키틴을 효소적인 방법으로 분해하여 키틴올리고머를 생산할 수 있는 값싸고 안정적인 효소원을 확보하기 위하여 농어, 방어, 대구, 닭 등의 동물체로 부터 키틴분해효소를 탐색하였다. 각 효소원의 장기와 소화액 및 달팽이 ${\beta}-glucuronidase$로 부터 키틴분해활성을 측정한 결과, 대구와 닭은 키틴을 주로 중합도 $3{\sim}5$의 크기로 분해하며 endochitinase의 활성도가 exochitinase활성보다 $7{\sim}10$배 높았다. 달팽이 ${\beta}-glucuronidase$는 키틴을 모두 N-acetylglucosamine으로 분해하였고 닭의 경우 소화기조직과 내용물에서 모두 endochitinase활성이 높았다. 어류중에서 농어는 키틴분해활성을 보이지 않았으며 방어와 대구는 비슷한 수준의 키틴분해활성을 보였다. 이들 효소의 최적pH는 $4{\sim}5$, 최적온도는 $50{\sim}60^{\circ}C$였다. 한편 키토산분해능력은 닭의 소화기내용물과 조직, 대구의 위조직에서 관찰되었으며, 닭 소화기내용물이 가장 높았으나 키틴분해능의 15%에 지나지 않았으며 그 다음은 달팽이의 ${\beta}-glucuronidase$로 닭 소화기내용물의 키토산분해능력의 약 30% 활성을 보였다. 키틴올리고머의 생산을 위한 가장 적합한 효소원으로 exochitinase활성이 적고, endochitinase활성이 높으며 값이 저렴하고 안정적인 공급이 가능한 닭의 소화기가 적합한 것으로 사료되었다.
Bombyx mori silk fibroin(SF)과 블렌드 필름을 만들기 위하여 키토산에 1,3-propanesultone을 반응시켜 수용성 sulfobetaine chitosan(SCs)을 제조하였다. 여러 가지 비율의 SF/SCs 블렌드 필름을 B. mori SF와 SCs의 수용액을 혼합하여 제조하였다. 수용액으로부터 얻어진 SF/SCs 블렌드 필름의 구조와 형태 변화는 분광학적 및 열적 분석을 통해 규명하였다. SF와 SCs의 혼합 비율에 따른 인공 피부나 화상치료 목적의 비이오재료로서의 물리적 및 기계적 성질에 미치는 영향을 조사하였다. X-선 분석으로 두 생체고분자 사이에 좋은 친화성을 보여주고 있음을 알 수 있었으며 기계적 성질도 SCs의 함량이 증가하면 크게 증가하였다. $37^{\circ}C$에서 phosphate buffered saline solution 용액 중에서 in vitro 분해 실험을 8주 동안 시행한 결과 46.4%가 분해됨을 알 수 있었다. MC3T3-E1 세포에 의한 독성 실험 결과 무독성을 나타내 주었으며, 3일의 배양 후 SF/SCs 필름의 상대 세포 수는 최적화된 tissue culture plastic보다 약간 낮게 나타남을 알 수 있었다.
본 연구는 가공식품 중 상용식품이라 할 수 있는 청량음료류와 현재 건강식품으로 많이 섭취되고 있는 홍삼음료의 무기 금속 함량을 분석하고 섭취 수준을 추정해 봄으로써 영양학적, 보건학적 평가의 기초자료로 사용하고자, 2000년 3월에서 9월말까지 서울시내 대형 유통 매장에서 판매 중인 청량음료 및 홍삼음료 총 16종 80건을 채취하여 철(Fe), 칼슘(Ca), 아연(Zn), 나트륨(Na), 마그네슘(Mg), 칼륨(K) 함량을 측정하였다. 과채음료의 경우 전반적으로 다양한 무기 금속들이 다량 함유되어 있었으며, 혼합음료 및 탄산음료의 경우 나트륨 함량이 칼륨 함량보다 높은 것에 비해 칼륨 함량이 높게 나타났는데, 이는 주로 오렌지, 사과, 토마토 등 원료에 기인된 것이었다. 칼슘 함량의 경우 키토산이 함유된 일부 혼합음료에서 매우 높게 나타났는데, 칼슘은 뼈의 성장과 골다공증의 예방, 고혈압, 동맥경화의 예방에 효과가 있는 것으로 밝혀져 섭취가 장려되고 있으나, 뇨 결석등 일부 질환에 있어서는 주의가 요구된다. 또한 어린이 및 청소년층이 주 소비계층인 탄산음료의 경우 습관성 음용으로 인한 칼슘과 인 섭취의 불균형이 성장에 저해를 초래할 수 있으며, 철, 구리, 아연 등 다른 무기 금속의 흡수에도 영향을 미치므로 이에 대한 보다 구체적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.
본 연구에서는 키토메이트, 다이균, IC-66D, 골드보르도, 바이오스팟 등 5종의 친환경농자재의 포도 주요 균류병 병원균 7가지에 대한 생장억제 효과를 검정하였다. 병원균의 생장억제 효과는 친환경농자재 별로 차이를 보였는데, 천연 식물추출물성분인 다이균의 생장억제 효과가 가장 우수하였다. 다이균은 $2,500{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$을 포함한 PDA 배지에서 C. gloeosporioides 04-159를 제외한 병원균의 균사생장을 75% 이상 억제하였다. 키토메이트의 생장억제 효과는 병원균에 따라 큰 차이가 있었는데 $40,000{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$을 함유한 PDA 배지에서 B. cinerea 06-063의 균사생장을 81.1% 억제한 반면에 탄저병균인 C. gloeosporioides 04-159는 6.5% 균사 생장억제율을 보였다. 두 가지 보르도액 제제인 IC-66D와 골드보르도의 생장억제 효과는 흰얼룩 증상의 원인균인 Acremonium sp.을 제외하고 IC-66D가 골드보르도보다 약간 높았다. 바이오스팟은 다이균 다음으로 생장억제 효과가 높았는데 특히 탄저병균인 C. gloeosporioides 04-159에 대해서는 사용한 농자재 중에서 가장 높았다. 키토메이트, 바이오스팟, 골드보르도의 갈색무의병 포자 발아억제율은 같은 농도에서의 균사 생장억제율보다 월등히 높았다. 본 실험은 포도 친환경적병 방제를 위해서는 한 가지 친환경농자재를 사용할 것이 아니라 여러 가지 제제를 다양하게 사용할 것을 제안한다.
연어과 어류인 열목어 재조합 생식선자극호르몬(r-mtFSH 또는 r-mtLH) 투여에 따른 암컷 뱀장어(Anguilla japonica)의 성성숙 유도 효과를 조사하였다. 양식산 암컷 뱀장어를 해수에 적응시킨 후 매주 복강에 재조합 호르몬을 농도별(0.1, 1, 10 ${\mu}g/m{\ell}$/fish)로 10주 반복 주사하였다. 매주 증체중을 측정하였고, 생식소중량지수 [GSI;(생식소중량/체중량$\times$100]와 혈중 성호르몬 농도 변화를 조사하였다. 그 결과, 모든 실험군에서 GSI는 서서히 감소하는 경향을 나타내었다. 또한, 대조구에서 혈중 testosterone (T)과 estradiol-17$\beta$(E2)는 유의적인 증가를 보이지 않았지만, 재조합 호르몬을 투여한 실험군에서 투여2주와 4주 후에 T와 E2 농도가 증가하였다. 또한, mt-rFSH(1, 10 ${\mu}g/m{\ell}$/fish) 또는 mt-rLH(0.1, 1, 10 ${\mu}g/m{\ell}$/fish)을 투여한 실험군에서는 난경이 대조구에 비해 유의하게 증가하였다. 이러한 결과는 열목어 재조합 생식선자극호르몬이 암컷 뱀장어의 초기 난성숙 발달을 유도함을 시사한다.
Chitosan is known to have antibacterial, antitumorogenic, hypolipidemic and immunopotentiating activities, hence finding diverse uses as a component in varying functional foodstuffs. However, some investigators reported it caused mineral absoiption inhibition and excess coagulation. From the chemical viewpoint, conventional chitosans are high-molecule polymers lacking water solubility, which could be related with their possible toxicity. A newly developed low- molecule water soluble chitosan is thought to have low toxicity compared to conventional chitosans. But no investigation was carried out to evaluate its toxicity. In this study, a 28-day subacute oral toxicity study of the water-soluble chitosan was performed in Sprague-Dawley rats of both sexes. Each 36 male and female rats were orally administered with 500, 1,000 and 2,000 mg/kg/day for 28 consecutive days, respectively. Clinical parameters (growth rate, feed and water consumption, daily inspection, urine analysis) during the 28 days indicated the water-soluble chitosan did not induce any abnonnal changes. There were no abnormal findings due to the administration of the test substance in gross and microscopic findings. We had not found alteration in absolute and relative organ weight between the control and treated groups, with only exception in the liver but lacking dose-dependency. The results of hematology and serum biochemistry examination revealed that no treatment related changes were between control and all dose groups. In conclusion, it was suggested that subacute toxicity of the water-soluble chitosan was low and the no-observed adverse effect level was considered to be over 2,000 mg/kg in rats.
This study was designed to investigated the antitumor effect and change chemosensitivity of chitosan in 2 kinds of humen lung cancer cell lines(NCI-H522, NCI-H596). To evaluate the antitumor effect and synergistic effectof chomosensitivity, MTT assay was used in vitro. then anticancer drugs used were 챤-platin , ectoposide, and adrimycin. The results of this study were as follows; Chitosan shwoed in antitumor effect on both NCI-H522 and NCI-H596. The lung cancer viability percent for NCI-H522 and NCL-H596 showed at the lowest levels of 5.31 and 5.33% when the concentration of chitosan was 25mg/$m\ell$ media and the exposure time of chitosan was 72 hours. ID50 value of chitosan on both NCI-H522 and NCI-H596 showed at the lowest levels of 14.07, 11.68 mg/$m\ell$ media when the exposure time of chitosan was 72 hours. the synergistic effect of chomosensitivity was better in NCI-H596 than in NCI0H522 . When the synergistic effect of chomosensitivity was shown according to the kind of the anticancer drugs, in case of NCI-H522 , in the concentration of 100$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, ectoposide showed the highest synergistic effect of chomosensitivity and then was adrimycin In case of NCI-H596, in the concentration of 100$\mu\textrm{g}$/$m\ell$,, the order of the synergistic effect of chomosensitivity was ectoposide>adrimycin>cis-platin and in the concentration of 10$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, ectoposide>cis-platin >adrimycin. It is concluded that chitosan is an active antitumor agent and is increased chomosensitivity though there is difference according to the kind and the concentration of anticancer drugs. But to be sued to lung cancer theraphy, further studies on toxicity, the mechanism of action, animal experiment are wanted.
생체 적합성, 생분해성, 항균성 등의 특징을 갖는 키토산 지지체는 type I -p collagen과 bFGF 또는 fibronectin을 함께 코팅함으로써 세포적합성을 향상시켜 섬유아세포의 증식과 ECM의 분비를 증가시킬 수 있으며, 인공피부를 위한 적합한 지지체로 사용될 수 있다고 사료된다.
Kyung Hee PAEK;Seok Yoon KWON;Hye Sun CHO;Jin Sam YOU
식물조직배양학회지
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제21권6호
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pp.357-362
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1994
키틴 가수분해 효소와 베타-1,3-글루카네이즈는 식물체의 주요 방어효소로 여겨지고 있다. 본 논문에서는 아기장대풀의 잎조직으로부터 고정된 현탁배양주를 만들고 이어서 에틸렌과 유인제 (elicitor) 처리에 의한 키틴 가수분해 효소유도양상을 분석하였다. 키틴 가수분해 효소활성은 $^3$H으로 표지된 키토산을 기질로 한 radiochemical 분석방법이나 담배식물체의 키틴 가수분해 효소를 대상으로 얻어진 항체를 이용하여 Western 분석방법을 사용하였다. 이 결과 에틸렌과 유인제 처리 공히 48시간후에 가장 활성이 높게 나타남을 관찰하였다. 또한 씨앗, 새싹, 식물체의 잎, 뿌리 등에서의 활성을 조사하여 뿌리에서 키틴 가수분해 효소 활성이 높음을 확인하였다.
국내외 환경문제와 관련하여 농업환경보전 및 안전한 먹거리에 대한 소비자의 요구가 커지면서 친환경농업에 대한 관심이 높이지고 있다. 친환경농업은 화학비료와 농약의 사용을 양분종합관리 및 병해충종합관리등을 통해 저투입하는 농법과 화학비료와 농약의 대체 농자재를 사용하는 유기농법으로 나누어져 있다. 대체 농자재는 목초액, 키토산 등 시판되는 자재를 비롯하여 천혜녹즙, 한방영양제, 아미노산액비 등과 같이 농가를 중심으로 자가 제조되어 활용되고 있는 것이 특징이다. 그러나 대부분 효능이 제대로 검증되지 않고 임의로 사용되고 있기 때문에 본 연구는 농가 자가제조 유기농액비의 미생물학적 특성을 구명하여 유기농 액비의 농업적 활용 제고를 위한 표준화를 확립하기 위해 수행하였다. 농가자가 제조 유기농액비는 성환과 제주에서 5점을 수집하여 액비의 화학성과 미생물상을 비교하였다. 액비 제조시 종균으로 사용되고 있는 부엽토를 5지역에서 채취하여 세균군집의 차이를 보기위해 denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE)를 수행하여 분석하였다. 주요 결과를 요약하면 수집된 액비의 화학성 분석결과, pH는 3.3~4.3로 강한 산성을 나타났으며 EC는 $32.8dS{\cdot}m^{-1}{\sim}552.33dS{\cdot}m^{-1}$ 이었다. 수집된 액비내 미생물상을 조사한 결과, 세균과 방선균은 존재하였지만 사상균은 검출되지 않았다 또한 성환에서 수집된 액비로부터 세균을 분리하여 16S rRNA 염기서열을 분석한 결과, 대부분 Bacillus속으로 95%이상의 높은 유사성을 갖는 것으로 나타났다. 액비 발효 시 종균으로 사용되고 있는 부엽토의 미생물상을 조사한 결과, 지역에 따라 세균은 0.8~$110{\times}10^5cfu{\cdot}g^{-1}$, 방선균은 1.0~$10.9{\times}10^4cfu{\cdot}g^{-1}$, 그리고 사상균은 2.6~$64{\times}10^3cfu{\cdot}g^{-1}$의 균수를 보였다. 부엽토간의 세균군집의 차이를 비교하기 위해 DGGE를 수행한 결과, gel 상에서 다양한 위치의 밴드를 확인할 수 있으며, 부엽토별로 공통적 및 특이적 밴드를 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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