The eglS gene in Bacillus amyloliquefaciens encodes an endo-β-1,4-glucanase that belongs to glycosyl hydrolase family 5. In this study, a disruption mutant of gene eglS was constructed to examine its role in bacterial adaptation in plants. The mutant TB2k, eglS gene inactivated bacterial strain, was remarkably impaired in extracellular cellulase activity. When inoculated on Brassica campestris, the TB2k population was reduced by more than 60% compared with the wild-type strain in the root, stem, and leaf tissues. Overexpression of eglS in the wild-type strain increased the bacteria population in the plant tissues. Further studies revealed that the transcription level of eglS was correlated with bacterial population. These data demonstrate that endo-β-1,4-glucanase of B. amyloliquefaciens is required for its optimal endophytic colonization.
The purpose of this study was to develop a rapid and effective method of laser-induced fluorescence analysis for thrace amounts of Sm, Eu and Tb in nuclear fuels. The features of the method are the use of the distinct fluorescence wavelengths and the discriminative lifetimes of the respective elements when excited by a pulsed nitrogen laser. Fluorescence signals of the three elements were isolated by adequate selection of the filters or complexing agents (HFA, TTA) or discriminative delay and gate times in the signal processing circuit. It was found that S $m^{+3}$ and E $u^{+3}$ emitted strong fluorescence in the two complexing agent solutions or HFA and TTA. But in the case or T $b^{+3}$, the fluorescence signal was detected only in HFA solution. With respect to the concentrations of S $m^{+3}$, E $u^{+3}$ and T $b^{+3}$, the fluorescence signal intensities gave superior linearities in the range of 5 ppb-10 ppm for S $m^{+3}$, 0.5 ppb-1 ppm for E $u^{+3}$, and 0.1 ppb-300 ppb for T $b^{+3}$, The detection limits obtained were 5 ppb for S $m^{+3}$, 0.1 ppb for E $u^{+3}$, and 0.01 ppb for T $b^{+3}$, respectively.
Mycobacterium tuberculosis (MTB) resides and replicates inside macrophages. In our previous report, we reported that CD8+ T cell-mediated immune responses specific for the peptide derived from MTB RNA polymerase beta-subunit ($RpoB_{127-135}$) could be induced in TB patients expressing HLA-$A^*0201$ subtype. In order to examine whether $RpoB_{127-135}$ specific CD8+ T cells can recognize MTB infected macrophages in vitro, CD8+ T cell lines specific for $RpoB_{127-135}$ peptide were generated from peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of healthy HLA-$A^*0201$ subjects by in vitro immunization technique. In this study, we observed $RpoB_{127-135}$ specific CD8+ T cells could recognize and destroy macrophages infected with MTB for 2 to 4 days. $RpoB_{127-135}$ specific CD8+ T cell immune response was inducible from PBMC of healthy subjects expressing HLA-$A^*0206$ subtype, one of HLA-A2 supertype members. Next, we investigated the HLA-I processing mechanism of $RpoB_{127-135}$ peptide in MTB infected macrophages. As a result, the presentation of the MTB derived epitope peptide, $RpoB_{127-135}$, to CD8+ T cells was not inhibited by the treatment with brefeldin-A (ER-Golgi transport inhibitor) or lactacystin (proteasome inhibitor), which blocks the classical HLA-I processing pathway. However, $RpoB_{127-135}$ specific CD8+ T cell activity was blocked either by the blocking agent for the endocytosis (cytochalasin D) or by the blocking antibody (W6/32) for HLA-I molecules. Therefore, the $RpoB_{127-135}$ peptide may be processed by accessing the alternate HLA-I processing pathway. Understanding the processing and presentation mechanisms of the MTB derived proteins will help to improve the efficacy of vaccines and the efficiency of therapeutic agents for TB.
Kim, Tae-Hwan;Kim, Da-A;Kim, Ki-Su;Seo, Mi-Ja;Youn, Young-Nam;Yu, Yong-Man
Korean journal of applied entomology
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v.48
no.4
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pp.509-517
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2009
Bacillus thuringiensis subsp. aizawai CAB109 isolated in Korea is known active against Spodoptera sp.. Especially, B. thuringiensis aizawai CAB109 isolates showed 100% mortality against Spodoptera litura and Spodoptera exigua. To screen highly active B. thuringiensis, the pathogenicity of B. thuringiensis CAB109 was compared with that of commercialized B. thuringiensis products. $LC_{50}$ values of CAB109, product TB-WP and product SC strains of B. thuringiensis were $1.3{\times}10^5$, $2.3{\times}10^6$ and $5.2{\times}10^5\;cfu/ml$ against the 2nd larva of S. litura and $1.8{\times}10^4$, $1.3{\times}10^6$ and $1.5{\times}10^6\;cfu/ml$ against the 2nd larva S. exigua, respectively. To determine new gene's existence and absence, the plasmid DNA was extracted, and compared to that of B.t. aizawai HD-133. Both B. thuringiensis were not like plasmid DNA pattern. PCR technique was used to predict both plasmid DNA's cry gene. PCR products analysis showed that B.t. CAB109 harbor Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1C and Cry1D and B.t. HD-133 has Cry1Aa and Cry1Ab, respectively.
The study compared the fatty acid profiles of 3 muscles (Longissimus dorsi, LD, Triceps brachii, TB and Semimembranosus, SM) obtained from Korean Hanwoo (18 steers, 24 months old) and Australian Angus beef (18 steers, 24 months old) and assessed their role in sensory perception. The samples of each carcass were prepared in the same manner, and cooked both as traditional grilled steaks and Korean BBQ style. A total of 720 Korean sensory panelists evaluated the beef samples for tenderness, juiciness, flavor, and overall liking. Oleic acid (18:1) was significantly (p<0.05) higher in TB than that in LD and SM. The essential linoleic acid (C18:2) was significantly (p<0.05) higher in TB and SM than that in LD. For LD muscle, the proportion of saturated fatty acids was significantly (p<0.05) highest, while that of polyunsaturated fatty acids was lowest among the three muscles. Australian Angus beef had significantly (p<0.05) higher n-3 PUFA than that of the Korean Hanwoo for the three muscles, while the latter contained significantly (p<0.05) higher n-6 PUFA than that of the former. The clustering analysis showed that there a was significant difference in fatty acids such as C16:0, C16:1n7, C18:0, C18:2n6, C18:3n3, C20:3n6, C20:4n6, C22:4n6, and C22:5n3 for sensory perception (tenderness, juiciness, flavor and overall likeness) of the beef from two origins (p<0.05) among three clusters. Especially, C14:0 had a significant effect on sensory perception only for Korean Hanwoo beef; while C20:5n3 had a significant (p<0.05) effect only for Australian Angus beef based on clustering with the sensory variables.
Hong, Uk Sun;Kwon, Hye Kyong;Cha, Geun Sig;Nam, Hakhyun;Chang, Seung Hyun;Chung, Kwang Bo
Journal of the Korean Chemical Society
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v.39
no.9
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pp.698-704
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1995
The ion-selective membrane fabricated with 33 wt% PVC, 66 wt% o-NPOE and 1 wt% 4'-benzothiazolylbenzo-15-crown-5 (TB15C5) as a neutral carrier exhibited an enhanced selectivity to potassium ion over sodium ion compared to those prepared with other 15-crown-5 or 18-crown-6 derivatives. The potentiometric properties (response slope, selectivity, detection limits and lifetime) of TB15C5-based ISE membranes along with those based on valinomycin, benzo-15-crown-5 (B15C5), 4'-aminobenzo-15-crouwn-5 (AB15C5), benzo-18-crown-6 (B18C6), dibenzo-18-crown-6 (DB18C6) and bis[(benzo-15-crown-5)-4'-ylmethyl]pimelate (PI-Ⅱ) ionophores were carefully examined under the same experimental conditions. The enhanced selectivity of TB15C5-based membrane to potassium is explained in terms of the effect of the benzothiazol functional group and the distribution coefficients of metal ions.
Background : Rifabutin (ansamycin) is a spiro-piperidyl rifamycin, which is highly active against Mycobacterium tuberculosis. It has been found that some clinical isolates of tubercle bacilli that are resistant to rifampicin are susceptible to rifabutin, with some patients with multi-drug resistant pulmonary tuberculosis having shown favorable clinical and bacteriological responses to the rifabutin. This study was conducted to find the proportion of rifabutin-susceptible strains among rifampicin-resistant isolates from Korean MDR-TB patients, and investigate the presence of specific rpoB mutations, which may confer resistance to rifampicin, but not to rifabutin. Methods : 201 rifampicin-resistant and 50 pan-susceptible M. tuberculosis isolates were randomly selected for this study. The isolates were retested at rifampicin and rifabutin concentrations of 0, 20, 40 and $80{\mu}g/ml$, respectively. The isolates that grew at and/or over a rifabutin concentration of $20{\mu}g/ml$ were judged rifabutin-resistant. The rpoB gene was extracted from the isolates, and then amplified for direct sequencing to investigate specific rpoB mutations that conferred rifabutin- susceptibility but rifampicin-resistance. Results : Out of the 201 rifampicin-resistant M. tuberculosis, 41 strains (20.4%) were susceptible to rifabutin using the absolute concentration method on Lowenstein-Jensen media. The rpoB mutation types that showed susceptibility to rifabutin were Leu511Pro, Ser512Arg, Gln513Glu, Asp516Ala, Asp516Gly, Asp516Val, Asp516Tyr, Ser522Leu, His526Asn, His526Leu, His526Cys, Arg529Pro and Leu533Pro. A reverse hybridization technique was able to detect 92.5% of the rifabutin-susceptible isolates, with a specificity of 96.1% among 195 M. tuberculosis isolates with the rpoB mutation. Conclusions : Around 20% of the rifampicin-resistant isolates in Korea showed susceptibility to rifabutin, which was associated with some specific mutations of rpoB. Rifabutin could be used for the treatment of MDR-TB patients, especially when drug susceptibility testing reveals susceptibility to rifabutin.
A bacterium KL-57 which exhibited biosurfactant activity was isolated. This bacterium was identified as Bacillus subtilis. The biosurfactant-producing gene of B. subtilis KL-57 was cloned into R subtilis MI113 by using plasmid pTB523. The plasmid DNA from the clone was found to carry a 18 kb PstI insert. The biosurfactant-producing gene was cleaved into 4 fragments by SmaI, 3 fragments by PvulI or EcoRl, 4 fragments by PvulI and EcoRI double digestion, 5 fragments by AccI, and 2 fragments by KpnI, HindIII or BamHI. By subcloning the 18 kb Pstl insert, a 2.3 kb EcoRl fragment conferred the biosurfactant producing activity on B. subtilis cells. The 2.3 kb had one HindIII cleave site. But Two fragments, which corresponds HindIII/EcoRl termini, exhibited no biosurfactant activity.
The composites were fabricated 61Vo.% ${\beta}$-SiC and 39Vol.% $TiB_2$ powders with the liquid forming additives of 12wt% $Al_{2}O_{3}+Y_{2}O_{3}$ as a sintering aid by pressure or pressureless annealing at $1650^{\circ}C$ for 4 hours. The present study investigated the influence of annealed sintering on the microstructure and mechanical of SiC-$TiB_2$ electroconductmive ceramic composites. Reactions between SiC and transition metal $TiB_2$ were not observed in the microstructure and the phase analysis of the SiC-$TiB_2$ electroconductive ceramic composites. Phase analysis of SiC-$TiB_2$ composites by XRD revealed mostly of ${\alpha}$-SiC(6H), $TiB_2$, and In Situ YAG($Al_{5}Y_{3}O_{12}$). The relative density, the flexural strength, the Young's modulus showed the highest value of 86.69[%], 136.43[MPa], 52.82[GPa] for pressure annealed SiC-$TiB_2$ ceramic composites.
Kim, Tae-Hyung;Shin, Myung-Jin;Shin, Ji-Hoon;Lim, Jin-Oh;Ryu, Ji-Yeon;Oh, Jae-Seon;Woo, Chul-Woong;Nam, Jeung-Hee
Journal of radiological science and technology
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v.33
no.1
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pp.25-29
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2010
To evaluate the usefulness of newly designed percutaneous bone biopsy needle for pumpkin's specimen collection. We manufactured three types of biopsy needle with different internal processing which were made of 10 mm-diameter acrylic material. We made the conventional type (Ct) similar to the clinical type then compared the test group. The type a (Ta) made 1 cm-length internal processing from the distal, type b (Tb) made taper, and type c (Tc) made internal processing like spiral configuration. We performed 20 times biopsy to get an 10 mm length specimen from pumpkin's surface and evaluated the success rate of the biopsy, length of the specimen, and determine internal processing type of the most suitable biopsy needle (ANOVA test). Success rates of Ct, Ta, Tb, and Tc were 55%, 80%, 90%, and 100%, respectively. The lengths of the specimen of Ct, Ta, Tb, and Tc were $5.6{\pm}1.1\;mm$, $5.9{\pm}0.87\;mm$, $3.9{\pm}0.77\;mm$, and $9.4{\pm}0.54\;mm$, respectively. All groups were statistically significant (p < 0.05) except the group between Ct and Ta (p = 0.28). Newly designed bone biopsy needle seems to be useful for obtaining enough specimen. Tc may be more effective than other types.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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