Various analytical methods such as electron microscopy, quinone analysis, and 16S rDNA sequencing studies were used to investigate the microbial communities and to identify the microorganisms responsible for enhanced biological phosphorus removal (EBPR) in an anaerobic/aerobic sequencing batch reactor (SBR) fed with acetate. Electron photomicrographs showed that oval-shaped microorganisms of about $0.7\;{\sim}\;1\;{\mu}m$ in diameter dominated the microbial sludge. These microorganisms contained polyphosphate granules and glycogen inclusions, which suggests that they are a kind of phosphorus accumulating organism. Quinone and 16S rRNA sequence analyses showed that the members of Proteobacteria beta subclass were the most abundant species, which were affiliated with the Rhodocyclus-likes group. Phylogenetic analysis revealed that the two dominating clones of the beta subclass were most distantly related to Propionivibrio dicarboxylicus DSM 5885 and Rhodocyclus tenuis DSM 109 with about 95% and 96% sequence similarity, respectively. Therefore, it was concluded that the oval-shaped organisms related to the Rhodocyclus-likes group are likely to be responsible for biological phosphorus removal in SBR operation supplied with acetate.
This study was performed at 2 sites of Nak-Dong River to investigate the changes of nitrifiers depending on the presence and absence of organic pollutants (due to the effluents of domestic wastewater treatment plant, WWTP). Conventional chemical parameters such as T-N, $NH_4$-N, $NO_2$-N, $NO_3$-N were measured and the quantitative nitrifiers at the 2 sites were analyzed comparatively by fluorescent in situ hybridization (FISH) with NSO190 and NIT3, after checking the presence of gene amoA of ammonia oxidizing bacteria (AOB) and 16S rDNA signature sequence for Nitrobacter sp. that belongs to nitrite oxidizing bacteria (NOB). Also ${\alpha}{\cdot}{\beta}{\cdot}{\gamma}$-Proteobacteria were detected using FISH to get a glimpse of the general bacterial community structure of the sites. Based on the distribution structure of the ${\alpha}{\cdot}{\beta}{\cdot}{\gamma}$-Proteobacteria and the measurement of nitrogen in different phases, it could be said that the site 2 was more polluted with organics than site 1. Corresponding to the above conclusion, the average numbers of AOB and NOB detected by NSO160 and NIT3, respectively, at site 2 [AOB, $9.3{\times}10^5$; NOB, $1.6{\times}10^6$ (cells/ml)] was more than those at site 1 [AOB, $7.8{\times}10^5$; NOB, $0.8{\times}10^6$ (cells/ml)] and also their ratios to total counts were higher at site 2 (AOB, 27%; NOB, 34%) than those at site 1 (AOB, 18%; NOB, 23%). Thus, it could be concluded that the nitrification at site 2 was more active due to continuous loading of organics from the effluents of domestic WWTP, compared to site 1 located closed to raw drinking water supply and subsequently less polluted with organics.
Chemical and microbial characteristics of bacterial populations were investigated in a quercus and pine humus forest soil. Soil pH was $5.3\pm0.4$ and $4.1\pm0.9$ from each sample of a quercus and pine humus forest soil; C/N ratio of humus forest soil was $17.84\pm4.6%$ and $21.76\pm8%$, respectively. Total organic acid was investigated as 69.57 mM/g dry soil and 53.72 mM/g dry soil in each humus forest soil. Glutamine, pyruvate, succinate, lactic acid and acetic acid of pine humus forest soil were $1.5\sim4.5$ times higher than those of quercus humus forest soil. As we evaluated phylogenetic characteristics of bacterial populations by 16S rRNA-ARDRA analysis with DNA extracted from each humus forest soil. Based on the 16S rRNA sequences, 44 clone from ARDRA groups of quercus humus forest soil were classified into 7 phyla: ${\alpha},{\beta},{\gamma},{\delta}$-Proteobacteria, Acidobacteria, Actinobacteria, and Firmicutes. Thirty-two clone from ARDRA groups of pine humus forest soil were classified into 8 phyla: ${\alpha},{\beta},{\gamma}$-Proteobacteria, Acidobacteria, Bacteroides, Verrucomicrobia, Planctomycetes, and Gemmatomonadetes. According to PCA (Principal Component Analysis) based on 16S rRNA base sequence, there were three main groups of bacteria. All clone of Cluster I were originated from quercus humus forest soil, while 67% clone of Cluster II and 63% clone of Clusters III were separated from pine humus forest soil.
Kim Soo-Jin;Kim Min-Young;Koo Bon-Sung;Yoon San-Hong;Yeo Yun-Soo;Park In-Cheol;Kim Yoon-Ji;Lee Jong-Wha;Whang Kyung-Sook
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.4
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pp.293-299
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2005
Many isolates from soil of Korean ginseng rhizosphere did not show remarkable growth on full strength of the conventional nutrient broth (NB medium) but grew on its 100-fold dilution (DNB medium). Six hundred-forty strains were isolated as oligotrophic bacteria. In the course of screening for new bioactive compounds from oligotrophic bacteria from soil, 8 strains which had appeared to form of clear zone on a medium containing colloidal chitin as a sole carbon source were selected for further studies. Strain CR42 hydrolyzed a fluorogenic analogue of chitin, 4-methylumbelliferyl-D-glucosaminide (MUF-NAG) . Mo st of the culture supernatant of these isolates hydrolyzed 4-methylumbelliferyl-D-N,N'-diacetylchitobioside (MUF-diNAG). The isolates were heterogeneous and categorized to gamma- and beta-proteobacteria, Bacillaceae, Actinobactepia, and Bacteroides by 16S rRNA analysis. Two strains, WR164 and CR18, had a 16S rRNA sequence of $95-96\%$ identical to uncultured bacteria. It was observed that CR2 and CR75 could inhibit the growth of Colletotrichum gloeosporioides with hyphal extention-inhibition assay on PDA plate supplemented with $1\%$ colloidal chitin.
Rhodopsin is a membrane protein with seven transmembrane region which contains a retinal as its chromophore. Although there have been recently reports on various photo-biochemical features of rhodopsins by a wide range of purifying and measurement methods, there was no actual comparison related to the difference of biochemical characteristics according to their physical environment of rhodopsins. First, proteorhodopsin (PR) was found in marine proteobacteria whose function is known for pumping proton using light energy. Second one is Anabaena sensory rhodopsin (Nostoc sp.) PCC7120 (ASR) which belongs to eubacteria acts as sensory regulator since it is co-expressed with transducer 14 kDa in an operon. In this study, we applied two types of rhodopsins (PR and ASR) to various environmental conditions such as in Escherichia coli membranes, membrane in acrylamide gel, in DDM (n-dodecyl-${\beta}$-D-maltopyranoside), OG (octyl-${\beta}$-D-glucopyranoside), and reconstituted with DOPC (1,2-didecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine). According to the light-induced difference spectroscopy, rhodopsins in 0.02% DDM clearly showed photointermediates like M, and O states which respond to the different wavelengths, respectively and showed the best signal/noise ratio. The laser-induced difference spectra showed the fast formation and decay rate of photointermediates in the DDM solubilized samples than gel encapsulated rhodopsin. Each of rhodopsins seemed to be adapted to its surrounding environment.
Kim, Mee-Kyung;Hong, Jun-Hyeok;Kim, Youn-Kwon;Ahn, Tae-Seok;Shin, Eung-Bai
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.28
no.3
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pp.240-248
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2006
In this study, a retrofitting BNR process that was modified for the economical applicability was proposed and evaluated in the pilot plant($50m^3/d$). At the same time the bacterial community structure was investigated in the pilot plant by using FISH(fluorescent in situ hybridization) method. Economically 16% of the initial construction cost for the proposed process(introduction of a biological nutrient removal process of $60,000m^3/d$ scale basis) was reduced due to the absence of a bioreactor. Water treatment efficiencies and maintenance facilities of the modified process were satisfied with the strengthened discharge permits in Korea throughout a long term pilot plant operating including a winter season. Bacterial populations in the pilot plant and in the control plant(A2/O process, B SIP(Sewage Treatment Plant)) were remained uniformly during the test period, but bacterial structure in the bioreactor was changed drastically. Proportions of ${\beta}$-proteobacteria group including soil bacteria which play a important role in wastewater treatment increased $25{\sim}607%$ in population.
Kim Myung Kyum;Im Wan Taek;Ohta Hiroyuki;Lee Myung Jin;Lee Sung Taik
Journal of Microbiology
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v.43
no.2
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pp.152-157
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2005
Strain Kw07$^T$, a Gram-negative, non-spore-forming, rod-shaped bacterium, was isolated from granules in an Up-flow Anaerobic Sludge Blanket (UASB) bioreactor used in the treatment of brewery wastewater. 16S rRNA gene sequence analysis revealed that strain Kw07T belongs to the a-4 subclass of the Proteobacteria, and the highest degree of sequence similarity was determined to be to Sphingopyxis macrogoltabida IFO 15033T (97.8%). Chemotaxonomic data revealed that strain Kw07T possesses a quinone system with the predominant compound Q-I0, the predominant fatty acid C,s:, OJ7c, and sphingolipids, aU of which corroborated our assignment ofthe strain to the Sphingopyxis genus. The results of DNA-DNA hybridization and physiological and biochemical tests clearly demonstrated that strain Kw07T represents a distinct species. Based on these data, Kw07T (= KCTC 12209T = NBRC 100800T) should be classified as the type strain for a novel Sphingopyxis species, for which the name Sphingopyxis granuli sp. novo has been proposed.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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2000.04a
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pp.150-156
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2000
Oligotrophic bacteria isolated from forest soil showed a specific community consisting of various taxonomic groups compared with those in other soil or aquatic habitats. Based on the cell shape, the isolates were divided into four groups: regular rod, curved/spiral rod, irregular rod, and prosthecate bacteria. The cellular fatty acids 60 oligotrophic isolates were analyzed. The 30 fatty acids which were identified or characterized are classified. At the dendrogram based on cellular fatty acid composition, four clusters(I-IV) were separated at a euclidian distance of about 50. Cluster 3 and 4-a strains were containing Q-8, these strains are accommodated in the Proteobacteria gamma and beta subdivision. The chemotaxonomic profiles of the cluster 4-a strains showed good agreement with those of the genus Burkholderia. Cluster 3 was characterized by the presence of branched-chain fatty acids, iso-C15:0, iso-C17:1, and iso-C17:0 as the major components. These chemotaxonomy suggested the close relationship of the isolates with Xathomonas/Sterotrophomonas group. Based on the 16S rDNA sequence analysis, the two representative strains(MH256 and MA828) of cluster 3 showed the close relation to genera, Xathomonas/Sterotrophomonas, but were not included in these genera. These strains were even further away from core Xanthomonas, and clearly were seen to branch outside the cluster formed by the Sterotrophomonas maltophilia. MH256 and MA828 16S rDNA sequence was different enough to put new genus on a separate branch. The isolates with Q-10 were also studied. They are corresponded to the two large groups in Proteobacteria alpha subdivision. One was incorporated in the genus Bradyrhizobium cluster, which also includes Agromonas, a genus for oligotrophic bacteria. The strains of the other group showed high similarity to the genus Agrobacterium.
Injung An;Byeori Kim;Sungbae Joo;Kihyun Kim;Taek-Woo Lee
Journal of Ecology and Environment
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v.48
no.2
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pp.120-127
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2024
Bats serve as vectors and natural reservoir hosts for various infectious viruses, bacteria, and fungi. These pathogens have also been detected in bat feces and can cause severe illnesses in hosts, other animals, and humans. Because pathogens can easily spread into the environment through bat feces, determining the bacterial communities in bat guano is crucial to mitigate potential disease transmission and outbreaks. This study primarily aimed to examine bacterial communities in the feces of insectivorous bats living in South Korea. Fecal samples were collected after capturing 84 individuals of four different bat species in two regions of South Korea, and the bacterial microbiota was assessed through next generation sequencing of the 16S rRNA gene. The results revealed that, with respect to the relative abundance at the phylum level, Myotis bombinus was dominated by Firmicutes (47.24%) and Proteobacteria (42.66%) whereas Miniopterus fuliginosus (82.78%), Rhinolophus ferrumequinum (63.46%), and Myotis macrodactylus (78.04%) were dominated by Proteobacteria. Alpha diversity analysis showed no difference in abundance between species and a significant difference (p < 0.05) between M. bombinus and M. fuliginosus. Beta-diversity analysis revealed that Clostridium, Asaia, and Enterobacteriaceae_g were clustered as major factors at the genus level using principal component analysis. Additionally, linear discriminant analysis effect size was conducted based on relative expression information to select bacterial markers for each bat species. Clostridium was relatively abundant in M. bombinus, whereas Mycoplasma_g10 was relatively abundant in R. ferrumequinum. Our results provide an overview of bat guano microbiota diversity and the significance of pathogenic taxa for humans and the environment, highlighting a better understanding of preventing emerging diseases. We anticipate that this research will yield bioinformatic data to advance our knowledge of overall microbial genetic diversity and clustering characteristics in insectivorous bat feces in South Korea.
Anaerobic ammonium oxidation with nitrite to $N_2$(anammox) is a recently discovered microbial reaction with interesting potential for nitrogen removal from wastewater. Here we investigated the microbial community structure in the sequencing batch reactor(SBR) with an anammox activity. The SBR was optimized for the enrichment of a very slowly growing microbial community and showed that possibility of anaerobic ammonium oxidation. Fluorescence in situ hybridization(FISH) analysis revealed that anaerobic ammonium oxidizers were Candidatus Brocadia anammoxidans and Candidatus Kuenenia stuttgartiensis. Furthermore, Nitrosomol1as spp. of the ${\beta}$ -subclass of Proteobacteria was also present within the anaerobic SBR microorganisms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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