유기게르마늄 화합물인 Ge-132의 분석법을 확립하였다. 이온교환수지 컬럼을 사용하고 $Na_2B_4O_7$ buffer를 이동상으로 하여 Ge-132를 분리한 다음, 전기전도도 검출기를 사용하여 검출하는 방법을 이용한 결과 50pmol의 농도까지 분석할 수 있었다. 이 방법은 Ge-132의 원료와 제품의 품질 관리에 응용이 가능하였다.
Bromobenzene투여시 GE-132의 해독기전을 추구할 목적으로 epoxide생성계와 해독계 효소 및 glutathione 관련 효소계의 활성에 GE-132가 어떤 영향을 주는가를 검토하여 다음과 같은 실험 결과를 얻었다. GE-132(100mg/kg)의 전처리로 cytochrome P-450, amino=pyrine demethylase 및 aniline hydroxylase와 해독계 효소인 epoxide hydrolase활성에는 영향을 미치지 않았으나, glutathions S-transferase활성은 증가 하였다. Bromobenzene(460mg/kg)을 주사하였을때 glutathione S-transferase의 활성이 현저히 감소되던 것이 GE-132의 투여로 대조군 수준으로 증가되었다. 조직내 glutathione의 함량변동도 bromobenzene 투여로 감소되던 것이 GE-132의 전처리로 bromobenzene단독 투여군보다 증가되었으며 ${\gamma}-glutamylcystein$ synthtase의 활성은 각 실험군에서 별다른 영향이 없는데 비해 glutathione reductase의 활성은 bromobenzene투여로 억제 되던 것이 GE-132의 전처리로 대조군 수준으로 활성을 유지하고 있었다.
The study was initiated elucidate the mechanism by examining the effect of GE-132 on hepatic glutathione S-transferase (GST) activity. Activity of GST increased with dose-dependent manner in hepatic cytosolic fraction of GE-132 treatment rats. Double reciprocal plotting gave Vmax value 1.4 fold increase by the treatment of GE-132(100mg/kg, p.o.for 6 weeks) compared with control group, but did not change Km value. Ethacryinc acid (85mg/kg, once a day, i.p) was injected to control rat, the GST activity decreased remarkably . However, GE-132 pretreated group, the effect caused by ethacrynic acid was markedly reduced. And activity of ${\gamma}$-glutamylcys- teine synthetase was not changed either by GE-132 treatment , but the activity of glutathione reudctase increased significantly. Decreasing properties of ethacrynic acid decreased level of hepatic glutathione , which was restored to same degree by GE -132 pretreatment . GE-132 protective effect on ethacrynic acid-induced mortality. It is concluded that the efect of GE-132 is partly mediated by increase in hepatic GST activity.
The acute oral toxicity of organogermanium, Ge-132 was evaluated in rats andmice. The changes of body weight and clinical signs were observed for 14 days after the oral administration of Ge-132, from 0.31 g/kg up to 5 g/kg for SD rats and from 1.25 g/kg up to 5 g/kg for ICR mice. No death and toxic effects were observed for 14 days. The body weight of rats was significantly decreased 1 day after the administration in the maximum dosing group, but the decrease of body weight returned to control level 3 days after dosing. No significant changes in 132. Therefore, Ge-132 has no special toxic effects up to 5 g/kg, and LD* values of Ge-132 Ge-132 are above 5 g/kg in rats and mice.
Carboxyethylgermanium sesquioxide(Ge-132)를 투여용량(300,600, 900mg/kg)과 투여일을 변화시켜 정상마우스와 cyclophosphamide(CY)로 처리한 마우스에 경구투여한 후, Ge-132가 CY 에 의해 변화된 마우스의 면역기능에 미치는 효과를 실험하였다. SRBC 항원 주사전, 동시 또는 후에 Ge-132를 투여시 SRBC에 대한 적혈구 응집소가와 비장세포의 용혈반 형성세포(PFC)수가 항원 주사일과 관계없이 용량의존적으로 증가되어 체액성 면역반응을 강화시켰으며, 마크로파지의 탐식능도 항진시켰다. 그러나 DNFB에 대한 접촉성 지연형 과민반응은 DNFB 감작일과 투여용량에 관계없이 Ge-132투여로 억제되었다. CY를 투여한 마우스에 Ge-132를 병용 투여한 군이 CY 단독 투여군에 비하여 적혈구 응집소가와 PFC수 및 혈중 탄소입자의 제거율이 현저하게 증가되어, CY로 억제된 체액성 면역반응과 마크로파지의 탐식능이 항진된 것으로 나타났다. DNFB 감작 전 CY 투여로 증폭된 접촉성 지연형 과민반응이 Ge-132 병용투여로 감소되어 CY로 유도된 면역독성 반응에 대한 Ge-132의 저지효과를 시사해 주었다.
방사선피폭 후 급성조혈계 손상에 대한 Melatonin과 Ge-132의 방어효과를 8 Gy의 선량으로 급성, 전신피폭 된 마우스에서 연구하였다. Melatonin은 피폭 1시간 전에 200 mg/kg의 용량으로 복강 내 주사하였고, Ge-132는 130 - 150 mg/kg/d의 용량으로 피폭 후 5일째부터 20일째까지 경구복용 시켰다. 방사선방어 효과를 평가하기 위해 비장에서 TUNEL assay를 실시하였고 혈액 내 림프구와 총 백혈구 수치를 측정하였다. 피폭 후 30일째까지의 생존분석을 위해 4 실험군들 (피폭단독군, melatonin 전처치군, Ge-132 후처치군, melatonin 전처치 및 Ge-132 후처치군)에서 날짜경과에 따른 사망을 측정하였다. 피폭단독군과 melatonin 전처치군 간에 세포고사지수 (47.8% vs 45.9%, p=0.385)와 림프구 수치 ($97/{\mu}{\ell}\;vs\;101/{\mu}{\ell}$, p=0.898)에서 차이가 없었으나, 총 백혈구 수치는 melatonin 전처치군에서 유의하게 높은 수치 ($147/{\mu}{\ell}\;vs\;306/{\mu}{\ell}$, p=0.010)를 보였다. 피폭 후 30일째의 생존율은 피폭단독군, melatonin 전처치군, Ge-132 후처치군, 그리고 melatonin 전처치 및 Ge-132 후처치군에서 각각 21.4%, 100%, 35.7%, 그리고 85.7%였다. 실험군들 간의 생존분석에서 melatonin 전처치 군은 피폭단독군(p=0.000)이나 Ge-132 후처치군(p=0.0003)에 유의하게 높은 생존을 보였다. 본 연구결과는 방사선피폭 후 급성조혈계증후군에 대하여 melatonin이 방사선방어제로서 효능을 지님을 보여주고 있다.
This study was initiated to investigate the effective action and mechanism of GE-132 (Carboxyethylgermanium sesquioxide)on benzo(a)pyrene, which have strong carcinogenicity and mutagenicity. To confirm desmutagenic effect (inhibition of metabolic processes of benzo(a)pyrene with S9 Mix or inactivation of the mutagenicity of benzo(a)pyrene metabolites) and antimutagenic effect (inhibition of gene-expression of reverted genes) of GE-132 against benzo(a)pyrene using with Salmonella typhimuyium TA98 Ames test was performed. The revertants in desmutagenicity test were decreased significantly in the combined groups of benzo(a)pyrene and GE-132 than benzo(a)pyrene only, without inhibition the metabolism of benzo(a)pyrene by S9 Mix. The ideal combined groups of benzo(a)pyrene and GE-132 were 10 $\mu{M}$ and 10mg, 20 $\mu{M}$ and 20mg, 100 $\mu{M}$ and 30 mg, respectively. Then, the revertants in antimutagenicity test, which was studied the direct action of GE-132 on the induction of revertant cells by Salmonella typhimurium TA98 and activated benzo(a)pyrene were decreased significantly in the treated groups of GE-132 than no treated groups. The number of revertants of Salmonella typhimurium TA98 were reduced with increasing amounts of GE-132. From the above results, it was found that GE-132 inactivated the mutagenic metabolites of benzo(a)pyrene without inhibition of the enzyme action in the S9 Mix, and GE132 showed antimutagenic effect which have inhibitory action of reverted gene expression.
유기게르마늄(Ge-132, carboxyethylgermanium)에 의한 22가지 젖산균의 성장 효과를 0.01~10mg/m1의 농도로 첨가된 GPYS 액체배지에서 조사하였다. 시험한 대부분의 젖산균은 고농도의 게르마늄에서도 내성이 있었고, 게르마늄의 농도가 높을수록 성장을 더욱 촉진시키는 효과가 나타났다. 게르마늄이 10mg/m1의 농도로 첨가된 GPYS배지에서 Lactococcus factis, Lc. cremoris, Lc. diacetilactis, Enterococus faecium 및 Streptococcus faecalis는 2배 이상 생육촉진의 효과를 나타내었으나, Leuconostoc mesenteroides와 Pediococcus pentosareus는 저해를 나타내었다. Lc. lactic와 Lc. cremoris의 경우, 배양액의 점도는 게르마늄이 첨가된 GPYS배지에서 급격히 증가되었지만, 장시간 배양에 의해서는 약간 감소되었다. 그러나 Lc. diacetilactis, E. faecium와 S. faecalis의 경우, 게르마늄의 첨가에 의하여 생육은 현저하게 촉진되었지만, 배양중의 점도는 증가되지 않았다.
To investigate the effects of carboxyethylgermanium sesquioxide (Ge-132) on the cyclophosphamide (CY)-induced immunotoxicity, hemagglutinin titer (HA-titer), splenic IgM plaque forming cells (PFC) and contact-delayed type hypersensitivity (CDTH) were assessed in mice. Ge-132 was orally administered alone (single dose of 300, 600, 900 mg/kg b.w.) or with CY (10 or 50 mg/kg, i.p.) to mice on the 2nd day before, simultaneously with, the 2nd day after immunization. Within Ge-132 alone-treated groups, HA-titer and PFC to SRBC were significantly and dose-dependently enhanced when compared with control group. HA-titer and PFC numbers suppressed by the treatment of CY alone were significantly restored by the concomitant treatment of CY and Ge-132. Also, Ge-132 significantly decreased DNFB-induced CDTH and inhibited the CY-enhanced CDTH. These results indicate that Ge-132 may be able to increase humoral immunity and inhibit the immunotoxicity by CY.
게르마늄 종류별 양액재배시 갓의 생육특성 및 게르마늄 흡수 특성을 조사하기 위해 갓 재배시 무기게르마늄 ($GeO_2$)과 유기게르마늄 (Ge-132)을 농도별로 각각 처리하여 게르마늄 독성발생 범위, 생장반응, 갓 부위별 게르마늄 함량 그리고 갓의 게르마늄 흡수량 및 흡수율을 조사하였다. 무기 및 유기게르마늄 모두 $10mg\;L^{-1}$까지는 생육저해 현상이 거의 없었으나, Ge $25mg\;L^{-1}$ 이상부터는 심한 생육저해 현상을 보여 Ge 75 및 $100mg\;L^{-1}$에서는 새싹 생성이 거의 되지 않을 정도로 저해현상이 나타났다. 대조구와 비교 하였을 때, 무기게르마늄은 Ge $5mg\;L^{-1}$ 처리까지, 유기게르마늄은 Ge $10mg\;L^{-1}$ 처리까지 지상부 및 지하부 생장반응이 대조구에 비하여 약간 증가되는 경향이었다. 게르마늄의 흡수량을 살펴보면 무기게르마늄의 경우 총 흡수된 게르마늄 중 지상부인 잎에 약 70%, 지하부인 뿌리에 약 30%가 분포되어 있었다. 유기게르마늄의 경우에는 무기게르마늄과는 반대로 잎에 약 23%, 뿌리에 약 77%로 뿌리에 훨씬 많이 분포되어 있었다. 초기 용액 내 투여된 게르마늄에 대한 식물체내 흡수율을 부위별로 살펴보면, 무기게르마늄의 경우 지상부에서 2.4~4.3% 범위로 평균 약 3.0%이고, 지하부에서 0.2~0.7%범위로 평균 약 0.4%이었다. 유기게르마늄의 경우에는 지상부에서 1.2~2.1% 범위로 평균 약 1.7%, 지하부에서는 0.5~0.9% 범위로 평균 약 0.8%이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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