The nar promoter of Escherichia coli was known to induce maximally under anaerobic or microaerobic conditions in the presence of nitrate. In this study, the nar promoter was tested to see whether the expression level of a reporter gene which fused lacZ gene at nar promoter's downstream, in the some gram negative host strains(Agrobacterium, Pseudomonas and Rhizobium). A nar promoter system(Combination of nar promoter and gram negative strain) was grown under aerobic conditions to absorbance at 600 nm of nearly 2.0 and then, the nar promoter was induced by lowering DO to 1-2% with alternating microaerobic and aerobic condition in the fermentor cultures, using different gram negative hosts. For a wild type nar promoter (pNW61), it was possible to maintain production of ${\beta}-galactosidase$ activity per cell(specific ${\beta}-galactosidase$ activity) at 14,000, 9600, 45 Miller units in the presence of 1% nitrate. and for a nitrate - independent nar promoter (pNW618) at 12,000, 10,400 and 58 Miller units in the absence of nitrate ion, respectively.
The anaerobically expressed gene aeg-46.5, which had been identified by the operon fusion technique with a hybrid bacteriophage of ${\lambda}$ and Mu, ${\lambda}$placMu53, was studied for its expression pattern and growth. The expression of aeg-46.5 was studied in the wild-type cell and mutant cells that have mutation (s) in the control gene of anaerobic respiration (fnr) and nitrate response (narL and narP). The ${\beta}$-galactosidase reporter gene showed maximum expression in narL host after two hours of aerobic to anaerobic switch in M9-Glc-nitrate medium. Both 40 mM and 100 mM concentrations of nitrate ion in the medium had little effect on expression level. We propose that aeg-46.5 is subject to multiple regulations of anaerobic activation by Fnr, nitrate activation by NarP and repression mediated by NarL.
The gas-phase nucleophilic substitution reaction of pentafluoroanisole with $OH^-$ and ${NH_2}^-$ nucleophiles have been studied theoretically using the AM1 method. Three reaction channels, $S_N2$, IPSO and $S_NAr$ (scheme 1), are all very exothermic so that all are accessible despite the varying central energy barriers which are much lower than the reactants level. In the IPSO and $S_NAr$ channels, the reactants form directly a stable ,${\sigma}$-anion complex which proceeds to form a proton transfer complex via a transition barrier corresponding to a loose ${\pi}$-type complex with the F-(or ${OCH_3}^-$) leaving group. Due to a greater number of probable reaction sites available for $S_NAr$ compared to the other two processes, the $S_NAr$ channel is favored as experimentally observed.
The nar promoter of Escherichta coli, which is maximally induced under anaerobic conditions in the presence of nitrate, was characterized to see whether the nar promoter cloned onto pBR322 can be used as an expression promoter. The modified nar promoter, in which several bases in the -10 region was mutated to the consensus sequence by site-directed mutagenesis, was characterized in E. coli, on which chromosome the fnr gene affecting expression of the nar promoter according to dissolved oxygen level was mutated. The E. coli lacZ gene was used as a reporter gene. The following effects were investigated to find optimal conditions to induce the modified nar promoter: induction methods, optimal nitrate concentrations, the amount of ${\beta}$-galactosidase expressed at the different growth conditions, and induction characteristics. The following results were obtained from the experiments : expression of ${\beta}$-galactosidase from the modified nar promoter was not affected much by nitrate concentrations. The maximal specific ${\beta}$-galactosidase activity was obtained when E. coli was grown under aerobic conditions, and then the modified nar promoter was induced at OD600=2.2 under microaerobic conditions (DO=1∼2%), under which conditions the maximal specific ${\beta}$-galactosidase activity was 13,000 Miller units. However, the specific ${\beta}$-galactosidase activity was approximately 6,000 Miller units even before the modified nar promoter was induced. Therefore, the modified nar promoter seemed to be useful when the cloned gene wants to be expressed in E. coli constitutively.
We investigate the mechanism of $S_NAr$ fluorination reactions under the influence of protic solvents and ions. We find that counterion or protic solvent alone retards the $S_NAr$ reactions, but together they may promote the reaction. In this mechanism, the protic solvent acts on the counterion as a Lewis base, and the nucleophile reacts as an ion pair. We also show that an anion (mesylate) may exhibit catalytic effects, suggesting the role of ionic liquids for accelerating the $S_NAr$ reactions.
Objectives: In Korea, the percentage of elderly is increasing at an unprecedented rate, and is expected to account for 40% of the population by 2060. This massive demographic change stresses the importance of research on aging as it is necessary to improve the quality of life (QoL) of this population. This study aimed to examine the health-related quality of life (HRQoL) of the rural elderly and to clarify its association with the nutrient adequacy ratio (NAR). Methods: A cross-sectional study was performed in S-gun, Chonbuk, a critical agricultural area. The elderly people without abnormal physical functioning composed our study population and the data were collected by personal visits to 336 elderly people aged over 65 years (110 males and 226 females). Subjects were interviewed with questionnaires pertaining to general characteristics and EuroQol (EQ-5D). Nutrient intakes were assessed two days by 24-hours recall method. Subjects were defined as high QOL group if EQ-5D index with Nam's model was above the median. Results: Generally, EQ-5D index was lower in women than in man, and lower in older subjects than in younger subjects. The percentages of people below the median were 42% (low QoL group) and 58% (high QoL group) were found to be the above the median. The high QoL group had higher NAR, especially for vitamin C, vitamin B1, vitamin B2 and folate. All dimensions in the EQ-5D were affected by NAR of some nutrients and especially anxiety/depression dimension was significantly correlated with NAR of 5 nutrients (protein, calcium, iron, vitamin C and vitamin B1) and EQ-5D scores. Conclusions: HRQol was significantly reduced in elderly with increasing age and this was more pronounced in women than in man. The NAR of some nutrients were associated with the EQ-5D index, especially anxiety/depression dimension, among rural elderly.
In this paper, we propose an efficient seamless handoff scheme to minimize packet loss and unnecessary packets on the Internet using the peculiar mobility characteristics of public vehicles such as trains. MR (Mobile Router) in a train visits each AR (Access Router) in the fixed order. As the MR detects reachability to the NAR (Next Access Router) on the new link, the PAR (Previous Access Router) can directly deliver packets from MR's HA (Home Agent) to the NAR according to the HML (Handoff Mobile router List). Then. the NAR buffers them until the MR finishes L3 (Layer 3) handoff procedure with the NAR. Therefore, our scheme can support a seamless handoff without the packet loss and unnecessary packets on the Internet. The result of our performance evaluation has shown that the proposed scheme could provide excellent performance, compared with the NEMO basic support protocol and the Bi-casting protocol.
In this work, we analyzed the activity of control enzymes of flower color biosynthesis, chalcone synthase (CHS) and flavanone 3-hydroxylase (FHT) using biochemical and enzymological methods in Lilium longiflorum and 11 Lilium cultivars. The results obtained are as follows ; Naringenin (NAR) was synthesized in all Lilium cultivars tested by the catalytic activity of CHS which used malonyl-CoA and 4-coumaryol-CoA as substrates. Substrate-specific activity of CHS was observed because eridictiol (ERI), which uses caffeoyl-CoA as a substrate, was not detected in tested cultivars. In next step, dihydroflavone product was synthesized by FHT using flavanones as a substrate. FHT synthesized dihydrokaempferol (DHK) by using NAR as substrates. A remarkable activity of FHT was observed in other 11 cultivars.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.30
no.5
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pp.986-992
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2001
To assess the food intake and diet quality of middle school students who live in Kangneung area, a dietary survey using 3-day food record was conducted with 226 subjects. Seventy five percent of total food intake was in the form of plant foods and the rest in the form of animal food. Diet qualify was assessed by food group pattern, dietary diversity score (DDS), and dietary variety score (DVS). When counting the major food groups consumed, 53% of subjects had a DDS of 3 and 35% of subjects had a DDS of 4. When investigating the consumption pattern of the major five food groups, only 10.2% of subjects consumed foods from all five groups. The groups most frequently missed were dairy products (73.0%) and fruits (71.7%). On average, subjects habitually consumed 22.6 different foods daily, with the mean score of diet variety for males (22.1) being significantly lower than for females (22.9). Correlation coefficients between nutrient adequacy ratio (NAR) and DVS ranged from r=0.40 for vitamin B$_1$to r=0.61 for phosphorus. NAR also improved as the number of foods or food groups consumed increased (p<0.001). Associations between the NAR and high level of DVS was more positive than those between the NAR with DDS. When assessing the dietary quality of subjects using DDS and DVS, many people appeared not to have a desirable food intake. Therefore, to lead them to have nutritionally balanced diet, educating students and their parents on nutrients and suggesting guidelines for a desirable diet is considered to be essential so that they can intake from all of major food groups and have various foods in their diet.
The growth and the resistance of Amorpha fructicosa L. under water control was experimented in frames out of doors. The plant grew in a wagner's pot under water control. The soil moisture content was controlled at 5%, 10%, 15% and 20%. The growth of leaf, stem and root in the groups of 5% and 10% soil moisture content were different from values in the groups of 15% and 20%. The T/R ratio in the groups of 5% and 10% soil moisture content were different from the ratio in the groups of 15% and 20% soil moisture content. The T/R ratio of former was lower than the latter, but the C/F ratio of the former was higher than the latter. RGR and NAR of Amorpha fructicosa decreased in 5% and 10% soil moisture content but increased in 15% and 20% soil moisture content during growing period. The maximum values of RGR and NAR were respectively 0.089 and 0.080 at 20% soil moisture content. The highest value of LAR was 1.560 at 5% soil moisture content. RGR and NAR were comparatively affected by soil moisture content.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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