Kim, Tae-Gyun;Heo, Seong-Dal;Ku, Ja-Kang;Ban, Chang-Ill
BMB Reports
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제42권1호
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pp.53-58
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2009
The methyl-directed mismatch repair (MMR) mechanism has been extensively studied in vitro and in vivo, but one of the difficulties in determining the biological relationships between the MMR-related proteins is the tendency of MutL to self-aggregate. The properties of a stable MutL homologue were investigated using a thermostable MutL (TmL) from Thermotoga maritima MSB8 and whose size exclusion chromatographic and crosslinking analyses were compatible with a dimeric form of TmL. TmL underwent conformational changes in the presence of nucleotides and single-stranded DNA (ssDNA) with ATP binding not requiring ssDNA binding activity of TmL, while ADPnP-stimulated TmL showed a high ssDNA binding affinity. Finally, TmL interacted with the T. maritima MutS (TmS), increasing the affinity of TmS to mismatched DNA base pairs and suggesting that the role of TmL in the formation of a mismatched DNA-TmS complex may be a pivotal observation for the study of the initial MMR system.
S. uvarum KFCC 32021의 발효여액은 10% 농도에서 L. acidophilus KFCC 12731의 산생성 및 생육을 촉진하였으나 촉진작용은 10$0^{\circ}C$에서 10분간의 열처리에 의해 실활되었다. 또한 이 여액은 두유의 sucrose, raffinose 및 stachyose 등의 과당류를 분해하여 단당류의 함량을 증가시켰다. L. acidophilus KFCC 12731의 24시간 단독배양에서 두유의 단당류는 전량 소비되었으나 과당류는 거의 선량 잔존하였다. S. uvarum KFCC 32021의 단독배양에서는 단당류, sucrose 및 vaffinose는 완전 소비되었고, stachyose는 일부 잔존되고 manninotriose가 축적되었다. 혼합발효에서의 당소비유형은 S. uvarum의 단독배양에서와 유사하였다. 이상의 결과로 혼합배양에서 S. uvarum KFCC 32021은 두유의 과당류를 L. acidophilus KFCC 12731이 이용할 수 있는 단당류로 분해시켜 줌으로써 발효액의 산생성을 촉진시키는 것으로 보인다.
In this study, In order to compare the behavior of axail load transfer for S.L. coated piles and uncoated piles installed at a field test site. During static pile load tests, axial load transfer for S.L. coated piles and uncoated piles were measured.
고상 반응법을 이용하여 L $a_{0.6}$S $r_{0.4}$$Co_{0.2}$F $e_{0.8}$$O_{3-}$$\delta$/ 및 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ 분말을 합성하고 혼합전도체 분리막을 소결하여 제조하였다. 제조된 분리막들은 정확한 페롭스카이트 결정구조를 나타내었으며, 95% 이상의 높은 상대밀도를 나타내었다. 산소이온 변환 능력을 향상시키기 위해 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ disk의 양 표면에 L $a_{0.6}$S $r_{0.4}$Co $O_{3-}$$\delta$/ paste를 스크린 프린팅 방법으로 코팅하였으며 코팅 막은 비교적 치밀한 미세구조를 나타내었다. 코팅되지 않은 L $a_{0.6}$S $r_{0.4}$$Co_{0.2}$F $e_{0.8}$$O_{3-}$$\delta$/ 및 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ 분리막과 코팅된 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ 분리막의 산소투과 성능을 비교 실험한 결과, 90$0^{\circ}C$에서 L $a_{0.6}$S $r_{0.4}$$Co_{0.2}$F $e_{0.8}$$O_{3-}$$\delta$/ 분리막이 정상상태에서 0.266 mL/min.$\textrm{cm}^2$로 가장 많은 투과량을 보였으며 코팅된 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ 분리막의 정상상태 산소 투과 유속은 최고 0.19 mL/min.$\textrm{cm}^2$ 정도로 코팅되지 않은 분리막에 비해 약 2~3배로 높게 나타났다.정도로 코팅되지 않은 분리막에 비해 약 2~3배로 높게 나타났다.코팅되지 않은 분리막에 비해 약 2~3배로 높게 나타났다. 높게 나타났다.
잔디의 형질전환체계를 확립하기에 앞서 효율적인 재분화 체제를 확립하고자 식물생장 조절제, 탄소원 및 $AgNO_3$가 재분화에 미치는 영향을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 배지(MS와 N6) 및 식물생장조절제(2,4-D와 NAA)에 따른 Korean lawngrass(Zoysia japonica Steud.)와 penncross creeping bentgrass(Agrostis palustris Huds.)의 캘러스유기는 두 품종 모두 N6배지에서 보다 MS배지에서 좋았으며, Korean lawngrass는 2,4-D 1mg/L 첨가 MS배지에서 그리고 penncross creeping bentgrass는 2,4-D 2mg/L첨가 MS배지에서 가장 좋았다. 2. 캘러스증식은 두 품종 모두 2,4-D 2mg/L함유 MS배지에 NAA 0.2mg/L 첨가하였을때 가장 좋았고, kinetin을 Korean lawngrass의 경우 0.2mg/L, penncross creeping bentgrass의 경우 0.3mg/L을 첨가하였을 때 가장 좋았다. 3. 식물체 재분화 실험에서 Korean lawngrass 잎 절편체의 재분화율은 MS배지에서 2,4-D 2mg/L+NAA 0.2mg/L+kinetin 0.1mg/L 조합처리시 44% 그리고 stock callus의 재분화율은 2,4-D 2mg/L+NAA 0.2mg/L+kinetin 0.3mg/L 조합처리시 32%이었다. penncross creeping bentgrass의 잎 절편체와 stock callus의 재분화율은 kinetin 0.3mg/L 농도에서 각각 80% 외 67%이었다. 4. Korean lawngrass의 경우 전술한 재분화 배지에 $AgNO_3$ 1mg/L를 첨가하였을 때 3~4%그리고 pencross creeping bentgrass의 경우 2mg/L를 첨가하였을 때 10~16%의 재분화율이 향상되었다.
젖산균의 유전자 연구를 촉진하기 위해 간단하고 신속한 plasmid DNA의 분리방법과 electro-poration을 이용하여 vector plasmid의 간단하고 신속한 전이방법을 얻기 위해 젖산균의 형질전환에 영향하는 요인에 대하여 연구하였으며 연구결과는 다음과 같다. 1. O'Sullivan과 Klaenhammer의 방법을 개선하여 젖산균 plasmid DNA의 분리에 좋은 결과를 얻을 수 있는 신속하고 쉬운 방법을 고안하였으며, genomic DNA 분리에 이용되는 guanidium thio-cyanate 처리방법을 plasmid의 분리에 적용할 수 있었다. 2. L. casei, L. acidophilus. L. delbruekii var. bulgaricus. L. brevis와 L. plantarum 균주에서 plasmid를 확인하였으며, 돼지 분에서 분리된 L. lactis ssp. lactis. L. fermentum과 L. plantarum에서도 plasmid를 분리 확인하였다. 3. Lactococci의 plasmid분리는 lactobacilli와는 달리 mutanolysin의 처리없이도 잘 되었으며, L. lactis ssp. lactis와 Ent. faecalis에서 plasmid를 확인하였다. 4. E. coli plasimd 분리에 이용되는 MPS membrane filter 방법으로 젖산균 plasmid pLZ12의 분리가 가능하였으나, 세포파편이 filter를 막아 사용에 어려움이 있는 것으로 확인되었다. 5. Plasmid 분리없이 electroporation을 이용한 세포 대 세포 전이법으로 간편하고 빠르게 E. coli DH5${\alpha}$에 E. coli Jm109의 plasmid pBX19, pBR322를 전이시켰다. 6. L. lactis ssp. lactis 균주에 lysozyme 처리시 30${\sim}$80%의 생존율을 보였으며, 대부분의 L. acidophilus 균주의 경우 약 70%의 생존율을 보였다. L. casei 102S의 경우는 45분간 처리 시에도 100%의 생존율을 보였다. 8. L. lactis ssp. lactis 균주에 pLZ12를 6.0kV에서 전이시킨 결과 12.5kV에서보다 형질전환 효율이 훨씬 높았으며 lysozyme 처리에 의해 형질전환 효율이 증가되었다. 9. L. acidophilus 균주에 pLZ12를 전이시 6.0kV에서는 전이가 모두 이루어졌으나, 12.5kV에서는 L. acidophilus WIESBY와 NCFM에서 전이가 이루어지지 않았으며, lysozyme 처리 후 pLZ12를 전이시켰을 때 12kV보다 6.0kV에서 형질전환 효율이 증가되었다. 10. Gene Pulser와 Progenitor II를 사용하여 pLZ12를 L. lactis ssp. lactis 균주에 전이하였을 때 Gene Pulser에 비해 Progenitor II의 형질전환 효율이 현저히 떨어졌다. L. acidophilus HY7008과 HY7001은 두 기기 모두 형질전환이 이루어졌으나, L. acidophilus WEISBY와 NCFM은 Progeni-tor II에서 전이가 일어나지 않았으며, Gene Pulser에서 전이균주를 얻어 두 electroporator간에 형질전환 효율의 차이를 보였다. 11. L. casei 102S에 pLZ12를 electroporation시 낮은 전압에서 형질전환 효율이 비교적 좋았으며, 배양 시기를 달리하여 전이시켰을 때 대수생장 말기의 세포가 형질전환 효율이 좋았다. 12. L. casei 102S세포를 각각 10% glycerol, EB, 2차 증류수 등에 녹여 electroporation을 실시하였을 때 각각 $3.8{\times}10^3$, $5.0{\times}10^2$,1.5${\times}10^2$cfu의 형질전환 효율을 보였으며, 1.0mM HEPES, TE buffer를 사용하였을 때에는 전이가 이루어지지 않았다. 13. Plasmid pLZ12의 농도를 달리하여 electroporation을 하였을 때 형질전환 효율이 농도에 비례하여 증가하였다. 14. L. casei 102S에 대수생장 말기의 세포를 채취하여 10% glycerol, 200 Ohms, 25 ${\mu}$FD, 10kV/cm로 plasmid pLZ12를 electroporation할 때 최대 형질전환 효율인 3.8${\times}$10$^{3}$cfu를 얻었으며, lysozyme 처리가 다른 젖산균과는 달리 형질전환 효율을 증가시키지 못하였다. 15. L. casei 102S 세포를 10% glycerol과 EB에 녹여 -20$^{\circ}C$에서 냉동시킨 다음 1일과 7일 후의 세포를 electroporation한 결과 냉동시 세포에 손상을 주는 것으로 인식되었다.
We compared the effects of supplementing $L-lysine{\cdot}SO_4$ to L-lysine HCl on growth performance, nutrient digestibility and nitrogen retention in weaning pigs. A total of 96 crossbred pigs, weaned at $21{\pm}3$ days of age and with an average initial body weight (BW) $6.23{\pm}0.01kg$, were given one of 4 treatments, which translated into 6 replicates of 4 pigs in each pen. The animals were randomly assigned to four dietary treatments according to a randomized completely block design (RCBD) as follows: 1) control-no synthetic lysine, lysine deficient (0.80% total lysine); 2) L-C (= 0.2% L-lysine HCl); 3) K-L-S (= 0.332% $L-lysine{\cdot}SO_4$, A company); 4) C-L-S (= 0.332% $L-lysine{\cdot}SO_4$, B company). Diets were formulated with corn, soy bean meal, and corn gluten meal as the major ingredients, and all nutrients except the lysine met or exceeded NRC requirements (1998). The lysine content of supplemented synthetic lysine was the same in all treatment groups except the control. No clinical health problems associated with the dietary treatments were observed. During the entire experimental period, body weight, average daily gain (ADG) and feed efficiency (G:F ratio) increased (p<0.01) in pigs fed the experimental diets supplemented with L-lysine??HCl or $L-lysine{\cdot}SO_4$ produced by A company, irrespective of the two synthetic lysine sources. Although the supplementation of $L-lysine{\cdot}SO_4$ produced by B company tended to improve the ADG and G:F ratio, significant differences were not seen among all treatments and tended to be lower than the L-C (L-lysine HCl) and K-L-S ($L-lysine{\cdot}SO_4$ groups using the product from A company). The digestibility of crude protein (CP) was increased by the supplementation of synthetic lysine (p<0.05), irrespective of the L-lysine source (L-C, K-L-S, C-L-S). The results of this study showed that ADG, G:F ratio, and CP digestibility improved when $L-lysine{\cdot}SO_4$ or L-lysine HCl was supplemented into the weaning pigs' diet. There was a clear difference in efficacy between the two $lysine{\cdot}SO_4$ products based upon the growth performance of weaning pigs. Consequently, the bioavailability of $lysine{\cdot}SO_4$ products should be evaluated before supplementation of synthetic lysine in swine diets.
The addition of L-cysteine without blocking amino and carboxyl groups to${\beta},{\beta}$-dinitrostyrene derivatives(11a-e) were investigated. ${\beta},{\beta}$ -Dinitrostyrene derivatives(11a-e) easily undergo addition reactions with L-cysteine to from s-(2,2-dinitro-1-phenylethyl)-L-cysteine(12a), s-[2,2-dinitro-1-(p-methyl)phenylethyl]-L-cysteine (12b), s-[2,2-dinitro-1-(p-methoxy)phenylethyl]-L-cystein e(12c), s-[2,2-dinitro-1-(p-chloro)phenylethyl]-L-cysteine (12d) and s-[2,2-dinitro-1-(p-nitro)phenylethyl]-L-cysteine( 12a), respectively. The structure of adducts were confirmed by means of spectral data, molecular weight measurement and elemental analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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