This study was carried out to determine the genetic relationships among seven west African goat breeds : Casamance Goat (Kolda, Senegal), Labe Goat (Fouta Djallon, Guinea), three Sahel Goat (Djoloff, Senegal ; Maradi, Niger; Gorgol, Mauritania) red Sokoto Goat (Maradi, Niger) and Guera goat (Atar, Mauritania).The polymorphism of six microsatellites and the ${\alpha}_{s1}$-casein locus was analysed. The six microsatellite loci were polymorphic with a mean number of alleles ranging from 2.71 to 4.0. At the ${\alpha}_{s1}$-casein locus, A and B were the most frequent alleles, which are known to be associated with a high level of protein synthesis. A neighbour-joining tree and a Principal Component Analysis were performed and the reliability of both methods was tested. Our study shows that the genetic relationships among the breeds analysed correspond to their geographical distribution and in addition, that the Labe Goat is strongly separated from the other breeds. Among the seven markers used, four have an effect on the distribution of breeds while three seem to be non-informative.
Protein conjugation of curdlan belonging to $\beta$-1, 3-glucan was carried out to improve it surface functionalities. The glucan was mixed with phosvitin, {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein, lysozyme or ovalbumin, respectively. The mixture was freeze-dried, and he resulting powder was incubated at 6$0^{\circ}C$ and 79% relative humidity for 12 days in order to generate a controlled Maillard reaction between curdlan and proteins. conjugation with unfolding proteins, i.e., phosvitin and {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein, drastically increased the solubility of the glucan, whereas lysozyme and ovalbmin did not. The solubility in water of curdlan was 3.44% for the phosvitin conjugate and 1.09% for the {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein conjugate. SDS-slab polyacrylamide gel electrophoresis showed that curdlan was solubilized due to covalent binding with phosvitin. Emulsifying properties of curdlan were substantially improved by the conjugation with phosvitin and {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein. Emulsion stability of the curdlan-phosvitin conjugate was about 2.9 times greater than that of the curdlan-phosvitin mixture.
Islam, Mohammad Ashiqul;Ekeberg, Dag;Rukke, Elling-Olav;Vegarud, Gerd Elisabeth
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제28권4호
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pp.559-567
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2015
Ex vivo digestion of proteins and fat in Red Chittagong Cattle milk from Bangladesh was carried out using human gastrointestinal enzymes. This was done to investigate the protein digestion in this bovine breed's milk with an especial focus on the degradation of the allergenic milk proteins; ${\alpha}_{s1}$-casein and ${\beta}$-lactoglobulin and also to record the generation of peptides. Lipolysis of the milk fat and release of fatty acids were also under consideration. After 40 min of gastric digestion, all the ${\alpha}_s$-caseins were digested completely while ${\beta}$-lactoglobulin remained intact. During 120 min of duodenal digestion ${\beta}$-lactoglobulin was reduced, however, still some intact ${\beta}$-lactoglobulin was observed. The highest number of peptides was identified from ${\beta}$-casein and almost all the peptides from ${\kappa}$-casein and ${\beta}$-lactoglobulin were identified from the gastric and duodenal samples, respectively. No lipolysis was observed in the gastric phase of digestion. After 120 min of duodenal digestion, milk fat showed 48% lipolysis. Medium (C10:0 to C16:0) and long (${\geq}C17:0$) chain fatty acids showed 6% to 19% less lipolysis than the short (C6:0 to C8:0) chain fatty acids. Among the unsaturated fatty acids $C18:1{\sum}others$ showed highest lipolysis (81%) which was more than three times of $C18:2{\sum}all$ and all other unsaturated fatty acids showed lipolysis ranging from 32% to 38%. The overall digestion of Bangladeshi Red Cattle milk was more or less similar to the digestion of Nordic bovine milk (Norwegian Red Cattle).
The aim of this study was to examine the correlation between bovine casein (CN) mRNA expression levels in mammary epithelial cells and lactation period, the yields of milk proteins and other parameters. The cells were collected from each cow's milk, which contained somatic cell counts (SCC) of less than 100,000 cells/ml. The levels of ${\alpha}s1-$, ${\alpha}s2-$, ${\beta}$- and ${\kappa}$-CN mRNA expression were significantly correlated with each other in mammary epithelial cells (p<0.01). All cows produced either less than 30 kg/day/cow or a over 30 kg/day/cow level of milk yield (MY). It was shown that the CN mRNA expression levels decreased gradually from the calving period to late lactation, when MY was over 30 kg/day/cow. The SCC tended to increase gradually during the course of lactation, but it was negatively correlated with milk protein and CN yields (p<0.01) when MY was less than 30 kg/day/cow. Moreover, there was a tendency for a negative correlation between SCC and ${\alpha}s1$-CN and ${\beta}$-CN mRNA expression level, when MY was less than 30 kg/day/cow (p<0.05).
본(本) 연구(硏究)는 유단백질(乳蛋白質)의 유전적표식(遺傳的標識)(genetic marker)를 유우(乳牛)의 유전적(遺傳的) 개량(改良)을 위한 유우등록 및 선발(選拔) 자료로 활용하고자 1992년 국립 종축원에서 사육증인 Holstein종 159두에서 각각 유즙 시료를 채취하여 Polyacrylarnide gel(PAGE)에 의한 전기영동방법에 의하여 ${\alpha}S1$-casein(${\alpha}S1$-CN) 및 ${\beta}$-casein(${\beta}$-CN), ${\kappa}$-casein(${\kappa}$-CN) 및 ${\beta}$-lactoglobulin(${\beta}$-LG)의 유전적(遺傳的) 다형(多型)을 분석(分析)하여 유전적(遺傳的) 변이체의 표현형(表現型), 유전자형(遺傳子型) 및 유전자빈도(遺傳子頻度)를 추정하고 이들 단백질의 유전적(遺傳的) 다형(genetic polyrnorphisms)과 유조성분과의 연관성을 분석(分析) 검토(檢討)하였다. 유단백질(乳蛋白質)인 ${\alpha}S1$-CN, ${\beta}$-CN, ${\kappa}$-CN 및 ${\beta}$-LG 유전좌위(遺傳座位)의 유전적(遺傳的) 변이체의 표현형(表現型) 분포의 관찰치와 기대치간에 유의적(有意的)인 차이가 인정 되지않아 이들 유전자(遺傳子)들이 유전적(遺傳的) 평형을 이루고 있는 것으로 사료되었다. 유단백질(乳蛋白質) 좌위(座位)의 유전자형(遺傳子型)을 분석(分析)한 결과(結果) ${\alpha}S1$-CN BB유전자형(遺傳子型), ${\beta}$-CN AA유전자형(遺傳子型), ${\kappa}$-CN AA유전자형(遺傳子型) 및 ${\beta}$-LG AB 유전자형(遺傳子型)의 출현빈도(出現頻度)가 각각 79.87%, 84.28%, 71.70% 및 49.10%로 높게 나타났다. 유단백질(乳蛋白質)의 유전자빈도(遺傳子頻度)에 있어서는 ${\alpha}S1-CN^B$와 ${\alpha}S1-CN^C$가 각각 0.899 및 0.101이었고, ${\beta}-CN^A$ 및 ${\beta}-CN^B$은 각각 0.921 및 0.079이었으며, ${\kappa}-CN^A$ 및 ${\kappa}-CN^B$은 각각 0.837 및 0.163이었고, ${\beta}-LG^A$ 및 ${\beta}-LG^B$은 각각 0.378 및 0.622이었다. 분산분석(分散分析) 결과(結果) 유단백질(乳蛋白質)의 유전자형(遺傳子型)들은 유조성분인 유지율, 단백질 함량 및 총 고형분 함량에서 유의적(有意的)인 연관성이 인정되었다. 유조성분 함량에 있어서는 ${\kappa}$-CN좌위(座位)의 BB유전자형(遺傳子型)은 유지율 및 유단백질(乳蛋白質) 함량에서 ${\kappa}$-CN좌위(座位)의 AA 및 AB 유전자형(遺傳子型)보다 유의적(有意的)으로 높게 나타났으며, ${\beta}$-LG좌위(座位)의 AA유전자형(遺傳子型)은 유지율에서 ${\beta}$-LG좌위(座位)의 AB 및 BB 유전자형(遺傳子型)보다 유의적(有意的)으로 높게 추정되었다. 이상의 연구결과(硏究結果)를 종합하여 볼때 유조 성분인 유지율 및 단백질함량을 높히기 위하여서는 ${\kappa}$-CN좌위(座位)의 BB 유전자형(遺傳子型)과 ${\beta}$-LG좌위(座位)의 AA 유전자형(遺傳子型)을 선발(選拔)하는것이 보다 유리할 것으로 생각되었다.
Transgluaminase반응을 이용하여 ATP analog들$(C^8-ATP와 N^6-ATP)$을 casein에 고정화하였다. 고정화 ATP는 hexokinase에 의해 탈인산화되어 약55%가 ATP형으로 전환되었으며, 이는 acetate kinase에 의해 역으로 인산화되어 약80%가 ATP형으로 전환 되었다. $\beta$-Casein은 $$\alpha$_s_1-casein$에 비하여 glutamine 잔기의 수가 많으며,$N^6-ATP$의 경우 이의 alkyl carbamyl기와 casein의 carboxamide기 간의 정전기적 반발에 원인이 있는 것으로 보인다. ATP는 고정화하므로써 안정성이 증대되었으며, 고정화 ATP의 km치는 유리상의 ATP및 ATP analog의 그것과 비슷하였으나, 최대속도는 감소되었다. 고정하 ATP는 반응액에서 calcium의 첨가로 쉽게 침전되어 용액으로부터 거의 완전히 회수 되므로써, 반응액으로부터의 회수분리가 가능한 이점을 가졌다.
The aim of the present study was to get a total physical and chemical characterization and comparison of the principal components in Bangladeshi buffalo (B), Holstein cross (HX), Indigenous cattle (IC) and Red Chittagong Cattle (RCC) milk. Protein and casein (CN) composition and type, casein micellar size (CMS), naturally occurring peptides, free amino acids, fat, milk fat globule size (MFGS), fatty acid composition, carbohydrates, total and individual minerals were analyzed. These components are related to technological and nutritional properties of milk. Consequently, they are important for the dairy industry and in the animal feeding and breeding strategies. Considerable variation in most of the principal components of milk were observed among the animals. The milk of RCC and IC contained higher protein, CN, ${\beta}$-CN, whey protein, lactose, total mineral and P. They were more or less similar in most of the all other components. The B milk was found higher in CN number, in the content of ${\alpha}_{s2}-$, ${\kappa}$-CN and ${\beta}$-lactalbumin, free amino acids, unsaturated fatty acids, Ca and Ca:P. The B milk was also lower in ${\beta}$-lactoglobulin content and had the largest CMS and MFGS. Proportion of CN to whey protein was lower in HX milk and this milk was found higher in ${\beta}$-lactoglobulin and naturally occuring peptides. Considering the results obtained including the ratio of ${\alpha}_{s1}-$, ${\alpha}_{s2}-$, ${\beta}$- and ${\kappa}$-CN, B and RCC milk showed best data both from nutritional and technological aspects.
형질 전환동물의 유선을 이용한 단백질의 생산이 보편화되고 있지만 원하는 단백질이 만들어지기 까지 많은 시간과 노력이 필요하며 기술적인 어려움이 항시 따른다. 그래서 보다 쉽게 재조합된 유전자의 발현 정도를 시험하는 in vitro에서의 시험방법의 개발은 중요한 의미가 있다고 하겠다. 따라서 본 연구에서는 인간의 유방암을 가진 환자의 유선에서 유래된 MCF7 cell line을 이용하여 유선 특징의 유전자 발현을 위한 세포 배양 모델을 개발하고자 하였다. 우선 소의 카제인의 cDNA를 MMTV-LTR의 통제하에 clone하였으며, 이것을 CaPO4의 침전법으로 MCF7 cell에 transfection 시킨 다음, HAT 배양액으로 선발하였으며, dexamethasone으로 유도시키고, 발현되는 정도를 면역 항체를 이용하여 분석하였다. 선발된 세포는 dexamethasone에 의하여 MMTV promoter가 유도되는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 MCF7 cell과 같이 다양한 steroid receptor를 가지고 있는 세포는 유선 특정의 유전자 발현을 위한 세포 배양 모델에 유용하게 사용이 될 수 있을 것이다.
가공식품중의 우유단백질 분석을 위하여 효소면역측정법, ELISA를 개발하였다. 특이 항체를 생산하기 위해 열에 안정하고 우유의 주요한 단백질인 ${\alpha}_{s1}-CN$을 토끼에 면역하였다. 항${\alpha}_{s1}-CN$ 항체를 이용하여 간접경합 ELISA를 실시한 결과 검출한계는 $0.1\;{\mu}g/mL$ 이었고 ${\alpha}_{s1}-CN$, skim milk, ${\beta}-CN$과 whey protein isolate에 대한 특이항체의 반응성은 각각 100%, 37%, 0.14%과 0.04% 이었다. 그러나 다른 우유단백질인, ${\beta}-lactoglobulin,\;{\alpha}-lactalbumin$, bovine serum albumin 과 대두단백질인 isolated soy protein 에 대해서는 거의 반응성을 보이지 않았다. 샌드위치 ELISA 결과는 검출한계가 $0.01\;{\mu}g/mL$로 간접경합 ELISA 에 비하여 10배 정도 민감해져 따라서 이를 시료 분석에 이용하였다. 시유에 1-10%의 whole CN을 첨가한 spike test 결과 whole CN의 평균 회수율이 94.8%(CV, 8.2%)으로 나타났다. 식품재료와 유가공 제품에 대한 whole CN의 정량분석을 실시한 결과 탈지유는 29%, WPI는 0.03%, 농후 요구르트는 0.25%였으며 가공치즈는 6.9%로 나타났다.
부들 화분(포항(蒲黃))의 혈전 용해능을 검토하기 위하여 부들 화분을 물 추출하여 혈전 분해능이 있음을 확인하였다. 부들 화분의 혈전용해효소를 DEAE-cellulose, Sephadex G-150을 이용한 gel filteration, HPLC로 정제하여 acrylamide gel electrophoresi로 정제를 하였다. 정제효소는 HPLC와 전기영동에 의하여 순수하게 정제되었음을 확인하였고 비활성은 38U/mg로서 정제도는 86.4배이었고 분자량은 75kDa이었다. 정제효소의 최적 pH는 4.0이었고 pH 4.0-6.0에서 안정하였으며 정제효소의 최적온도는 $55^{\circ}C$이었고 $30-60^{\circ}C$에서는 안정하였으나 $70^{\circ}C$ 부터 활성이 현저히 저하하여 $80^{\circ}C$ 이상에서는 완전히 실활하였다. 기질특이성은 fibrin을 가장 잘 분해하였고 fibrin, whole casein, ${\kappa}$-casein, ${\alpha}$-casein, ${\beta}$-casein, BSA순으로 나타났다. Casein을 기질로 하였을 때 Km value는 0.44 mM 이었으며 casein에 대한 친화력이 높은 것으로 나타났다. 효소활성에 미치는 금속이온의 영향은 $K^+$, $Na^+$, $Mg^{2+}$ 등은 효소반응에 영향을 미치지 않았으나 $Zn^{2+}$, $Fe^{2+}$는 심하게 저해작용을 나타내었고 정제효소는 PMSF, iodoacetic acid 및 SDS에 의하여 심하게 저해되는 것으로 보아 serine protease로 추정되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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