flaunt his male egomaniac. His achievement of male identity is a sign of technological autopoiesis characteristic of third-order cybernetics. To display self-producing capabilities integral to the autonomy of machinery, Koontz's novel demonstrates that Proteus manipulates Susan's egg to produce a human-machine mixture. Koontz's demon child, problematically enough, implicates the future of eugenics in an era of technological autopoiesis. Proteus creates a crossbreed of humanity and machinery to engineer a perfect body and mind. He fixes incurable or intractable diseases through genetic modifications. Proteus transfers a vast amount of digital information to his offspring's brain, which enables the demon child to achieve state-of-the-art intelligence. His technological editing of human genes and consciousness leads to digital standardization through unanimous spread of the best qualities of humanity. He gathers distinguished human genes and mental status much like collecting luxury brands. Accordingly, Proteus's child-making project ultimately moves towards technologically-controlled eugenics. Pointedly, it disturbs the classical ideal of liberal humanism celebrating a human being as the master of his or her nature.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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