Melittin (ME) from honeybee venom has a broad range of strong antimicrobial activity, but it has hemolytic activity against eukaryotic cells. In order to design peptides with powerful antifungal activity without cytotoxic property of ME and understand structure-antifungal activity relationships, the hybrid peptides derived from the sequences of ME and cecropin A (CA) or magainin 2 (MA), MA(10-17)ME(1-12) and CA(1-8)ME(1-12). were synthesized by solid phase method. MA(10-17)ME(1-12) showed potent antifungal activity comparable to ME against Fusarium oxysporum with no hemolytic activity against human red blood cells. The hybrid peptides showed strong inhibi- tion of (1, 3)-$\beta$-D-glucan synthase. This result indicates that the antifungal activity of the hybrid peptides against Fusarium oxysporum is attributed to the inhibition of cell wall synthesis. The results therefore showed a successful design of a peptide having antifungal activity without hemolytic property.
This study was conducted to investigate the characteristics of polysaccharides isolated from the fruit body and cultured mycelia of Phellinus linteus IY001. All fractions were extracted by hot water, followed by ethanol precipitation (F-THE and M-HE) or ultrafiltration (M-HU) (F-TH, F-THE; fruit body, M-HE, M-HU; cultured mycelia). Among these fractions, F-TH fraction was obtained at the highest yields of 6.83% and yield of F-THE was at the level 2.79%. The carbohydrates of these fractions was found to be a heteroglucan composed of glucose, galactose, mannose, fructose, ribose and xylose by analysis of gas chromatography. The total carbohydrate contents of M-HE and M-HU fractions were 99.2%, and 86.0% respectively. The glucose content of M-HE, M-HU and F-THE ranged from 54 to 84.8% of the total monosaccharide. Amino acid pattern showed that all fractions contained a large amount of aspartic acid, glycine, glutamic acid, alanine. Serine and threonine were found to be involved in the linkage, O-linked type. These fractions, except F. TH, contained polysaccharides with the molecular weights of 12 kD and showed the characteristics of IR absorption for ${\beta}-glucosides$ at $890\;cm^{-1}$.
A fraction (CMEx-AH-${\beta}$) of water-soluble polysaccharides, showing selective antitumor activities, was isolated from the mycelia of solid cultured Agaricus blazei Murill by hot-water extraction, ethanol precipitation, and series of chromatography. Chemical characteristics of CMEx-AH-${\beta}$, were as follows: carbohydrate content, 48%; monosaccharide composition, Man:Glu:Gal (2:93:5); molecular weight, $2{\times}10^5$; uronic acid content, 6.2%. Fundamental structure of CMEx-AH-${\beta}$, was deduced as ${\beta}-(1\;{\rightarrow}\;6)$-D-glucan with ${\beta}-(1\;{\rightarrow}\;3)$-D-glucosidic side chains based on results of methylation and $^{13}C$ NMR spectroscopic analyses.
Fraction (PMEx-AH-${\beta}$) of water-soluble polysaccharide, showing stimulating activity against macrophages, was isolated from mycelia of solid cultured Phellinus linteus by hot-water extraction, ethanol precipitation, and chromatography. Chemical characteristics of PMEx-AH-${\beta}$ were as follows: carbohydrate content, 71%; monosaccharide composition, Man:Glu:Gal (9:64:27); molecular weight, $1-7{\times}10^4$; uronic acid content, 6.8%. Fundamental structure of PMEx-AH-${\beta}$ is deduced as ${\beta}$-($1{$\rightarrow}6$)-D-glucan with ${\beta}$-($1{\rightarow}3$)-D-glucosidic side chains based on methylation analysis.
Atrophic rhinitis (AR) is the one of important respiratory diseases and causes severe economic losses in pig industry. Severe attempts have been made to reduce the economic losses by preventing the disease. One of the methods is the spraying of antibiotics into nasal cavity of piglets. Recently, the efficacy of the spraying with kanamycin and gentamicin was reduced in the Korean swine industry. Therefore, the preventive methods have been required to be changed based on the antimicrobial susceptibility profiles of causative agents of swine AR. Based on the current situations of this disease, Bordetella (B.) bronchiseptica and Pasteurella (P.) multocida 4D were isolated from pigs with clinical signs of AR. The isolation rates of B. bronchiseptica and P. multocida 4D were 58.5% and 32.9%, respectively. In the antimicrobial susceptibility test, the bacteria were resistant to kanamycin and gentamicin which have been used as the spraying agents, but they were susceptible to amikacin. A new spraying agent was developed using amikacin using ${\beta}$-glucan and yakbaltag as supplementary agents. Field efficacy of the agent was carried out with different schedule. The results from this study suggested that the newly developed spraying agents might be helpful to prevent AR in swine.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.32
no.1
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pp.143-148
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2003
Antitumorigenic and antimutagenic activities of the doenjangs prepared from mushroom mycelia-cultured traditional mejus (designated to MTDJ) were investigated using the model of Sarcoma-180-induced mouse ascites cancer, and 2-amino-3-methylimidazo [4,5-f] quinoline (IQ) and aflatoxin B$_1$ (AFB$_1$) -mediated S. typhimurium mutagenicity, respectively. Antioxidative activity of MTDJ was also investigated using the mouse liver microsome system. Mushroom stains used for the preparation of the mushroom mycelia-cultured traditional mejus were Synryeong (Agaricus blazei), Yeonggi (Canoderma Iucidum), Sanghwang (Phellinus linteus), and Neutari (Pleurotus ostreatus). All MTDJS showed the enhanced antitumorigenicities (12% by Synryeong, 13% by Sanghwang, 16% by Yeonggi, and 19% by Neutari), antimutagenicity (6.1~20.8% for IQ and 3.1~10.2% for AFB$_1$), and antioxidative activity (6.6~46.5%), relative to the control doenjang. The $\beta$-D-glucan content (0.75~1.71 mg/g) of MTDJs was 3~8 times higher than that (0.22 mg/g) of the control doenjang. Genistein content (769~932 Ug/g) of MTDJS was also higher than that (728 Ug/g) of control doenjang The content of $\beta$-D-glucan and genistein was not exactly correlated to the antitumorigenicity and antimutagenicity of MTDJs. These results indicate that anti-tumorigenicity and antimutagenicity of MTDJS were elevated in comparison with the control doenjang, and the observed functions were, in part, derived from $\beta$-glucan and/or genistein in the MTDJS.
Yang, Peilong;Shi, Pengjun;Wang, Yaru;Bai, Yingguo;Meng, Kun;Luo, Huiying;Yuan, Tiezheng;Yao, Bin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.1
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pp.58-66
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2007
Isolation, expression, and characterization of a novel $endo-{\beta}-1,3(4)-D-glucanase$ with high specific activity and homology to Bacillus lichenases is described. One clone was screened from a genomic library of Paenibacillus sp. F-40, using lichenan-containing plates. The nucleotide sequence of the clone contains an ORF consisting of 717 nucleotides, encoding a ${\beta}-glucanase$ protein of 238 amino acids and 26 residues of a putative signal peptide at its N-terminus. The amino acid sequence showed the highest similarity of 87% to other ${\beta}-1,3-1,4-glucanases$ of Bacillus. The gene fragment Bg1 containing the mature glucanase protein was expressed in Pichia pastoris at high expression level in a 3-1 high-cell-density fermenter. The purified recombinant enzyme Bg1 showed activity against barley ${\beta}-glucan$, lichenan, and laminarin. The gene encodes an $endo-{\beta}-1,3(4)-D-glucanase$ (E. C. 3.2.1.6). When lichenan was used as substrate, the optimal pH was 6.5, and the optimal temperature was $60^{\circ}C$. The $K_m,\;V_{max},\;and\;k_{cat}$ values for lichenan are 2.96mg/ml, $6,951{\mu}mol/min{\cdot}mg,\;and\;3,131s^{-1}$, respectively. For barley ${\beta}-glucan$ the values are 3.73mg/ml, $8,939{\mu}mol/min{\cdot}mg,\;and\;4,026s^{-1}$, respectively. The recombinant Bg1 had resistance to pepsin and trypsin. Other features of recombinant Bg1 including temperature and pH stability, and sensitivity to some metal ions and chemical reagents were also characterized.
Ganoderan, antitumor ${\beta}-glucan$ from Ganoderma lucidum was extracted from the mycelium of G.lucidum IY009 which was cultured in various carbon sources. The mycelium was shown to be capable of utilizing various carbon sources, e.g., soluble starch, fructose and glucose, and differs in morphology on carbon sources. In radioisotope assay, about $5.2{\sim}16%$ of glucose was to be incorporated in ganoderan of the mycelium. The monosugars of these ganoderan were mainly consisted of glucose, mannose, galactose. The galactose was not good carbon source for growing the mycelium but the best carbon source for producing the potentialized-ganoderan on the antitumor and anticomplementary activity. The tumor inhibition ratio of ganoderan-GAL, obtained from galactose medium, was 83.6% at the dose of 20 mg/kg/day. This crude polysaccaride was composed of five monosaccharide and the protein contained 16 amino acids. Also, ganoderan-GAL increased the anticomplementary activity than that obtained from any other media. This fact suggests that the structural differences of ganoderan influence the antitumor and anticomplementary activity.
Kim, Haeng-Ran;Hong, Jin-Sun;Kim, Tae-Young;Kim, Sang-Bum;Cho, Soo-Muk;Chun, Hye-Kyung
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.37
no.6
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pp.928-932
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2005
Effects of sangwhang mushroom (Phellinus linteus) extract on quality and functionality of ramyon (deep-fried noodle) were investigated by adding 17.5(v/w; II) and 35%(v/w; III) sangwhang mushroom extracts. Although little differences were generally observed in chemical compositions of ramyon samples II, III, and control, potassium contents of samples II and III were lower than control. Content of $(1{\rightarrow}3),\;(1{\rightarrow}4)\;and\;(1{\rightarrow}6)-{\beta}-D-glucan$, major functional component of sangwhang mushroom, increased in proportion to amount of extract added, 2.04 and $3.69{\mu}g/g$ in samples II and III, respectively, much higher than $0,09{\mu}g/g$ of control. Lightness (L) decreased, whereas redness (a) and yellowness (b) increased with increasing amount of extract added. Ramyons containing extract showed higher preference than control in texture analysis (hardness and tension) and sensory evaluation (taste and texture).
Ganoderan, an immunomodulating ${\beta}-glucan$ of G. lucidum, induces potent antitumor immunity in tumor-bearing mice. The present study was set up to elucidate the chemical composition and bioactivities of ganoderan obtained from the mycelial fractionation of G. lucidum IY009. Ganoderan was isolated and purified from its extracellular, cell wall and cytoplasmic sources. These ganoderans were composed mainly of glucose. The cell wall-alkali soluble-water soluble fraction (CW-AS-WS) showed the highest antitumor activity (inhibition rate of 94%) in sarcoma-bearing mice and 37% of anticomplementary activity. The CW-AS-WS fraction was found to be approximately average 20,000 dalton in aq. 0.3N NaOH solution and composed of 88% carbohydrate and 4% protein. The carbohydrate of the CW-AS-WS was composed of 74% glucose. These results indicate that the ganoderans extracted from the mycelial fractionations of G. lucidum IY009 had different chemical characteristics and showed different potentiality in antitumor and anticomplementary activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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