The antimicrobial effect of ${\beta}$-lactam antibiotics, which had ${\beta}$-lactamase inhibitor activity, on Staphylococcus aureus isolated from mastitis was investigated in this study. Out of 166 isolates, 99 isolates (59.6%) produced ${\beta}$-lactamase, and 98 isolates of 99 were ${\beta}$-lactamase positive in above $12.5{\mu}g/m{\ell}$ MIC of penicillin. In the providence distribution, ${\beta}$-lactamase production rate of 4 providence, Gangwon, Gyeonggi, Chungcheong, and Jeolla was 100%, 65.7%, 58.8%, and 50.0%, respectively. Antibiotic activities of ${\beta}$-lactam antibiotics against lactamase positive isolates also were investigated. Antimicrobial effects of ampicillin/sulbactam or amoxicillin/clavulanic acid treated group were better than ampicillin or amoxicillin treated group. In antimicrobial effects on intracellular S aureus, there was no difference 1 hour and 4 hour treatment in control, ampicillin, and amoxicillin group, but in 18 hours treatment, ampicillin/sulbactam or amoxicillin/clavulanic acid had a better effect than ampicillin or amoxicillin (p<0.05).
Bacillus subtilis J105, high resistant bacteria against $\beta$-lactam antibiotics, become higher resistant through induction of $\beta$--lactamase in the presence of $\beta$--lactam antibiotics. When there is no antibiotics in medium, the production of resistance-inductive $\beta$--lactamase reached its plateau 15 hours later. But when there is ampicillin (500$\mu\textrm{g}$/$m\ell$) in medium, the production of enzyme reached its plateau 25 hours later since cultivating bacteria, whereas it is found that enzyme 2,900 units/$m\ell$ about 20 times as much as compared with not-presence of antibiotics was actived. In addition, as the result of MIC comparing applying ampicillin-treated and non-treated strain MIC of ampicillin-treated strain is about 2~27 times higher. It is considered that this strain induce $\beta$--lactamase production by ampicil-lin-treatment, then increasing it resistance. It is found that this resistant strain induce $\beta$--lactamase production against cephalosporin antibiotics as well as peni-cillin. As the result of examining the time of adding antibiotics for each phase of growth, it is concluded that logarith-mic phase is the most effective. As the aboves, it is suggested that this strain is a peculia strain that its resistance is induced high by various $\beta$--lactam antibiotics.
Purpose: Extended-spectrum ${\beta}$-lactamase-producing bacteria-induced urinary tract infections are increasing and require more potent antibiotics such as carbapenems. We evaluated the clinical significance of extended-spectrum ${\beta}$-lactamase -urinary tract infection in children younger than 5 years to select proper antibiotics and determine prognostic factors. Differences were compared between age groups. Methods: We retrospectively studied 288 patients with their first febrile urinary tract infection when they were younger than 5 years. Patients were divided into extended-spectrum ${\beta}$-lactamase-positive and extended-spectrum ${\beta}$-lactamasenegative urinary tract infection groups. Clinical characteristics and outcomes were compared between the groups; an infant group was separately analyzed (onset age younger than 3 months). Results: Extended-spectrum ${\beta}$-lactamase urinary tract infection occurred in 11 % patients who had more frequent previous hospitalization (P=0.02) and higher recurrence rate (P=0.045). During the antimicrobial susceptibility test, the extended-spectrum ${\beta}$-lactamase-positive urinary tract infection group showed resistance to third-generation cephalosporins; however, 98% patients responded clinically. In the infant group, extended-spectrum ${\beta}$-lactamase-positive urinary tract infection occurred in 13% patients and was associated with a longer pre-onset hospitalization history (P=0.002), higher C-reactive protein level (P=0.04), and higher recurrence rate (P=0.02) than that in the older group. Conclusion: Extended-spectrum ${\beta}$-lactamase urinary tract infection requires more attention because of its higher recurrence rate. The antimicrobial susceptibility test demonstrated resistance to third-generation cephalosporins, but they can be used as first-line empirical antibiotics because of their high clinical response rate. Aminoglycosides can be second-line antibiotics before starting carbapenems when third-generation cephalosporins do not show bactericidal effects for extended-spectrum ${\beta}$-lactamase urinary tract infection.
Compared to the first and second-generation cephalosporins, the third-generation cephalosporins are remarkably stable against hydrolysis by the $\beta$-lactamases produced by aerobic gram-negative bacilli, such as Enterobacteriaceae. Among these bacteria, the most prevalent plasmid-encoded $\beta$-lactamase is TEM-1 $\beta$-lactamase belonging to class A or group 2b. This enzyme is produced constitutively and is principally active against peniciflins and old cephalosporins rather than third-generafion cephalosporins, carbapenems and mmobactams. However, new TEM type $\beta$-lactamases including TEM-9 and TEM-12 evolved through point mutations in a gene encoding $\beta$-lactamase have been discovered from patients during chemotherapy. These $\beta$-lactamases are known to be capable of hydrolyzing most of the third-generatim cephalosporins. To study the prevalence of $\beta$-lactamases from clinical isolates collected in Korea. the minimal inhibitory concentratims(MICs) of several third-generation cephalosporins against 628 clinical isolates were determined by agar dilution methods, and $\beta$-lactamas-producing bacteria were isolated by use of cefinase disc. By polymerase chain reaction (PCR) method, clinical isolates harboring a gene for TEM type $\beta$-lactamase were identified among the $\beta$-lactamase producing strains. Twentiy three percent of the clinical isolates was resistant to the thirdgeneration cephalosporins, and more than 90% of resistant cells produced various $\beta$-lactamases. TFM type $\beta$-lactamases were dominant in gram-negative bacilli, such as Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter species. These results suggest the necessity of the development of new cephalosporins which are stable against $\beta$-lactamases like TEM.
One hundred and twenty seven strains of Gram-negative rods (72 E. coli, 45 Klebsieila pneumoniae, 8 Enterobacter spp. and 2 Pseudomonas aeruginosa) isolated from bovine mastitis were examined for resistance to ampicilin, carbenicillin and cefazolin, ${\beta}$-lactamase activity and transferable ${\beta}$-lactamase plasmids. Stains resistant to ampicillin were 13.9% in E. coli, 93.3% in Klebsiella pneumoniae, 87.5% in Enterobacter. spp. and all in Pseudomonas aeruginosa, Resistance of E. coli, Klebsiella pneumoniae and Enterobacter spp. to ampicillin was due to the ${\beta}$-lactamases, but all Pseudomonas aeruginosa exhibited a high level of the non-enzymic resistance. Transferable plasmid-mediated ${\beta}$-lactamase synthesis was demonstrated in 61.9% of Klebsiella pneumoniae, 50% of E. coli and 42.9% of Enterobacter spp. The same ${\beta}$-lactamase plasmids specified different resistance levels to various ${\beta}$-lactam antibiotics in different recipients.
Park, Kye-Whan;Kim, Ki-Ho;Kim, Mee-Young;Im, Chae-Uk;Yim, Chul-Bu
YAKHAK HOEJI
/
v.41
no.4
/
pp.462-472
/
1997
In this approach, the antimicrobial activities of the compounds were compared with the ${\beta}$-lactam antibiotics against ${\beta}$-lactamase producing strains in vitro. Heteroc yclyl exomethylenepenam derivatives were several numbers of 6-exomethylenepenam sodiums (CH1240, CH1245, CH1250, CH2140, CH2145, CH2150). The inhibitory concentraion assay of six compounds were compared with clavulanic acid, sulbactam, tazobactam. Clavulanic acid, sulbactam and tazobactam are used as inhibitors of a variety of plasmid-mediated beta-lactamases. In vitro ${\beta}$-lactamase inhibitory assay, CH1240 and CH2140 were more active than clavulanic acid, sulbactam and tazobactam against ${\beta}$-lactamases overally. And in vitro comparative antimicrobial susceptibility test of six inhibitors were performed with mixed forms of ampicillin, cefotaxime, amoxicillin, ticarcillin, piperacillin, cefoperazone against ${\beta}$-lactamase producing 31 species strains. Consequently CH2140 and CH1240 among the six compounds enhanced the activity of the ${\beta}$-lactams for 31 ${\beta}$-lactamase producing strains.
Identification of a soil microorganism strain X-8, producer of ${\beta}$-lactamase inhibitor, based on its morphological, physiological, biochemical and chemotaxonomical characteristics was performed. The strain X-8 was identified as Pseudomonas sp. The beta-lactamase inhibitor produced by this strain was highly achieved in fermentation medium contained glucose 0.5%, urea 0.25%, $K_2HPO_4{\cdot}3H_2O\;0.5%,\;MgSO_4{\cdot}7H_2O\;0.5%,\;FeSO_4{\cdot}7H_2O\;0.01%,\;CuSO_4,\;ZnSO_4,\;MnSO_4\;0.02%$. The beta-lactamase inhibitor was not extracted by organic solvent such as n-butanol and ethyl acetate but remained in aqueous layer. The n-butanol extract showed antimicrobial activity against M. smegmatis. The ${\beta}$-lactamase inhibitor was stable at pH 7.0~8.0 and 4$^{\circ}C$ for 24h. The ${\beta}$-lactamase inhibitor was bound on ion exchanger Diaion WA-30 and HP-20 and eluted with 2N-$NH_4OH$ and acetone, respectively.
A strain SMF14 producing an extracellular $\beta$-lactamase was isolated from soil and identified to be a strain of Streptomyces aureofaciens. $\beta$-Lactamase was purified from the cell free culture broth through batchwise hydroxyapatite adsorption, anion exchange chromatography on DEAE Sephadex A-50, gel filtration on Sephadex G-75, and adsorption chromatography on hydroxyapatite. The molecular mass was estimated to be about 43 kDa by SDS-PAGE. The $\beta$-lactamase had substrate specificity to penicillins and it was inhibited by clavulanic acid, being classified to the group 2a of penicillinase.. The optimal reaction pH and temperature were pH 6.0~7.5 and $50^{\circ}C$. The $K_m, and V_{max}$ values of $\beta$-lactamase for penicillin G were calculated to be 1.72 mM and 5.4$\times$$10^5 \mu M \cdot min^{-1}$, respectively.
The purpose of this study was typing the plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamases$ produced by enteric bacteria isolated from rivers in Pusan. Six strains of Eschericha coli and fifteen strains of Klebsiella pneumoniae transferred their plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamase$ genes to the recipient strain Eschericha coli J53 $Azid^{R}$. The plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamase$ genes were sequenced directly after PCR and the types were determined by the BCM Search Launcher and GenBank nucleotid database. Determined types of the plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamases$ were TEM-52 and SHV-12. TEM-52 was isolated from both Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae. However SHV-12 was isolated from Klebsiella pneumoniae only. The results indicated that the plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamase$ producing bacteria spreded over the area of clinical to the nature in Korea.
A new extended-spectrum ${\beta}-lactamase$ with an isoelectric point (pl) of 6.2 was detected in Klebsiella pneumoniae Fl 61 that was isolated from a patient with infection. This strain was highly resistant to the third or fourth generation cephalosporins such as cceftazidime ceftriaxone, cefoperzaone, and cefpirome. Analysis of this strain by the double disk diffusion test showed synergies between amoxicillin-clavulanate (AMX-CA) and cefotaxime, and AMX-CA and aztreonam, which suggested that this strain produced a extended-spectrum ${\beta}-lactamase$ (ESBL). Cenetic analysis revealed that the resistance was due to the presence of a 9.4-kb plasmic, designated as pkpl 61, encoding for new ${\beta}-lactamase$ gene (bla). Sequence analysis showed that a new bla gene of pkpl 61 differed from $bla_{TEM-1}$ by three mutations leading to the following amino acid substitutions: $Val_{84}{\rightarrow}lie,{\;}Ala_{184}{\rightarrow}Val,{\;}and{\;}Gly_{238}{\rightarrow}Ser$. These mutations have not been reported previously in the TIM type ${\beta}-lactamases$ produced by clinical strains. The novel ${\beta}-lactamase$ was overexpressed in E. coli and purified by ion exchange chromatography on Q-Sepharose and CM-Sepharose, and then further purified by gel filtration on Sehadex G-200. The catalytic activity of th8 purified ${\beta}-lactamase$ was confirmed by the nitrocefin disk.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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