지난해말부터 올해까지 고병원성 조류인플루엔자(AI)는 지난 3월 말 기준 가금농장 31건으로 지난해 75건에 비해 절반가량 줄어들었다. 살처분 규모도 69호 360만5,000마리로 2008년 이후 가장 작은 규모인 것으로 나타났다. 지난해 중국을 비롯한 동남아에서 AI가 지속적으로 발생하면서 AI 발생의 위험도가 높아졌던 것을 감안하면 정부의 방역과 농가의 차단 방역이 어느 정도 선방을 한 것 아니냐는 의견도 조심스럽게 나오고 있다. 문제는 지금까지 발생한 AI로 반토막이 나버린 오리 산업을 어떻게 재건할 것인가이다. 겨울철 오리사육제한으로 오리 농가는 반으로 줄어버렸고오리 사육 마릿수도 대폭 줄어들었다. 그사이 오리가격은 폭등하면서 소비자피해로까지 이어진 상황이다. 이에 한국오리협회는 새로운 수장을 맞고 오리 산업 재건을 위한 행보를 재촉하고 있다. 기지개를 펴고 있는 오리 산업, 재도약 할 수 있을까. 오리 산업의 현재를 들여다본다.
Jeong Woong Park;Marc Ndimukaga;Jaeyoung Heo;Ki-Duk Song
한국가금학회지
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제50권4호
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pp.193-202
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2023
인플루엔자 A 바이러스(IAVs)는 많은 조류 종의 호흡 기관에 감염되며 사람을 비롯한 다른 동물로 전파될 수 있는 포장된 음극성 역전사 RNA 바이러스이다. 이 연구에서는 이전 연구의 마이크로어레이 데이터를 다시 분석하여 닭에서 공통 및 특이하게 발현되는 유전자(DEG) 및 그들의 생물학적 활동을 식별하였다. 고병원성(HPAIV) 및 저병원성(LPAIV) 인플루엔자 A 바이러스 감염된 닭 세포에서 각각 760개와 405개의 DEG가 발굴되다. HPAIV 및 LPAIV는 각각 670개와 315개의 DEG를 가지고 있으며, 이 중 90개의DEG가 두 바이러스에서 공유된다. HPAIV 감염으로 인해DEG의 기능 주석에 따르면 세포 주기의 기본적인 생물학적 기능과 연관된 다양한 유전자가 발굴되었다. 대상 유전자중에서 CDC Like Kinase 3(CLK3), Nucleic Acid Binding Protein 1(NABP1), Interferon-Inducible Protein 6(IFI6), PIN2 (TERF1) Interacting Telomerase Inhibitor 1(PINX1), 그리고Cellular Communication Network Factor 4(WISP1)의 발현은 polyinosinic:polycytidylic acid(PIC)로 처리된 DF-1 세포에서 변화되었다. 이것은 toll-like receptor 3(TLR3) 리간드인 TLR3 신호에 의해 이러한 유전자의 전사가 조절될 수 있음을 시사하며, 닭에서 AIV의 병리 생리학에 대한 더 나은 이해를 얻기 위해서는 AIV 감염 과정 중에 호스트 반응을 조절할 수 있는 메커니즘을 구명하는 데 더 많은 연구에 초점을 맞추는 것이 필요하다고 사료된다. 이러한 메커니즘에 대한 이해는 신규 치료 전략 개발에 활용될 수 있다.
Highly Pathogenic Avian Influenza (HPAI) is a very acute systemic disease in poultry, particularly in chickens and turkeys caused by HPAI viruses. An outbreak of HPAI caused by subtype H5N1, was first reported in a broiler breeder farm on December 10, 2003 in Korea, although there had been twenty one outbreaks of the disease reported in the world before. Since mid-December 2003, eight Asian countries have confirmed outbreaks of HPAI due to the same subtype. The outbreak has also resulted in at least twenty three fatal human cases in Vietnam and Thailand as of May 17, 2004 according to the WHO. Regarding the first outbreak of recent Asian HPAI, it has been suspected that some Asian countries with the exception of Korea and Japan veiled the fact of HPAI outbreaks since the last half of 2003, even though it was first reported in Korea. There have been total nineteen outbreaks of HPAI among chicken and duck farms in 10 provinces in Korea since Dec. 2003 and approximately 5,280,000 birds were slaughtered from 392 farms for eradication of the disease and preemptive culling. The origin of the H5Nl HPAI virus introduced into the country are unknown and still under epidemiological investigation. Current status of outbreaks and characteristics of HPAI will be reviewed and discussed on the basis of genetic, virological, clinicopathological, and ecological aspect, as well as future measures for surveillance and prevention of the disease in Korea.
To reduce the economic impact and control Low pathogenic avian influenza (LPAI), vaccination with inactivated vaccine has been considered in this country. We tried to develop inactivated vaccine with reassorted H9N3 AI virus which has different type of neuraminidase compare to those of field AI virus. Before reassorted vaccine was produced, we confirm the virus as master seed by limiting dilution, RT-PCR and sequencing method. Also, we evaluate the biological characteristics of the virus to find out the possibility of prevention against field infection of AI virus. Finally, we evaluate the safety and efficacy of the vaccine made of reassorted AI virus in the specific pathogen free (SPF) chickens. After limiting dilution, we choose RV7CE4 as a vaccine candidate and compare the gene sequence of this vaccine strain to those of AI05GA which is parents strain. Compared to amino acid sequences of specific gene of AI05GA and RV7CE4, exhibited a high degree of amino acid sequence homology. In the safety and efficacy test, there were no specific clinical signs or mortality. Reassorted H9N3 viruses were reisolated in cloaca swab on 5 days post inoculation. In the vaccine study, once or twice vaccination was performed and challenged with H9N2 field virus (01310). Vaccine has no adverse effect on birds and formed good immune capability which reduce viral shedding in the birds infected with 01310. Based on the above result, we developed reassorted H9N3 vaccine which will efficiently prevent the low pathogenic AIV (H9N2) infection in the poultry farms.
최근 야외에서 ND가 간간히 발생하고 있다는 소식이 들려오고 있다. 우리나라의 경우 ND 발생의 경우 독특한 양상을 띠고 있다. 첫째는 $2\~3$년의 주기로 발생이 되고 있으며 둘째는 $4\~6$월 사이에 발생이 집중 된다는 점이다. 고병원성 가금 인플루엔자(HPAI)를 겪은 우리에게 혹 긴장감이 느슨해지면서 농장의 차단 방역과 방역에 소홀해짐으로 올 봄 ND 대유행의 홍역을 치르는 것은 아닌지 다시 한번 경각심을 가져 보게 되면서 농장에서 관심을 갖고 있는 ND 분무 접종에 대해 이야기해보고자 한다. $5\~6$년 전까지만 해도 분무 백신에 대한 관심이 별로 없었던 게 사실이다. 그전 같았으면 음수 백신으로 백신 방법을 대치하고 말았을 것을 분무 백신을 해야 하는지? 또 어떻게 해야 하는지? 주의해야 할 점은 무엇인지? 등 여러 가지 질문을 받게 된다. 농장 부화장으로부터 분무기에 대한 관심도 부쩍 높아졌고, 이제는 대부분의 농가들이 분무 백신의 효능과 안전성에 대해 확신을 갖고서 꾸준히 실시하고 있는 것을 알 수가 있다. 대부분 많은 시행착오를 거쳐 나름대로의 기술력을 갖추게 되었고 많은 효과를 보고 있다고 말할 수가 있다. 그러나 아직 일부 농가들은 분무 백신 후 방어력과 후유증 즉, 안전성에 대해 많은 의심을 갖고 있으면서 시간과 노동력이 많이 소요되는 점안 백신을 하는 경우도 종종 보고있다. 이에 수년간의 경험을 통해 필자가 보는 견지에서 분무 백신을 하는데 있어 여러 가지 고려해야 할 사항, 주의 사항, 효과를 최대한 높이기 위한 방법 등을 알아보고자 한다.
본 실험은 산란후기의 공시계에서 가수분해 효모의 수준별 급여를 통해 난 생산성과 난질을 평가하고 평가된 데이터를 기본으로 하여 보조사료적 가치를 검토하기 위하여 수행하였다. 58주령 하이라인 실용 갈색계 총 180수를 공시하여 3개 처리에 6반복 반복당 10수를 임의배치 하였고 가수분해 효모를 0, 0.1 및 0.2% 수준으로 첨가한 실험사료를 8주간 급여하였다. 첫 전기 4주간의 산란율과 일산란량에서는 처리간에 큰 차이가 없었으나, 후기 4주간 동안 대조구에 비하여 가수분해 효모를 첨가한 실험구의 산란율과 일산란량이 유의하게 높은 것으로 나타났다(P<0.05). 난중은 처리간에 큰 차이가 없었다. 전체 실험기간 중의 난각강도와 난각두께는 가수분해 효모 첨가구에서 유의하게 높은 결과가 관찰되었다(P<0.05). 호우유니트에서는 처리간에 차이가 없었으나 난황색은 가수분해 효모 0.1% 첨가구에서 대조구에 비하여 유의하게 높았다(P<0.05). 난각 미세구조에서 유두층은 가수분해 효모 급여에 따라 선형적으로 증가하는 결과가 관찰되었다(P<0.05). 가수분해 효모 0.2% 첨가구에서 가금 인플루엔자 바이러스에 대한 항체역가가 유의하게 증가하였다(P<0.05). 결론적으로 가수분해 효모의 첨가 급여에 의해 산란후기의 난 생산성이 부분적으로 개선되었고, 난질 및 난각질이 유의하게 향상됨으로서 산란계의 후기 생산단계에 효과적으로 적용할 수 있음이 시사되었다.
조류 인플루엔자바이러스(AIV) H5N1 아형을 Real-time PCR법을 이용하여 가장 빠르게 진단할 수 있는 방법을 개발하였다. 검색 대상의 염기서열은 AIV H5N1 아형의 hemagglutinin 유전자 중 가장 상동성이 높은 387 bp의 부위를 선택하였고, 실험의 안전을 위하여 인공합섬의 방법으로 제작하였다. Microchip을 기반으로 한Real-time PCR법을 사용하였으며, 총PCR 반응액의 양을 $1{\mu}l$로, PCR 과정 중 각 단계, 즉 해리, 접합, 신장의 시간을 각1초, 1초, 3초로 하여 총 실험시간을 단축하였다. 진단을 위한 실험과정에서 PCR 및 융점분식에 소요된 최단 시간은 12분28초였으며, 민감도측정에서 최소2.4개의 hemaggutinin 유전자를 기질로 하여 목적한 특이 189 bp의 PCR 산물을 증폭할 수 있었기에, 본 연구에서는 이런 초고속 PCR 실험방식을 Quick Real-time PCR이라 명명하였다. 이 결과들은 가금류 및 사람에게 전파된 AIV H5N1아형의 진단에 적용될 수 있을 뿐 아니라, PCR이 사용되는 다른 신속검색법에도 널리 적용 될 수 있을 것으로 기대한다.
닭 전염성 F낭병 (IBD)은 닭에서 전염성이 강하고 발병으로 인하여 양계 산업에 막대한 경제적 피해를 입히는 닭의 바이러스성 전염병이다. 이 연구에서는 수 분 이내에 검사 시료로부터 닭 전염성 F낭병 바이러스를 검출할 수 있는 시판용 면역크로마토그래피법 검사 킷트를 이용하여 IBD 진단에 있어서의 유용성을 조사하였다. 사용한 면역크로마토그래피법 검사 킷트는 닭 전염성 F낭병 바이러스 VP2에 특이적인 단클론 항체를 이용하여 닭 전염성 F낭병 바이러스를 검출하도록 고안되었다. 바이러스 감염 역가를 알고 있는 IBDV를 사용하여 조사한 결과, IC 검사 킷트의 검출 한계는 $10^{3.1}$ 내지 $10^{3.9}$$EID_{50}$/mL이었다. 이 검사 킷트는 닭의 다른 전염성 바이러스인 뉴캣슬병 바이러스, 닭 전염성 기관지염 바이러스, 조류인플루엔자 바이러스 및 전염성 후두기관염 바이러스에 대하여 비특이 반응을 나타내지 않았다. 고병원성의 IBDV를 실험적으로 감염시킨 후 3일 내지 4일에 폐사한 닭의 장기별로 조사한 결과, 모든 폐사 닭의 F낭, 장편도, 비장, 신장 시료들은 면역크로마토그래피법 검사 킷트에서 강한 양성반응을 나타내었다. 검사 시료 중 F낭 시료가 IC 검사 킷트에서 가장 강한 양성반응을 나타내었다. 폐사 닭의 간, 흉선, 선위의 경우, 각각 검사시료의 87.5%, 37.5% and 0%가 양성 반응을 나타내었다. 면역크로마토그래피법 검사 킷트에서 음성이었던 시료 중 흉선 시료 한 점을 제외한 모든 시료는 DAS-ELISA와 동일한 검사 결과를 나타내었으나, 검사 시료 중 흉선과 선위 일부에서 RT-PCR 검사에서 양성 반응을 나타내었다. 야외 IBD 발생 농장과 비발생 농장에서 수거한 폐사닭 231수의 조직을 면봉으로 도말하여 채취한 시료를 조사하여 RT-PCR법과 비교한 결과, 상대적 민감도와 특이도는 각각 100% (109/109) 및 97.5% (119/122)를 나타났으며, 두 검사 방법간 kappa value는 0.97이었다. 우리의 연구 결과는 IC 검사 킷트는 야외 양계 농장에서 폐사 닭을 대상으로 IBD를 진단하는 데 적용하기에 매우 유용하다는 것을 말해준다.
한국 계란 산업은 점차 증가하고 있지만, 해외의존도가 높은 산란계 종자는 조류 인플루엔자와 같은 이유로 위기를 직면한 바가 있다. 이와 같은 상황에 대응하기 위해서 한국은 Golden Seed Project와 같은 토종닭 개발 사업에 노력을 가하고 있다. 토종닭은 영양 및 풍미 측면에서 우수하나, 산란용 토종닭에 대한 개발은 부족하다. 따라서 본 연구는 잡종교배를 통하여 산란용 토종닭 종자 라인을 생성하여 일반 실용계의 육성기 동안 체중과 생존율을 비교분석하며, 개발의 진행도와 우수한 교배조합을 선정을 통해 산란용 토종닭 종자 라인 구축에 기여하고자 한다. 본 연구는 Hong et al.(2023)의 부화 후부터 40주까지 잡종교배 토종닭의 체중과 산란능력에 대한 평가 연구의 후속연구로 진행되었다. 앞선 연구를 바탕으로 선정한 4개의 종계라인(CF, CK, YC, YD)을 바탕으로 생성한 12개의 토종닭 교배조합(i.e., CFCK, CFYC, CFYD, CKCF, CKYC, CKYC, CKYD, YCYD, YCYD, YCCF, YCCK, YDCF, YDCK, and YDYC)과 실용 산란계(Hy-Line Brown)를 총 873마리를 공시동물로 설정하였다. 실험기간은 부화 후부터 16주까지 격주로 체중과 생존력을 분석하였다. CKCF, YCYD, YDYC는 실험 개시일부터 마지막까지 Hy-Line Brown과 가장 유사한 체중을 보였고, 그 외의 교배조합 종은 Hy-Line Brown에 비하여 유의적으로 낮은 체중을 보였다. 또한 부화 후부터 14주차까지의 전체 처리구들의 생존력은 55%~100%, 14~16주차는 80%~100%로 나타났다. 토종닭 교배조합 가운데 CKCF, CFCK, CFYC, CFYD 그리고 YDYC는 Hy-Line Brown과비교하여 우수한 생존력을 기록했고, 나타난 교배조합 대부분이 CF를 포함하고 있다는 특징을 파악할 수 있었다. 본 연구를 통하여 CKCF와 YDYC가 산란용 토종닭 교배조합의 육성기 체중 및 생존력에서 가장 우수한 성적을 나타내었다. 향후 산란기 연구에서는 CKCF를 포함하여 함께 우수한 성적을 나타낸 CFCK, YCYD, YDYC의 산란성적을 관찰하여 산란용 토종닭의 산업화에 기여할 수 있을 것으로 판단된다.
조류 독감바이러스(avian influenza virus, AIV)는 사람에게서 발생하는 인플루엔자 대유행에 중요한 역할을 한다. 특히 최근 AIV H9N2형에 의한 가금류 감염이 빈번히 나타나고 있어 인체 감염이 상당히 우려되는 실정이다. 본 연구에서는 최종적으로 AIV의 HA와 NA 단백질에 특이적으로 반응하는 항혈청을 생산하고자 하였다. 먼저 감염된 닭에서 분리된 AIV H9N2 한국분리주 A/Ck/Kr/MS96/96의 게놈RNA로부터 RT-PCR 방법으로 HA와 NA 단백질 N-말단부위에 해당하는 염기서열을 증폭하였다. 이렇게 증폭된 DNA단편은 E. coli 발현벡터 pGEX4T-1에 삽입한 후, BL21 세포에서 각각의 GST fusion protein (GST-HAln와 GST-NAn) 형태로 발현하였다. GST-HAln와 GST-NAn은 모두 glutathione sepharose column을 사용하여 분리 및 정제하였으며, 정제된 단배질을 항원으로 사용하여 토끼 항혈청을 생산하였다. 생산된 항혈청의 항원특이성은 AIV H9N2 한국분리주 A/Ck/Kr/MS96/96로 감염된 MDCK 세포의 cell extract를 사용하여 immunoblotting을 수행함으로써 확인하였다. 본 실험결과AIV H9N2의 HA와 NA단백질 N-말단부위에 해당하는 재조합GST fusion protein과, 이들 각각의 단백질에 특이적으로 반응하는 항혈청은 앞으로AIV 감염의 진단 뿐만 아니라, AIV에 대한 기초연구에 중요한 재료로 사용될 것으로 기대한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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