광합성 경로의 전환은 현화식물의 계통에서 여러 번에 걸쳐서 독립적으로 일어난 진화적 사건으로서 사초과에서는 다섯 번 이상 발생한 것으로 추정되고 있다. 방동사니족에서 나타난 C4 광합성 경로로의 전환은 한 번 발생하였으며 이는 방동사니족 내 C4 식물의 공유파생형질로 여겨진다. 방동사니족에 포함된 속들의 형태학적 한계는 분자계통학적 유연관계와 일치하지 않으며, 특히 다계통군으로 여겨지는 방동사니속의 한계는 계통분류학적으로도 논란이 되고 있다. 본 연구에서는 한국산 방동사니족 식물의 광합성 경로와 분자계통을 비교하고자 하였다. 해부학적 관찰을 통해 우리나라 방동사니족 식물 20종(방동사니속 18종, 파대가리속 1종, 세대가리속 1종)의 광합성 경로를 확인하였다. 또한 nrITS, rbcL, trnL-F의 염기서열에 근거하여 각 분류군의 분자계통학적 위치를 파악하고자 하였으며, 분류군 전체의 계통을 파악하기 위하여 선행연구 결과와 함께 분석하였다. 엽록체가 밀집된 광합성 조직의 위치에 따라 우리나라 방동사니속 식물 중 병아리방동사니와 우산방동사니, 모기방동사니, 알방동사니의 네 종은 C3 식물로 확인되었고, 나머지 14종의 방동사니속 식물, 파대가리, 그리고 세대가리는 C4 식물로 결정되었다. 또한 분자계통학적 분석에서 방동사니족은 CYPERUS 분계군과 FICINIA 분계군으로 구분되었으며, 우리나라 방동사니족 식물은 모두 CYPERUS 분계군에 속하였다. CYPERUS 분계군내에서 C4 식물들은 단계통군을 형성하였지만 각 분류군 간의 유연관계는 명확하게 나타나지 않았다. 분자계통수에서 세대가리속과 파대가리속은 C4 식물인 방동사니속 식물들과 함께 단일 분계군을 형성함으로서 각각 독립된 속으로서 지지 되지 않는다. 이는 기존의 연구결과와 일치하며, CYPERUS 분계군에 속한 속들의 계통분류체계를 명확하게 하기 위해서는 면밀한 형태학적 연구와 더불어 높은 해상력을 갖춘 분자계통학적 연구가 이루어져야 할 것이다.
The specific rates of sovolysis of 4-methylthiophene-2-carbonyl chloride (1) have been determined in 26 pure and binary solvents at $25.0^{\circ}C$. Product selectivities are reported for solvolyses of 1 in aqueous ethanol and methanol binary mixtures. Comparison of the specific rates of solvolyses of 1 with those for p-methoxybenzoyl chloride (2) in terms of linear free energy relationships (LFER) are helpful in mechanistic considerations, as is also treatment in terms of the extended Grunwald-Winstein equation. It is proposed that the solvolyses of 1 in binary aqueous solvent mixtures proceed through an SN1 and/or ionization (I) pathway rather than through an associative $S_N2$ and/or addition-elimination (A-E) pathway.
Although previous studies have implicated a role for TC1 (C8orf4) in cancer cell proliferation, the molecular mechanism of its action is still largely unclear. In this study, we showed, for the first time, that the mRNA levels of TC1 were upregulated by mitogens (FBS/thrombin) and at least partially, through the ERK1/2 signaling pathway. Interestingly, the over-expression of TC1 promoted the $G_1$- to S-phase transition of the cell cycle, which was delayed by the deficiency of ERK1/2 signaling in fibroblast cells. Furthermore, the luciferase reporter assay indicated that the over-expression of TC1 significantly increased Cyclin D1 promoter-driven luciferase activity. Taken together, our findings revealed that TC1 was involved in the mitogen-activated ERK1/2 signaling pathway and positively regulated $G_1$- to S-phase transition of the cell cycle. Our results may provide a novel mechanism of the role of TC1 in the regulation of cell proliferation.
The Grignard reactions of bis(chloromethyl)dimethylsilane (1) with trimethylchlorosilane (2) in THF give both the intermolecular C-Si coupling and intramolecular C-C coupling products. At beginning stage, 1 reacts with Mg to give the mono-Grignard reagent ClCH2Me2SiCH2MgCl (1) which undergoes the C-Si coupling reaction to give MC2Si(CH2SiMe3)2 3, or C-C coupling to a mixture of formula Me3SiCH2(SiMe2CH2CH2)nR1 (n = 1, 2, 3, ..; 4a, R1I = H: 4b, R1 = SiMe3). In the reaction, two reaction pathways are involved: a) Ⅰ reacts with 2 to give Me3SiCH2SiMe2CH2Cl 6 which further reacts with Mg to afford a Me2SiCH2Mel-SiCH2MgCl (Ⅱ) or b) I cyclizes intramolecularly to a silacyclopropane intermediate A, which undergoes a ring-opening polymerization by the nucleophilic attack of the intermediates I or Ⅱ, followed by the termination reaction with H2O and 2, to give 4a and 4b, respectively. As the mole ratio of 2/1 increased from 2 to 16 folds, the formation of product 3 increased from 16% to 47% while the formation of polymeric products 4 was reduced from 60% to 40%. The intermolecular C-Si coupling reaction of the pathway a becomes more favorable than the intramolecular C-C coupling reaction of the pathways b at the higher mole ratio of 2/1.
Pseudomonas sp. S-47 is capable of catabolizing 4-chlorobenzoate (4CBA) as carbon and energy sources under aerobic conditions via the mesa-cleavage pathway. 4CBA-dioxygenase and 4CBA-dihydrodiol dehydrogenase (4CBA-DD) catalyzed the degradation af 4CBA to produce 4-chlorocatechol in the pathway. In this study, the xylL gene encoding 4CBA-DD was cloned from the chromosomal DNA of Pseudomonas sp. S-47 and its nucleotide sequence was analyzed. The xylL gene was found to be composed of 777 nucleotide pairs and to encode a polypeptide of 28 kDa with 258 amino acid residues. The deduced amino acid sequence of the dehydrogenase (XylL) from strain S-47 exhibited 98% and 60% homologies with these of the corresponding enzymes, Pseudomonas putida mt-2 (XyIL) and Acinetobacter calcoaceticus (BenD), respectively. However, the amino arid sequences show 30% or less homology with those of Pseudomonas putida (BnzE), Pseudomonas putida Fl (TodD), Pseudomonas pseudoalcaligenes KF707 (BphB), and Pseudomonas sp. C18 (NahB). Therefore, the 4CBA-dihydrodiol dehdrogenase of strain S-47 belongs to the group I dehydrogenase involved in the degradation of mono-aryls with a carboxyl group.
Indole glucosinolates (IG) play important roles in plant defense, plant-insect interactions, and stress responses in plants. In an attempt to metabolically engineer the IG pathway flux in Chinese cabbage, three important Arabidopsis cDNAs, CYP79B2, CYP79B3, and CYP83B1, were introduced into Chinese cabbage by Agrobacterium-mediated transformation. Overexpression of CYP79B3 or CYP83B1 did not affect IG accumulation levels, and overexpression of CYP79B2 or CYP79B3 prevented the transformed callus from being regenerated, displaying the phenotype of indole-3-acetic acid (IAA) overproduction. However, when CYP83B1 was overexpressed together with CYP79B2 and/or CYP79B3, the transformed calli were regenerated into whole plants that accumulated higher levels of glucobrassicin, 4-hydroxy glucobrassicin, and 4-methoxy glucobrassicin than wild-type controls. This result suggests that the flux in Chinese cabbage is predominantly channeled into IAA biosynthesis so that coordinate expression of the two consecutive enzymes is needed to divert the flux into IG biosynthesis. With regard to IG accumulation, overexpression of all three cDNAs was no better than overexpression of the two cDNAs. The content of neoglucobrassicin remained unchanged in all transgenic plants. Although glucobrassicin was most directly affected by overexpression of the transgenes, elevated levels of the parent IG, glucobrassicin, were not always accompanied by increases in 4-hydroxy and 4-methoxy glucobrassicin. However, one transgenic line producing about 8-fold increased glucobrassicin also accumulated at least 2.5 fold more 4-hydroxy and 4-methoxy glucobrassicin. This implies that a large glucobrassicin pool exceeding some threshold level drives the flux into the side chain modification pathway. Aliphatic glucosinolate content was not affected in any of the transgenic plants.
Cuong, Cang Van;Kim, Na-Ri;Cho, Hee-Cheol;Kim, Eui-Yong;Han, Jin
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제8권2호
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pp.95-100
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2004
Ischemic preconditioning (IPC) has been accepted as a heart protection phenomenon against ischemia and reperfusion (I/R) injury. The activation of ATP-sensitive potassium $(K_{ATP})$ channels and the release of myocardial nitric oxide (NO) induced by IPC were demonstrated as the triggers or mediators of IPC. A common action mechanism of NO is a direct or indirect increase in tissue cGMP content. Furthermore, cGMP has also been shown to contribute cardiac protective effect to reduce heart I/R-induced infarction. The present investigation tested the hypothesis that $K_{ATP}$ channels attenuate DNA strand breaks and oxidative damage in an in vitro model of I/R utilizing rat ventricular myocytes. We estimated DNA strand breaks and oxidative damage by mean of single cell gel electrophoresis with endonuclease III cutting sites (comet assay). In the I/R model, the level of DNA damage increased massively. Preconditioning with a single 5-min anoxia, diazoxide $(100\;{\mu}M)$, SNAP $(300\;{\mu}M)$ and 8-(4-Chlorophenylthio)-guanosine-3',5'-cyclic monophosphate (8-pCPT-cGMP) $(100\;{\mu}M)$ followed by 15 min reoxygenation reduced DNA damage level against subsequent 30 min anoxia and 60 min reoxygenation. These protective effects were blocked by the concomitant presence of glibenclamide $(50\;{\mu}M)$, 5-hydroxydecanoate (5-HD) $(100\;{\mu}M)$ and 8-(4-Chlorophenylthio)-guanosine-3',5'-cyclic monophosphate, Rp-isomer (Rp-8-pCPT-cGMP) $(100\;{\mu}M)$. These results suggest that NO-cGMP-protein kinase G (PKG) pathway contributes to cardioprotective effect of $K_{ATP}$ channels in rat ventricular myocytes.
The metabolism of [$^{14}\textrm{C}$] $\textrm{GA}_{12}$ in the Chinese yam (Dioscorea opposita Thunb. var. Tsukune) was examined to determine the identification of endogenous gibberellins. [$^{14}\textrm{C}$] $\textrm{GA}_{12}$ was metabolized to $\textrm{GA}_{53}$, $\textrm{GA}_{44}$, $\textrm{GA}_{19}$, $\textrm{GA}_{20}$, $\textrm{GA}_1$, $\textrm{GA}_8$, $\textrm{GA}_{15}$, $\textrm{GA}_{24}$, $\textrm{GA}_9$, $\textrm{GA}_{36}$ and $\textrm{GA}_4$. Radioactivity of GAs in non C-13 hydroxylation route was five-fold higher than that of early C-13 hydroxylation in analyzed GA-metabolites. Radioactivity of $\textrm{GA}_4$ was always four times higher than that of $\textrm{GA}_1$ at every feeding time. $\textrm{GA}_1$ radioactivity has always a lower level to below 200 DPM. The major pathway of endogenous GA metabolism in seedlings of the Chinese yam might be the non C-13 hydroxylation pathway.
Ralstonia eutrupha JMP134 is a well-known soil bacterium which can metabolite diverse aromatic compounds and xenobiotics, such as phenol, 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2, 4-D), and trichloroethylene (TCE), etc. Phenol is degraded through chromosomally encoded phenol degradation pathway. Phenol is first metabolized into catechol by a multicomponent phenol hydroxylase, which is further metabolized to TCA cycle intermediates via a meta-cleavage pathway. The nucleotide sequences of the genes for the phenol hydroxylase have previously been determined, and found to composed of eight genes phlKLMNOPRX in an operon structure. The phlR, whose gene product is a NtrC-like transcriptional activator, was found to be located at the internal region of the structural genes, which is not the case in most bacteria where the regulatory genes lie near the structural genes. In addition to this regulatory gene, we found other regulatory genes, the phlA and phlR2, downstream of the phlX. These genes were found to be overlapped and hence likely to be co-transcribed. The protein similarity analysis has revealed that the PhlA belongs to the GntR family, which are known to be negative regulators, whereas the PhlR2 shares high homology with the NtrC-type family of transcriptional activators like the PhlR. Disruption of the phlA by insertional mutation has led to the constitutive expression of the activity of phenol hydroxylase in JMP134, indicating that PhlA is a negative regulator. Possible regulatory mechanisms of phenol metabolism in R. eutropha JMP134 has been discussed.
In this study, ethanol extract of Epimedium koreanum Nakai(EEKN) enhanced melanogenesis by inducing expression of tyrosinase and tyrosinase-related protein-1 (TRP-1). But EEKN did not increase the protein expression of tyrosinase-related protein 2 (TRP-2). Moreover, EEKN enhanced tyrosinase activity and melanin contents of B16F10 cells. EEKN raised the expression of CREB phosphorylation and microphthalmia-associated transcription factor (MITF) as a key transcription factor for tyrosinase expression regulating melanogenesis. And PKC inhibitor H89 supressed that EEKN induced tyrosinase activity, melanin contents, and expression of tyrosinase, TRP-1. These results suggest that melanogenesis-promoting effect of EEKN was correlated with regulation of tyrosinase and TRP-1 protein through cAMP/PKC pathway.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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