• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제10권6호
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• pp.600-604
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• 1989

In order to find the rational methods for improving the thermal stability of subtilisin Carlsberg, the mechanisms of irreversible thermoinactivation of the enzyme were studied at $90^{\circ}C.$ At pH 4, the main process was hydrolysis of peptide bond. This process followed first order kinetics, yielding a rate constant of $1.26\;{\times}\;10^{-1}h^{-1}$. Hydrolysis of peptide bond of PMS-subtilisin occurred at various sites, which produced new distinct fragments of molecular weights of 27.2 KD, 25.9 KD, 25.0 KD, 22.3 KD, 19.0 KD, 17.6 KD, 16.5 KD, 15.7 KD, 15.0 KD, 13.7 KD, and 12.7 KD. Most of the new fragments originated from the acidic hydrolysis at the C-side of aspartic acid residues. However 25.0 KD, 15.7 KD, and 13.7 KD which could not be removed in purification steps stemmed from the autolytic cleavage of subtilisin. The minor process at pH 4 was deamidation at asparagine and/or glutamine residues and some extend of aggregation was also observed. However, the aggregation was main process at pH 7 with a first order kinetic constant of $16 h^{-1}.$ At pH 9, the main process seemed to be combination of deamidation and cleavage of peptide bond.

• Toxicological Research
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• 제34권4호
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• pp.325-332
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• 2018

The mechanism of the previously reported antidiabetic effect of Basella alba is unknown. This study investigated the role of B. alba aqueous leaf extract in the modulation of inflammatory cytokines and islet morphology in streptozotocin-induced diabetic rats. Forty male Wistar rats, between 8 and 10 weeks old, were randomly divided into four groups (n = 10) and administered the following treatments: Healthy control (H-c) and Diabetic control (D-c) animals received normal saline 0.5 mL/100 g body weight daily, while Healthy Treatment (H-Ba) and Diabetic Treatment (D-Ba) rats received the plant extract 200 mg/kg body weight daily. All treatments were administered by oral gavage. Diabetes was induced in D-c and D-Ba rats by a single intraperitoneal injection of streptozotocin (55 mg/kg body). The body weight and fasting blood sugar (FBS) levels were recorded every week for 4 weeks, after which the rats were euthanized and samples collected for further analysis. After the experiment, FBS level was significantly reduced (p < 0.0001) in rats in the D-Ba group, but increased (p < 0.001) in rats in the D-c group. The absolute (H-c and H-Ba vs D-c, p < 0.05) and relative (D-Ba vs H-c, p < 0.05; D-Ba vs H-Ba, p < 0.005) weights of the pancreases were significantly higher after the experiment. The rats in the D-c group had significantly higher levels of serum interleukin-$1{\beta}$ (p < 0.001 vs H-c; p < 0.05 vs H-Ba and D-Ba) and monocyte chemotactic protein-1 (p < 0.0001), but lower levels of interleukin-10 (p < 0.05) in comparison with the other groups. Histopathological examination revealed severe interstitial congestion, reduced islet area (p < 0.0001), and increased islet cell density in the D-c group compared with those in the D-Ba group. From these findings, it was concluded that the aqueous extract of B. alba stimulates the recovery of beta-islet morphology in streptozotocininduced diabetic rats by modulating the peripheral production of inflammatory cytokines.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제16권4호
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• pp.320-326
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• 1988

Aspergillus sp.로부터 추출한 glucoamylase를 Sephacryl S-200과 DEAE-Sephacel 이온교환 칼럼을 통과시킨 후, 2개의 Isozyme으로 분리하였다. 분리된 glucoamylase isozyme(GI, GII)의 효소학적특성을 각각 조사하였다. GI 및 GII isozyme의 활성최적 pH 및 온도는 pH4.5 및 $65^{\circ}C$였다. 분리된 효소는 pH 3-7 사이에서 안정했으며, 또한 55$^{\circ}C$ 이하에서 안정하였다. Hg$^{++}$는 효소 황성을 완전히 저해하였으나, 글리세롤은 효소의 안정성을 크게 증가시켰다. 효소반응의 활성화에너지는 GI의 경우 10,62 kcal/mole이었으며, GII의 경우에는 10.23kcal/mole이었다. GI isozyme의 기질에 대한 Km값은, 0.62% (soluble starch), 0.32% (dextrin), 1.03%(glycogen)이었으며, GII isozyme의 경우에는, 0.66%(soluble starch) 0.23%(dextrin), 그리고 0.14% (glycogen)이었다.

• 대한화학회지
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• 제18권2호
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• pp.126-131
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• 1974

비수용성 긴고리 지방족 아민인$(n-C_8H_{17})_3N$과 $(n-C_8H_{17})_3NCH_3Cl$을 사용하여 산도가 틀린 텅그스텐산수용액(pH=2, 4, 6)으로 부터 용매추출법에 의하여 유기용매에 녹는 다중텅그스텐산아민염을 제조하는데 성공하였다. 제조된 텅그스텐산 아민염의 분자량을 벤젠용매에서 더미스트를 이용한 감도 1/$4000^{\circ}C$의 훼트스톤 브리지를 사용하여 측정할 수 있었다. 분자량 측정결과와 화학분석 및 적외선 스펙트럼으로 부터 pH=2, 4에서 생긴 아민염은 메타텅그스텐산염, pH=6에서 생긴 아민염은 파라텅그스텐산염이 아니고 미지의 새로운 다중텅고스텐산염임을 알 수 있었다.

• Journal of Microbiology
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• 제41권4호
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• pp.289-294
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• 2003

Gelatinase is a proteolytic enzyme that hydrolyzes gelatin. Gelatinolytic activity was detected from culture broths of Streptomyces griseus IFO13350 and HH1 by paper disc assays on 0.5% agar plates containing 1% gelatin. The concentrated extracellular protein from the S. griseus was analyzed by SDS polyacrylamide gel, and two proteins, with molecular weights of 30 and 28 kDa, respectively, were identified to have gelatinase activity by gelatin zymography. The protein with a molecular weight of 28 kDa was confirmed to be S. griseus trypsin (SGT). The effects of metal ions and metal chelators on the protease activity of the SGT were studied. Of the metal ions tested, only manganese was found to enhance the protease activity, 2.6 times, however, $Co^{2+},\;Cu^{2+},\;and\;Zn^{2+}$, and metal chelators, such as EDTA and EGTA, inhibited the SGT activity. When the protease activity of the SGT was measured at various pHs, in the presence of 5 mM $MnCl_2$, its highest activity was at pH 11.0, whereas only 60% of the maximum activity was observed between pHs 4.0 and pH 6.0, and almost 80% activity between pHs 7.0 to pH 10.0. The protease activity was measured at various temperatures in the presence of 5 mM $MnCl_2$. The SGT was found to be stable up to $60^{\circ}C$ for 30 min, while only 16% of the enzyme activity remained at $60^{\circ}C$, and at $80^{\circ}C$ almost all the activity was lost. The optimal temperature for the protease activity was $50^{\circ}C$.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제9권4호
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• pp.213-218
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• 1981

순수분리정제된 $\beta$-galactosidase의 분자량은 Sephadex G-200 gel filtration법에서 130,000이며 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis에서 130,000외에 70,000이 확인되어 이 효소는 70,000인 2개의 subunit로 구성되어 있다고 판단되었다. 효소의 안정pH는 4.5~7.0이며 효소활성의 최적 pH는 4.7 최적온도는 5$0^{\circ}C$였다. 효소활성 및 안정제로 1가, 2가 금속ion을 필요로 하지않았으며 C $u^{++}$ 1mM에서 59%, galactose 100mM에서 48% 저해되었다. 5% lactose용액, 시유 및 10% skim milk 용액에 이 정제된 $\beta$-galactosidase 10units/$m\ell$를 사용하여 5$0^{\circ}C$에서 4시간 동안 반응시켰을 때 lactose가 각각 69.5%. 88.7% 및 72.6%가 glucose와galactose로 전환된 결과를 얻었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제32권3호
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• pp.450-457
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• 2003

본 연구는 SD계 흰쥐를대상으로 전분을 식이 무게의 50%로 주면서 일반 옥수수전분을 고아밀로오스 옥수수전분으로 대치시 켜 RS양을 증가시켰을 때, 지방대사와 면역능력에 미치는 영향을 살펴보는 것을 목적으로 하였다. 식이섭취량이나 식이 효율에는 유의적인 차이가 없었으나 최종 체중은 대조군에 비해 HA100군에서 감소하는 경향이었다. 맹장무게와 하루 변배설량은 식이내 HAS량이 증가할수록 유의적으로 증가하였다. 맹장내용물의 pH는 식이 내 HAS량이 증가할수록 유의적으로 감소하였다. 혈장 내 총 지방, 중성지방, 총 콜레스테롤량은 HAS섭취가 증가하면 감소하였으나 HDL-콜레스테롤량과 간내 총 지방, 중성 지방, 콜레스테롤량은 HAS섭취에 의한 영향을 받지 않았다. 변을 통한 총 콜레스테롤의 배설량은 HA50군에서 대조군에 비해 유의적으로 증가하였다. 면역 기관인 흉선과 비장의 무게와 혈장의 Ig G와 $C_3$농도는 식이에 의해 영향을 받지 않았다. 비장세포의 증식 능력을 보았을 때 PHA에 의한 자극에는 식이의 영향이 없었으나 저용량의 Con A로 자극하였을 때 HA25, HA50에서 증식이 유의적으로 낮았고, 배양액 내 PGE$_2$의 생산량이 증가하는 경향을 보였다. 이를 종합해보면, HAS의 섭취는 체중감소의 효과가 있는 것으로 보이며, 맹장의 무게를 증가시키고, 맹장 내 pH를 낮추고, 혈액내 지방성분을 감소시키는 것으로 나타났다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제20권1호
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• pp.110-116
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• 2010

Lactic acid (LA) fermentation by Lactobacillus salivarius ATCC 11741 immobilized on loofa sponge (LS) was evaluated. To increase the surface area of LS for cell immobilization, $H_2O_2$ and chitosan were introduced as surface modifying reagents. Four chitosans of different molecular weights were separately coated on LS. All experiments were conducted in shaking flask mode at 100 rpm rotating speed and $37^{\circ}C$ with 5% $CaCO_3$ as a pH regulating agent. The effects of initial glucose concentration were investigated in the range of 20-100 g/l on LA fermentation by free cells. The results indicate that the maximum concentration of LA was produced with 50 g/l glucose concentration. The immobilized cell system produced 1.5 times higher concentration than free cells for 24 h of fermentation. Moreover, immobilized cells can shorten the fermentation time by 2-fold compared with free cells at the same level of LA concentration. At 1% (w/v) chitosan in 2% (v/v) acetic acid, the Yp/s and productivities of various molecular weights of chitosans were insignificantly different. Repeated batch fermentations showed 5 effective recycles with Yp/s and productivity in the range of 0.55-0.85 and 0.90-1.20 g/l.h, respectively. It is evident that immobilization of L. salivarius onto LS permits reuse of the system under these fermentation conditions. Scanning electron micrographs indicated that there were more intact cells on the chitosan-treated LS than on the untreated LS, thus confirming the effectiveness of the LS-chitosan combination when being utilized as a promising immobilization carrier for LA fermentation.

• 폴리머
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• 제33권5호
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• pp.477-484
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• 2009

소수성 실리카를 안정제로 AIBN을 개시제로 하는 현탁중합법으로 PBMA 입자 및 카본블랙을 함유하는 PBMA 복합체 입자를 합성하였다. pH를 이용하여 실리카입자를 표면개질하여 안정제로 선택한 반응에서 사용한 실리카의 90%는 안정제로, 10%는 PBMA 입자의 내부에 위치하는 것으로 규명되었다. 반응속도와 입경은 안정제의 농도에 무관한 것으로 관찰되었으나, 수평균 및 중량평균분자량은 안정제의 농도가 1.67 wt%를 초과하면서 증가하는 현상을 나타내었다. 개시제의 농도 증가와 반응온도의 상승에 따라 분자량은 이론식에 거의 일치하는 형태로 감소하였다. 카본블랙을 단량체에 대하여 1, 3, 5 및 7 wt% 유입하는 경우 반응전환율은 단계적으로 감소하였으며 유리전이온도는 카본블랙의 농도가 단량체에 대하여 3 wt%에서 5 wt%로 증가하는 경우 약 $4^{\circ}C$ 상승하였다. 투과전자현미경(TEM)을 이용하여 입자의 내부에 위치하는 카본블랙을 확인하였으며, 열중량분석법(TGA)으로 카본블랙의 농도를 측정하였다.

• 폴리머
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• 제28권3호
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• pp.232-238
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• 2004

약물 전달체로서 메톡시 폴리(에틸렌 글리콜) (MPEG, methoxypolyethylene glycol)과 생분해성 폴리에스테르 계열의 카프로탁톤 ($\varepsilon$-CL, $\varepsilon$-caprolactone)으로 구성된 MPEG-PCL 블록 공중합체를 개환중합을 통해 합성하였다. MPEG-PCL의 결정성과 열적특성은 X선 굴절계와 시사주차열량계를 통하여 분석하였다 모델 단백질로서 알부민 (FITC-BSA, albumin bovine-fluorescein isothiocyanate)과 블록 공중합체를 동결 제분 후, 직접압축 성형방법에 의해 웨이퍼를 제조하였다. 알부민의 방출은 pH 7.4 인산염완충액을 사용하여 37$^{\circ}C$에서 14일 동안 관찰하였다. 알부민의 방출양은 형광분광기를 통하여 FITC의 강도에 의해 결정되었다. 웨이퍼의 형태학적 관찰은 디지털 카메라와 전자주사현미경을 통하여 관찰하였다. 알부민의 방출 속도와 초기 burst는 MPEG-PCL 블록 공중합체의 분절 내에서 폴리(에틸렌 글리롤)의 분자량이 증가할수록 또한 폴리카프로락톤의 분자량이 감소할수록 많은 초기방출과 단축된 방출기간을 보였다.