본 연구는 방향족 화합물질 중 페놀폐수에 대한 생물학적 처리를 위해 본 실험실에서 분리한 페놀분해능이 우수한 Rhodococcus sp. EL-GT의 catechol 분해시 1,2-dioxygenase 분해활성이 높은 것으로 보아 분해경로가 ortho-pathway임을 알 수 있었다. 향후 Rhodococcus sp. EL-GT의 페놀분해 균의 유전학적 연구를 통하여 방향족 화합물의 분해에 보다 우수한 균으로 개발시켜 효율적인 처리에 이용가능성을 예측할 수 있었다.
Glycosyltransferases (GTs) from microbes are an emerging and rich source for efficient glycol-transformation of natural/unnatural compounds. Here, we probed the catalytic capability and substrate promiscuity of BmmGT1 from marine-derived Bacillus methylotrophicus B-9987. The regioselectivity of BmmGT1 on macrolactin A (1) was explored by optimization of the reaction conditions, in which a series of O-glycosylated macrolactins (1a-1e) were generated, including two new di/tri-O-glucosyl analogs (1b and 1e). Furthermore, BmmGT1 was able to catalyze the glycosylation of the thiol (S-) or amine (N-) sites of phenolic compounds (2 and 3), leading to the generation of N- (2a) or S-glycosides (3a and 3b). The present study demonstrates that BmmGT1 could serve as a potential enzyme tool for O-, N-, or S-glycosyl structural diversification of compounds for drug discovery.
Kim, Young June;Ahn, Kwang Sung;Kim, Minjeong;Kim, Min Ju;Ahn, Jin Seop;Ryu, Junghyun;Heo, Soon Young;Park, Sang-Min;Kang, Jee Hyun;Choi, You Jung;Shim, Hosup
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제30권3호
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pp.439-445
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2017
Objective: Production of alpha-1,3-galactosyltransferase (${\alpha}GT$)-deficient pigs is essential to overcome xenograft rejection in pig-to-human xenotransplantation. However, the production of such pigs requires a great deal of cost, time, and labor. Heterozygous ${\alpha}GT$ knockout pigs should be bred at least for two generations to ultimately obtain homozygote progenies. The present study was conducted to produce ${\alpha}GT$-deficient miniature pigs in much reduced time using mitotic recombination in neonatal ear skin fibroblasts. Methods: Miniature pig fibroblasts were transfected with ${\alpha}GT$ gene-targeting vector. Resulting gene-targeted fibroblasts were used for nuclear transfer (NT) to produce heterozygous ${\alpha}GT$ gene-targeted piglets. Fibroblasts isolated from ear skin biopsies of these piglets were cultured for 6 to 8 passages to induce loss of heterozygosity (LOH) and treated with biotin-conjugated IB4 that binds to galactose-${\alpha}$-1,3-galactose, an epitope produced by ${\alpha}GT$. Using magnetic activated cell sorting, cells with monoallelic disruption of ${\alpha}GT$ were removed. Remaining cells with LOH carrying biallelic disruption of ${\alpha}GT$ were used for the second round NT to produce homozygous ${\alpha}GT$ gene-targeted piglets. Results: Monoallelic mutation of ${\alpha}GT$ gene was confirmed by polymerase chain reaction in fibroblasts. Using these cells as nuclear donors, three heterozygous ${\alpha}GT$ gene-targeted piglets were produced by NT. Fibroblasts were collected from ear skin biopsies of these piglets, and homozygosity was induced by LOH. The second round NT using these fibroblasts resulted in production of three homozygous ${\alpha}GT$ knockout piglets. Conclusion: The present study demonstrates that the time required for the production of ${\alpha}GT$-deficient miniature pigs could be reduced significantly by postnatal skin biopsies and subsequent selection of mitotic recombinants. Such procedure may be beneficial for the production of homozygote knockout animals, especially in species, such as pigs, that require a substantial length of time for breeding.
The purpose of this study was to compare the shaping time of two shaping methods and the leakage of three different obturation techniques. Ninty three canaled human molar teeth were used, which were randomly divided into two groups of forty teeth each and ten control teeth. After working length determination, the one group was prepared crown-down technique using rotary root canal instruments of GT rotary files .12/20, .10/20, .08/20 and .06/20 taper(Maillefer Instrument SA. Switzerland). The other group was instrumented with Gates Glidden burs(#1, #2, and #3) to coronal preparation and GT rotary files .08/20 and .06/30 taper to apical preparation. Shaping time was measured. After root canals were instrumented, they were divided to three subgroups and obturated as follows : Subgroup 1, obturated with single cone method Subgroup 2, obturated with lateral condensation : Subgroup 3, obturated with continuous wave technique. Three subgroups were obturated using non-standardized gutta-percha cone(Diadent, Korea, .06 or .08 taper) and AH-26(Dentsply DeTrey, Germany) as a root canal cement. Ten unobturated teeth served as positive and negative controls. After immersion in 2% methylene blue solution for 1 month, the teeth were washed during 24h. The teeth were demineralized in 10% nitric acid and dehydrated by immersion in 80, 90 and 100% ethyl alcohol. The teeth were finally cleared and stored in 100% methylsalicylate, and apical dye penetration was evaluated under stereomicroscope(Leica M420, LC, U.S.A)at $\times$8.75 magnification. Liner measurement of dye penetration was assessed with the use of digitalized image analysing system (analySIS, GmbH, Germany) The data were analysed statistically using independent T-test and Two-way ANOVA and Tukey test. The result were as follows 1. In canal prepared with GT$^{TM}$ rotary file, shaphing time taked more than the group of using Gates Glidden drill to coronal preparation without statistical significance (p>0.05) 2. The group of single cone obturation using canal preparation of GT$^{TM}$ rotary files showed significantly more apical leakage than those of lateral condensation and continuous wave technique regardless of shaping method (p<0.05). 3 The group of single cone obturation using canal preparation of GT$^{TM}$ rotary files and Gates Glidden drill showed significantly more apical leakage than those of continuous wave technique regardless of shaping method (p<0.05). 4. Regardless of shaping method, The group of continuous wave obturation showed less apical leakage than those of lateral condensation without statistical significance (p>0.05). 5. The group of single cone obturation using canal preparation of GT$^{TM}$ rotary files and Gates Glidden drill showed more apical leakage than the group of lateral condensation using same shaping method with-out statistical significance (p>0.05).
The N-inversion energies and nucleophilic ring-opening reactions of N-substituted aziridine compounds are investigated using B3LYP/6-31+$G^*$ methods, where substituents (R) on the nitrogen atom has been H (1), Me (2), Ph (3), Bn (4), CHMePh (5), $CO_2Me$ (6), COPh (7) and $SO_2Ph$ (8). The N-inversion energy with X group are decreased as the following order: R = CHMePh (17.06 kcal/mol) $\gt$ Me (16.97) $\gt$ Bn (16.70) $\gt$ H (16.64) $\gt$$SO_2Ph$ (12.18) $\gt$ Ph (8.91) $\gt$ COPh (5.75) $\gt$$CO_2Me$ (5.48). For reactivity of the ring opening toward cyanide ion, the aziridine 6 (R=$CO_2Me$) is shown to be the most reactive one. During the ring opening of aziridine 6 by CN$^{\ominus}$, the torsional OCNC angle becomes near to $180^{\circ}$, where the geometry allows for the effective incorporation of electrons of the nitrogen atom to the C=O bond. It would be a possible driving force for nucleophilic ring opening reaction as well as decreasing the N-inversion energy barrier. Regarding to the regioselectivity, the orientation of nucleophile in ring opening reaction appears to be different in the case of 9 and 10. The results are discussed in terms of steric/electronic effect of the $C_2$-substituents.
Green tea leaves were fermented for 15 and 30 days with Monascus pilosus which is known to produce functional statins (TMs), and the content of various biochemical constituents such as total polyphenol (TP), total flavonoid (TF), theaflavin, and thearubigin were analyzed and compared with that of non-fermented green tea (GT) and Pu-erh Chinese post-fermented tea (PU). In addition to the electron donating ability (EDA), ferric iron reducing power (FIRP), xanthine oxidase (XO) inhibitory activity, superoxide dismutase (SOD)-like activity, iron chelating activity (ICA) and hydrogen peroxide contents were also measured and compared with that of GT and PU. Content of TP and TF in the water and ethanol extracts in TMs were lower than those in GT and PU. Theaflavin and thearubigin contents of water and ethanol extracts in TMs were higher than those of GT. And, these components were increased depending on the period of fermentation. While, EDA and FIRP of TMs were lower than those of GT, XO inhibitory activity of TMs was higher than non-fermented tea. While, ICA of TMs was slightly higher than GT and PU, the content of hydrogen peroxide in TMs was markedly lower than GT. This results suggested that the green tea fermented by M. pilosus was valuable for oxidative stress-induced diseases by decreasing hydrogen peroxide, and forming theaflavins and thearubigins with functionality of genus Monascus.
Choi, Se Hwan;Choi, Hyun Joon;Min, Chul Hee;Chung, Young Hyun;Ahn, Jae Joon
Nuclear Engineering and Technology
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제53권3호
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pp.888-893
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2021
The International Atomic Energy Agency has developed a tomographic imaging system for accomplishing the total fuel rod-by-rod verification time of fuel assemblies within the order of 1-2 h, however, there are still limitations for some fuel types. The aim of this study is to develop a deep learning-based denoising process resulting in increasing the tomographic image acquisition speed of fuel assembly compared to the conventional techniques. Convolutional AutoEncoder (CAE) was employed for denoising the low-quality images reconstructed by filtered back-projection (FBP) algorithm. The image data set was constructed by the Monte Carlo method with the FBP and ground truth (GT) images for 511 patterns of missing fuel rods. The de-noising performance of the CAE model was evaluated by comparing the pixel-by-pixel subtracted images between the GT and FBP images and the GT and CAE images; the average differences of the pixel values for the sample image 1, 2, and 3 were 7.7%, 28.0% and 44.7% for the FBP images, and 0.5%, 1.4% and 1.9% for the predicted image, respectively. Even for the FBP images not discriminable the source patterns, the CAE model could successfully estimate the patterns similarly with the GT image.
Objective : The purpose of this study is to examine the effects of Gamisipjeontang-gamibang(GT) on an experimental bum elicitation. Method : The absorbance of the photo cell mixed with GT at the Abs 560 nm was measured after irradiation for 1 min. In order to know the antioxidant effect on skin cell of mice after burn elicitation, superoxide dismutase(SOD) activity was measured. Also, in order to know effects on the skin regeneration in the burned mice, we counted the eosinophil in blood from animals via cardiac puncture and observed the histological structure in the epidermal basal layer and the dermal section on the 3rd, 7th and 14th day after burn elicitation. We also studied changes in angiogenesis in the capillary surrounding the basal layer and dermal papilla. The changes of HSP70 distribution and changes of p53 positive reaction were observed to investigate the changes of the stress in the skin as well. Result : The results indicated that GT has a significant impact on the antioxidant effect on skin cells of mice after bum elicitation by increasing SOD activity in vitro test. GT seems to decrease MIP-2 which induces neutrophil infiltration and promotes the angiogenesis dose-dependently. Furthermore, GT decreased HSP70, the expression of which was induced by elevated temperatures, and p53 which induce a apoptosis after stress. Conclusion : GT can be applied to burned skin through its antioxidant effect and skin regeneration property.
Objectives This study was conducted to confirm the inhibitory effect of β-glucan on epithelial inflammation induced by atopic dermatitis through Endocannabinoid system (ECS) activity. Methods Six-week-old NC/Nga mice were divided into a control group (Ctrl), atopic dermatitis elicitation group (ADE), and a β-glucan-treated group (β-glucan treatment after atopy dermatitis elicitation, β-GT). After 3 weeks, CB1, CB2, and GPR55 were observed to confirm the regulation of ECS activity, and filaggrin in the stratum corneum and Kallikrein-related peptidase (KLK) 7 in the stratum corneum and protease activated receptor (PAR)-2 were observed to confirm the inhibition of the inflammation, Phosphorylated extracellular signal-related kinase (p-ERK), Phosphorylated mammalian target of rapamycin (p-mTOR), and E-Cadherin were observed to confirm microenvironmental regulation. Results β-GT was significantly increased in CB1, CB2, and GPR55 positive reactions compared to that of the ADE. In positive reaction of the filaggrin in the stratum corneum, β-GT was significantly increased than that of the ADE. For KLK7 positive and PAR2 positive, β-GT was significantly reduced compared to the ADE. The p-ERK-positive and p-mTOR-positive reactions were significantly reduced in β-GT than in ADE. E-cadherin positive reaction was significantly increased in β-GT than in ADE (All p < 0.01). Conclusions It was confirmed that β-glucan has the effect of inhibiting the epithelium induced by atopic dermatitis through the ECS activity.
The Steering and Sailing Rules of International Regulation for Preventing Collisions at Sea now in use direct actions to avoid collision when two power-driven vessels are meeting on reciprocal or nearly reciprocal courses so as to involve risk of collision. But these rules do not refer to the minimum relative distances and safety relative distances between two vessels when they should take such actions.In this paper the ship's collision avoiding actions being analyzed from a viewpoint of ship motions, the mathematical formulas to calculate such relative distances necessary for taking actions to avoid collision were worked out. The values of maneuvering indices being figured out through experiments of 20 actual ships of small, medium, large and mammoth size and applied to calculating formulas, the minimum relative distances and safety relative distances were calculated. The main results were as follows. 1. It was confirmed that the criterion elements for collision avoiding actions in head-on situation of two vessels shall be the minimum relative distances and safety relative distances between them. 2. On the assumption that two vessels same in size and condition were approaching each other in head-on situation, the minimum relative distance of small vessel(GT : 160~650tons) was found to be about 4.7 times her own length, and those of medium (GT:2,300~4,500tons),large(GT:15,000~62,000tons) and mommoth (GT:91,000~194,000tons) vessels were found to be about 5.2 times, about 5.2 times and about 6.1 times their own lengths respectively. 3. On the assumption that two vessels same in size and condition were approaching each other in head-on situation, the safe relative distance of small vessel (GT : 160~650tons) was found to be about 6.8 times her own length, and those of medium (GT : 2,300~4,500tons), large (GT: 15,000~62,000tons) and mammoth (GT : 91,000~194,000tons) vessels were found to be about 9.0 times, about 6.3 times, and about 8.0 times their own lengths respectively. 4. It is considered to be helpful for the safety of ship handling that the sufficient safe relative distances for every vessels shall be more than about 12~14 times which are 2 times minimum relative distance, their own length on above assumption.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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