• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제5권3호
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• pp.215-218
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• 2000

Sialytrisaccharides based on $\beta$-galactosyldisaccharides were synthesized using $\beta$-galactosidase and trans-sialidase in one pot. Using $\beta$-galactosidase from Bacillus Ciculans and trans-sialidase from Trypanosoma cruzi simulaneously, 6mM sialyltrisaccharides composed of about 95% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,4)GlcNAc and 5% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,6)GlcNAc were produced from a reaction mixture containing 25mM o-nitropheny1-$\beta$-D-galsctolneuraminic acid. One beauty of this reaction was that a secondary hydrolysis of the disaccharide intermediate occurring between the activated galactopyranoside and N-acetylgucosamine was prevented. Using $\beta$-galactosidase from Escherichia cloi and the same trans-sialidase, 15mM sialyltrisaccharides composed of about 90% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,6)GlcNac and 10% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,4)GlcNAc were produced from a reaction misture containing 400nM galactose, 800nM N-acetylglucosylation rection between galactose and N-actylgucosamine was diminant since the disaccharide intermediate mainly resulted sreulted in the silylated product.

• 한국식품과학회지
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• 제22권2호
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• pp.134-139
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• 1990

누룩으로부터 ${\beta}-galactosidase$ 활성을 가지는 균주를 순수분리하여 분리된 균주(NY-15)의 ${\beta}-galactosidase$를 정제하였다. 다량배양하여 모은 균체를 8%(v/v) toluene 처리에 의한 추출액을 정제의 출발 물질로 하여 acetone 침전에 의해서 탈지처리를 한 후 40-60%포화의 ammonium sulfate 분획을 하고 DEAE-cellulose, DEAE-Sephadex A-50의 이온교환 chromatography를 한 후 Agarose-PAPT를 이용한 affinity chromatography에 의해서 정제하였다. 이 정제법에 의해서 ${\beta}-galactosidase$는 조효소 추출액으로부터 40배 정제되었으며 회수율은 7.7%였나. 누룩 yeast의 ${\beta}-galactosidase$는 2개의 subunit로 되어 있으며, 각 subunit 분자량은 각각 96,000과 130,000이었다. 효소활성에의 최적 pH는 7.5이었고, 최적온도는 $40^{\circ}C$이었다.

• 미생물학회지
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• 제23권1호
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• pp.20-24
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• 1985

Klebsiella pnellmoniae의 nif-lac융합변이주를 사용하여 질소고정 유전자 발현에 미치는 질소원의 효과를 검토하였다. Klebsiella pnellmoniae UN4482를 heat induction하여 만든 Mudllysate를 K. pnellmoniae U UN2979에 접종시켜 nif-lac융합체 약 80여주를 분리하고 이들을 LX series로 명하였다. 이들의 ${\beta}-galactosidase$ 한성은 $NH_4^+$의 존재하에 크게 억제되었다. Serine, glutamine, asparagine같은 아미노산을 켈소원으로 사용했을때 K. pnellmoniae의 성장은 양호하였으며. NFHM배지에서nif-lac융합주LX-9, LX-22의 ${\beta}-galactosidase$의 환성은 억제 효과도 높았으나, glutamine, histidine, arginine 같은 amino acid는 위와 반대 의 효과플 나타냈다. Casitone, prote-ose peptone같은 유기섣소원(2 mg/ml )의 균성장에 대한효과는 전반적으로양호했으나LX-9, LX-22 의 ${\beta}-galactosidase$활성에 대한 억제효과는 각 칠소원에 따라 다르게 나타났다. 한편, 질소원이 없는 최소배지에서의 LX-9와 L LX-22의 ${\beta}-galactosidase$의 활성은 초기 4 시간내에 급격히 증가하였다.

• 한국식품과학회지
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• 제28권5호
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• pp.987-993
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• 1996

본 연구에서는 Bifidobacterium을 우유와 두유에 접종하여 $37^{\circ}C$에서 발효 특성, 적정 발효 기간 및 효율적인 증식을 위한 생육 인자를 찾고자 하였다. 이를 위하여 pH, 산도, glucose함량, 생균수, ${\alpha}-galactosidase$활성 그리고 ${\beta}-galactosidase$활성 변화를 조사하였다. $37^{\circ}C$에서 일반 발효 특성을 측정했을 때 48시간동안 우유의 발효는 pH의 감소와 산 생성의 증가는 현저한 반면, 세포 증식을 24시간동안 증가하였으나 남은 24시간동안은 감소를 보였다. 또한 효소 반응은 ${\beta}-galactosidase$ 활성이 높은 반면, ${\alpha}-galactosidase$는 비교적 낮았으며 glucose 함량은 세포 증식기에 높았다. 두유의 경우는 우유에 비해 pH의 감소가 큰 반면 적정산도 증가는 비슷하였다. 세포 증식은 발효 2일동안 이루어졌으며, ${\alpha}-,\;{\beta}-galactosidase$ 모두 활성이 높게 나타났고, glucose 함량도 1일 동안 지속적인 증가를 나타냈다. 또한 적정 발효기간은 발효유는 24-36시간, 발효 두유는 약 24시간이 바람직한 것으로 나타났다. Bifidobacterium의 성장 촉진 인자의 영향을 발효 시간에 따른 pH와 생균수 변화로 조사한 결과, 두유에서는 fucosyllactose, 그리고 우유에서는 발효 초기에 L-cysteine·HCl, 발효 진행중에는 fucosyllactose가 효과적인 생육 인자로 작용하였다.

• 한국동물학회지
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• 제33권3호
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• pp.365-372
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• 1990

Transgenic 양서류를 만들기 위한 연구의 일환으로 bacterial $\beta$-galactosidase 유전자를 cytopalsmic actin promoter에 연결시킨 plasmid를 xenopus 수정란에 미세주입하여 외부 DNA의 발현을 조사하였다. $\beta$-gal DNA를 20nl당 1ng에서 2ng의 농도로 미세주입하는 경우, 이 농도는 배발생에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 또한 유전자 산물인 $\beta$-galactosidase는 양서류의 모든 배엽성 세포에서 발현 가능하고, 정상적인 활성을 나타내므로 외부 DNA의 발현여부를 in situ 상태에서 판명할 수 있었다. 주입된 외부 DNA는 낭배기 시기에 최초로 발현되고, 적어도 올챙이 시기까지 유지 및 발현 가능하며, 초기 발생동안 extrachromosomal 상태에서 발현되는 것으로 나타났다. 그러나 발현의 정도는 주입된 개체는 물론 매 실험마다 차이를 보였고, 또한 기질인 X-Gal에 반응하는 부위가 전체 배에 분포하는 겅우는 거의 없으며, 일정 부위에 한정되어 있음이 관찰되었다. 이는 세포막을 통해서 DNA가 다른 할구로 이동하지 못하는 사실에 비추어 미세주입된 DNA가 난할시 각 할구로 균등하게 분포되지 못하고 국부적으로 나뉘어 들어가기 때문인 것으로 사료된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제27권3호
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• pp.260-265
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• 1999

The structural $\beta$-galactosidase gene (lacZ) from Lactococcus lactis ssp. lactis 7962 was cloned into plamid vector pKF18, which was designated as pKF-gal. Expression of the lacZ from L. lactis 7962 was found to be higher when cells were grown at 3$0^{\circ}C$ than 37$^{\circ}C$. Maximum $\beta$-galactosidase activity was obtained when E. coli/pKF-gal was cultivated for 6hr at 3$0^{\circ}C$ and for 3hr at 37$^{\circ}C$, and L. lactis 7962 was grown for 8hr at 3$0^{\circ}C$. Enzyme induction was achieved by the addition of lactose, galactose, or lactose+IPTG to growing culture. The addition of glucose had no effect on enzyme induction.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제23권5호
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• pp.513-518
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• 1995

To evaluate bile salt-tolerance of lactic acid bacteria (LAB, Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus casei IFO 3533, Streptococcus thermnophilus KCTC 2185, Lactobacillus lactis ATCC 4797, and Lactobacillus bulgaricus ATCC 11842), We investigated the survivals, acid production and $\beta $-galactosidase activity of LAB under anaerobic broth system. Cellular permeability of LAB and their cellular retention of $\beta $-galactosidase were also examined in the same system. Although the growth of LAB was slightly suppressed by 0.3% bile salt, they showed normal growth curve. Streptococcus thermophilus KCTC 2185 was significantly more resistant to bile salt than the others. The $\beta $-galactosidase activity from Streptococcus thermophilus KCTC 2185 and Lactobacillus bulgaricus ATCC 11842 and their cellular retention of $\beta $-galactosidase decreased by 0.3% bile salt. The cellular permeability of LAB in the presence of bile salt increased significantly.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제1권4호
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• pp.227-231
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• 1991

A gene coding for a $\beta$-galactosidase of Bacillus subtilis HP-4 was cloned in E. coli JM109 by inserting HindIII digested fragment of B. subtilis HP-4 chromosomal DNA into the site of pBR322 and selecting recombinant transformant showing blue color on X-gal plate. The recombinant plasmid, named pBG109, was found to contain the 1.4 Kbp HindIII fragment originated from B. subtilis HP-4 chromosomal DNA by Southern hybridization. The cloned gene was stably maintained and expressed in E. coli JM109 and the pBG109 encoded $\beta$-galactosidase had the same enzymatic properties as those of $\beta$-galactosidase produced by B. subtilis HP-4.

• 한국식품영양과학회지
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• 제24권2호
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• pp.242-246
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• 1995

This paper was carried out to investigate changes in cell wall, cell wall polysaccharides, pectic substances extracted from cell wall of persimmon fruits treated with polygalacturonase and $\beta$-galactosidase in vitro. Degrading degree of cell wall treated with cell wall-degrading enzymes were higher in order polygalacturonase, polygalacturonase+$\beta$-galactosidase and $\beta$-galactosidase. Contents of soluble pectic substances in cell wall treated with cell wall-degrading enzymes showed as the same order as degrading degree of cell wall, while contents of insoluble pectin lower. Contents of versene-soluble pectin and total pectic substance were not affected by cell wall-degrading enzymes. Contents of uronic acid and hexose in soluble material isolated from cell wall treated with polygalacturonase and mixed enzyme were higher than those of untreatment and $\beta$-galactosidase treatment.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권1호
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• pp.46-52
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• 1992

농축유청으로부터 유청음료 제조를 위한 최적조건을 조사하기 위해 역삼투장치(reverse osmosis system)를 사용하여 치즈유청 속의 유당을 농축한 수 $\beta$-D-glactosidase로 가수분해시켜 그 분해정도를 HPLC(high performance liquid chromatography)로 측정하였다. 유당의 가수분해 정도는 농축적 유청, 2배 농축 유청과 3배 농축 유청 순으로 가수분해되었고 일정량의 효소첨가에 의해 농축된 염이 $\beta$-D-Galactosidase에 대한 약간의 저해작용을 일으켰다.