Free amino acids and polysaccharide content of submerged mycelial culture of Fomitopsis pinicola using $2\%$ citrus peel water extracts(CP), $2\%$ green tea water extracts(GT) and yeast-malt broth(YM) were investigated. Cultivations were conducted at $30^{\circ}C$ and 150 rpm for 10 days. Yields of the mycelium as fresh weight basis in GT-, CP- and YM-broth were $42.3\%,\;34.2\%\;and\;9.89\%$, and their turbidity(OD at 660 nm) of the broth without mycelium were 0.14, 0.16 and 0.22, respectively. Total free amino acid content in the mycelium were 928.19 $mg\%$ in YM, 1060.53 $mg\%$ in CP, 764.83 $mg\%$ in GT, and the major free amino acid was lysine in YM, glutamic acid in CP and GT. Total free exo-amino acid contents were 659.75 $mg\%$ in YM, 954.55 $mg\%$ in CP, 838.69 $mg\%$ in GT, and the major in the all broths was glutamic acid Total amino acid derivatives content of the mycelium were in order of CP>GT>YM, and the major was cystathionine in YM, hydroxy proline in CP and GT. The major among exo-amino derivatives was hydroxy proline in the all broth. Exo-AIS content was in order of CP>GT>YM. Acid soluble polysaccharide content of the mycelium was GT($0.69\%$)>YM($0.39\%$)>CP($0.18\%$). The exo-polysaccharide content was in order of GT($0.87\%$)>CP($0.69\%$)>YM($0.09\%$). Alkali soluble polysaccharide content of the mycelium was in order of CP($5.21\%$)>GT($5.18\%$)>YM($4.56\%$), and exo-polysaccharide was in order of GT($6.79\%$)>YM($3.57\%$)>CP($3.01\%$). The alkali soluble polysaccharide eluted from mycelium cultivated in CP broth was supposed to polysaccharide(about 500,000 daltons) composed of hexose and uronic acid bounded with protein(below 10,000 daltons).
Park, So Young;Lee, Hyun Uk;Kim, Gun Hwa;Park, Edmond Changkyun;Han, Seung Hyun;Lee, Jeong Gyu;Kim, Dong Lak;Lee, Jouhahn
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2014.02a
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pp.411.1-411.1
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2014
This study evaluates the utility of an antibacterial microneedle composed of green tea extract (GT) and hyaluronic acid (HA), for the efficient delivery of GT. These microneedles have the potential to be a patient-friendly method for the conventional sustained release of drugs. In this study, a fabrication method using a mold-based technique to produce GT/HA microneedles with a maximum area of ${\sim}60mm^2$ with antibacterial properties was used to manufacture transdermal drug delivery systems. Fourier transform infrared (FTIR) spectrometry was carried out to observe the potential modifications in the microneedles, when incorporated with GT. The degradation rate of GT in GT/HA microneedles was controlled simply by adjusting the HA composition. The effects of different ratios of GT in the HA microneedles were determined by measuring the release properties. In HA microneedles loaded with 70% GT (GT70), a continuous higher release rate were sustained for 72 h. The in vitro cytotoxicity assays demonstrated that GT/HA microneedles are not generally cytotoxic to chinese hamster ovary cells (CHO-K1), human embryonic kidney cells (293T), and mouse muscle cells (C2C12), which were treated for 12 and 24 h. Antimicrobial activity of the GT/HA microneedles was demonstrated by ~95% growth reduction of gram negative [Escherichia coli (E. coli), Pseudomonas putida (P. putida) and Salmonella typhimurium (S. typhimurium)] and gram positive bacteria [Staphylococcus aureus (S. Aureus) and Bacillus subtilis (B. subtilis)], with GT70. Furthermore, GT/HA microneedles reduced bacterial growth in the infected skin wound sites and improved skin wound healing process in rat model.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2013.08a
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pp.229.1-229.1
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2013
초격자는 동종의 III-V 삼원 합금층을 성장하는 동안 스피노달 분해(spinodal decomposition)로 인한 원자배열(atomic ordering)과 상분리phase separation)에 의해서 발생하는데 MBE (molecular beam epitaxy)과 MOVPE (metalorganic vapor phase epitaxy)를 이용하여 성장시킬 때 주로 발생한다. 본 논문에서는 성장온도에 따른 InP/GaP SPS (short-period superlattices) 구조의 광학적 특성 변화를 시료의 온도와 여기광의 세기를 이용하여 분석하였다. 시료는 MBE 장비를 이용하여 성장하였으며, SPS층은 659쌍의 GaP(2.9 ${\AA}$)과 InP(3.1 ${\AA}$)로 이루어져 있고, GaP 층을 처음에 증착한 뒤, InP 층을 증착 하였다. 성장시 온도를 $400^{\circ}C$, $425^{\circ}C$, $460^{\circ}C$ 그리고 $490^{\circ}C$로 변화를 주어 성장하였다. 이들 시료를 GT400, GT425, GT460 그리고 GT490이라 하였고 이에 대한 광학적 특성을 PL (photoluminescence)를 이용하여 분석하였다. 10 K에서 PL 피크는 GT400 시료는 634 nm, GT425 시료는 636 nm, GT460 시료는 680nm, 그리고 GT490 시료는 692 nm에서 나타났으며, GT425 시료의 PL 세기가 가장 강하게 나타나고 GT400 시료의 PL 세기가 가장 약하게 나타났다. 그러나 260 K에서 PL 세기는 GT460 시료가 가장 강하게 나타나고 GT425 시료가 가장 약하게 나타났다. 성장온도가 증가함에 따라 밴드갭이 감소하는 것은 특정 성장온도($460^{\circ}C$) 이상에서 LCM (lateral composition modulation)이 형성되는 것으로 설명할 수 있다. GT400 시료와 GT425 시료의 PL 피크가 1.94 eV와 1.95 eV로 비슷하고, GT460 시료와 GT490 시료의 PL 피크가 1.82 eV과 1.79 eV로 비슷하게 나타난 것은 $460^{\circ}C$이상에서 성장한 시료에서 LCM 구조 형성으로 설명할 수 있다.
Kim, Hye Min;Lee, Sang Mi;Park, Hyo Young;Kang, Man-Jong
Reproductive and Developmental Biology
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v.38
no.2
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pp.71-77
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2014
The specific genetic modification in porcine somatic cells by gene targeting has been very difficult because of low efficiency of homologous recombination. To improve gene targeting, we designed three kinds of knock-out vectors with ${\alpha}1,3$-galactosyltransferase gene (${\alpha}1,3$-GT gene), DT-A/pGT5'/neo/pGT3', DT-A/NLS/pGT5'/neo/pGT3' and pGT5'/neo/ pGT3'/NLS. The knock-out vectors consisted of a 4.8-kb fragment as the 5' recombination arm (pGT5') and a 1.9-kb fragment as the 3' recombination arm (pGT3'). We used the neomycin resistance gene (neo) as a positive selectable marker and the diphtheria toxin A (DT-A) gene as a negative selectable marker. These vectors have a neo gene insertion in exon 9 for inactivation of ${\alpha}1,3$-GT locus. DT-A/pGT5'/neo/pGT3' vector contain only positive-negative selection marker with conventional targeting vector. DT-A/NLS/pGT5'/neo/pGT3' vector contain positive-negative selection marker and NLS sequences in upstream of 5' recombination arm which enhances nuclear transport of foreign DNA into bovine somatic cells. pGT5'/neo/pGT3'/NLS vector contain only positive selection marker and NLS sequence in downstream of 3' recombination arm, not contain negative selectable marker. For transfection, linearzed vectors were introduced into porcine ear fibroblasts by electroporation. After 48 hours, the transfected cells were selected with $300{\mu}g/ml$ G418 during 12 day. The G418-resistant colonies were picked, of which 5 colonies were positive for ${\alpha}1,3$-GT gene disruption in 3' PCR and southern blot screening. Three knock-out somatic cells were obtained from DT-A/NLS/ pGT5'/neo/pGT3' knock-out vector. Thus, these data indicate that gene targeting vector using nuclear localization signal and negative selection marker improve targeting efficiency in porcine somatic cells.
Kim, Jin-Woo;Park, Hyo-Jin;Yang, Seul-Gi;Koo, Deog-Bon
Journal of Animal Reproduction and Biotechnology
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v.35
no.4
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pp.347-356
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2020
Gangliosides are glycolipids in which oligosaccharide is combined with sialic acids. Our previous studies have suggested an interplay between ganglioside GD1a/GT1b and meiotic maturation capacity in porcine oocyte maturation. Furthermore, ganglioside GD1a and GT1b are known for its antioxidant activity, but it is still unclear whether possible antioxidant role of GD1a and GT1b is involved in porcine embryos development competence during in vitro culture (IVC). Here, the effects of ganglioside GD1a and GT1b on the embryonic developmental competence during in vitro culture of porcine were investigated. The effects of ganglioside GD1a and GT1b on the expression of ST3GAL2 were confirmed during embryos development (2-cell, 4-cell, 8-cell and blastocyst) using immunofluorescent staining (IF). As a result, the fluorescent expression of ST3GAl2 was higher in embryos at 4-8 cells stage than blastocysts. Blastocyst development rate significantly increased in only 0.1 μM GD1a and GT1b treated groups compared with control group. To investigate the cellular apoptosis, we analyzed TUNEL assay. In case of only 0.1 μM GD1a and GT1b treated groups, the total number of cells in blastocyst compared with control group, but there was no significant difference in the rate of apoptotic cells. We identified the intracellular ROS levels using DCF-DA staining. According to the result, ROS production significantly decreased in blastocysts derived from the 0.1 μM GD1a and GT1b treated groups. These results suggest that ganglioside GD1a and GT1b improve the developmental competence of porcine embryos via reduction of intracellular ROS during preimplantation stage.
Cigarette smoke (CS) induces oxidative and nitrosative stress to the respiratory tract (RT) via both oxidants contained in CS and by CS-induced activation of RT inflammatory-immune pro-oxidant processes. CS exposure has been associated with reduced levels of plasma micronutrient antioxidants, in part due to an increased utilization and turnover of alpha-tocopherol (AT). It has been suggested that gamma-tocopherol (GT) may have an expanded spectrum of antioxidant activation compared to alpha-tocopherol (AT). In order to investigate effects of high GT supplementation as compared to AT, C57 BL/6 mice were fed control AT (35 mg/kg diet) or high GT (1,000 mg/kg diet) diet for 8-10 weeks and then exposed to 60 $mg/m^3$ CS, 6 hr/day for 3 days. AT and GT levels and their metabolites were measured at endpoints. High GT supplementation significantly reduced AT levels in plasma, liver and lung compared to AT. CS increased levels of AT and GT in plasma and lung of control AT group but decreased GT levels in lung of high GT supplemented group. Moreover, CS significantly decreased GT metabolite, gamma-CEHC. The results suggest that high GT supplementation have selective modulation of concentrations of vitamin E and its metabolite in plasma and lung but not in liver against in vivo CS exposure.
Thyroid eye disease (TED) is a complex autoimmune disease with a spectrum of signs. we previously reported that trisialoganglioside (GT)1b is significantly overexpressed in the orbital tissue of TED patients, and that exogenous GT1b strongly induced HA synthesis in orbital fibroblasts. However, the signaling pathway in GT1b-induced hyaluronic acid synthase (HAS) expression in orbital fibroblasts from TED patients have rarely been investigated. Here, we demonstrated that GT1b induced phosphorylation of Akt/mTOR in a dose-dependent manner in orbital fibroblasts from TED patients. Both co-treatment with a specific inhibitor for PI3K and siRNA knockdown of TLR2 attenuated GT1b-induced Akt phosphorylation. GT1b significantly induced HAS2 expression at both the transcriptional and translational level, which was suppressed by specific inhibitors of PI3K or Akt/mTOR, and by siRNA knockdown of TLR2. In conclusion, GT1b induced HAS2 in orbital fibroblasts from TED patients via activation of the PI3K-related signaling pathway, dependent on TLR2.
Gallotannin (GT) is derived from plant poly phenol and is associated with biological actions in a wide range of cells. In this study, we evaluated the effect of GTon apoptosis and cyclooxygenase-2 (COX-2) expression and attempted to shed light on the mechanism of action in A549 human lung carcinoma cells. We found that GT dramatically induced apoptosis as demonstrated by expression of p53 and active caspase-3 via western blot analysis and fragmented DNA as detected by DNA fragmentation and DAPI staining. We also observed that GT significantly causes COX-2 expression in a dose-dependent manner determined by western blot analysis. Phosphorylation of Akt and p38 was considerably increased by GT in A549 human lung carcinoma cells. Inhibition of Akt and p38kinase with LY294002 or SB203580 suppressed GT-induced apoptosis and COX-2 expression. Furthermore, we have shown that prevention of COX-2 with NS398 or indomethacin does not any effects on apoptosis induced by GT. Taken together, our present results suggest that GT regulates apoptosis and COX-2 expression through Akt and p38kinase pathway in A549, human lung carcinoma cells.
Jong Hee Choi;Tae Woo Kwon;Hyo Sung Jo;Yujeong Ha;Ik-Hyun Cho
Journal of Ginseng Research
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v.47
no.3
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pp.390-399
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2023
Background: Gintonin (GT), a Panax ginseng-derived lysophosphatidic acid receptor (LPAR) ligand, has positive effects in cultured or animal models for Parkinson's disease, Huntington's disease, and so on. However, the potential therapeutic value of GT in treating epilepsy has not yet been reported. Methods: Effects of GT on epileptic seizure (seizure) in kainic acid [KA, 55mg/kg, intraperitoneal (i.p.)]-induced model of mice, excitotoxic (hippocampal) cell death in KA [0.2 ㎍, intracerebroventricular (i.c.v.)]-induced model of mice, and levels of proinflammatory mediators in lipopolysaccharide (LPS)-induced BV2 cells were investigated. Results: An i.p. injection of KA into mice produced typical seizure. However, it was significantly alleviated by oral administration of GT in a dose-dependent manner. An i.c.v. injection of KA produced typical hippocampal cell death, whereas it was significantly ameliorated by administration of GT, which was related to reduced levels of neuroglial (microglia and astrocyte) activation and proinflammatory cytokines/enzymes expression as well as increased level of the Nrf2-antioxidant response via the upregulation of LPAR 1/3 in the hippocampus. However, these positive effects of GT were neutralized by an i.p. injection of Ki16425, an antagonist of LPA1-3. GT also reduced protein expression level of inducible nitric-oxide synthase, a representative proinflammatory enzyme, in LPS-induced BV2 cells. Treatment with conditioned medium clearly reduced cultured HT-22 cell death. Conclusion: Taken together, these results suggest that GT may suppress KA-induced seizures and excitotoxic events in the hippocampus through its anti-inflammatory and antioxidant activities by activating LPA signaling. Thus, GT has a therapeutic potential to treat epilepsy.
Inherited platelet function disorders (IPFDs) are a disease group of heterogeneous bleeding disorders associated with congenital defects of platelet functions. Normal platelets essential role for primary hemostasis by adhesion, activation, secretion of granules, aggregation, and procoagulant activity of platelets. The accurate diagnosis of IPFDs is challenging due to unavailability of important testing methods, including light transmission aggregometry and flow cytometry, in several medical centers in Korea. Among several IPFDs, Glanzmann thrombasthenia (GT) is a most representative IPFD and is relatively frequently found compare to the other types of rarer IPFDs. GT is an autosomal recessive disorder caused by mutations of ITGA2B or ITGB3. There are quantitative or qualitative defects of the GPIIb/IIIa complex in platelet, which is the binding receptor for fibrinogen, von Willbrand factor, and fibronectin in GT patients. Therefore, patients with GT have normal platelet count and normal platelet morphology, but they have severely decreased platelet aggregation. Thus, GT patients have a very severe hemorrhagic phenotypes that begins at a very early age and persists throughout life. In this article, the general contents about platelet functions and respective IPFDs, the overall contents of GT, and the current status of genetic diagnosis of GT in Korea will be reviewed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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