• Reproductive and Developmental Biology
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• 제39권3호
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• pp.59-67
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• 2015

동물의 장기를 인간에게 이식하게 되면 초급성거부반응(Hyperacute rejection, HAR)이 일어난다. 초급성거부반응은 면역계의 구성요소 중 보체(complement)에 의해 일어나는 거부반응으로 돼지의 혈관세포 표면에 있는 $Gal{\alpha}$(1,3)Gal 당분자에 인간의 항체가 즉각 반응하기 때문에 일어나며, ${\alpha}1,3$-galactosyltransferase(${\alpha}1,3$-GT) 유전자는 돼지 혈관세포 표면의 $Gal{\alpha}$(1,3)Gal 당분자 생성에 관여한다. 따라서 인간에게 돼지의 장기를 이식하기 위해서는 ${\alpha}1,3$-galactosyltransferase 유전자를 제거하는 것이 필요한 것으로 알려져 있다. 본 연구실의 이전 연구에서, 시카고 미니돼지 귀체세포에서 상동 재조합(Homologous recombination)을 통해 ${\alpha}1,3$-galactosyltransferase 유전자가 제거된 체세포를 개발한 바 있으며, 이 체세포를 통하여 ${\alpha}1,3$-GT 유전자가 제거된 돼지도 생산된 바 있다. 본 연구에서는, human serum 처리 시 돼지 세포를 보호해 준다고 보고되고 있는 human complement regulator인 human Decay-accelerating factor(hDAF)와 human ${\alpha}1,2$-fucosyltransferase(hHT)유전자를 ${\alpha}1,3$-GT 유전자 위치에 gene targeting하여 동시에 hDAF와 hHT가 발현하는 체세포를 개발하였다. Knock-in vector는 hDAF와 hHT 두 유전자가 발현할 수 있도록 IRES로 연결하였으며, ${\alpha}1,3$-GT 유전자의 start codon을 이용하여 발현할 수 있도록 구축하였다. 구축한 vector는 electroporation을 통해 미니 돼지 체세포에 도입하였으며, PCR 결과, ${\alpha}1,3$-GT 유전자 위치에서 상동 재조합이 일어났음을 확인하였다. Positive-negative 선별 방법을 통해 얻은 gene targeting 된 체세포는 RT-PCR에 의해 hDAF와 hHT 유전자의 발현이 확인되었으며, 대조군(NIH minipig)에 비해 ${\alpha}1,3$-GT 유전자의 발현이 감소하였다. 또한 이들 세포에 100% human complement serum을 처리하였을 때 knock-in 세포가 대조군에 비해 30% 정도 더 높은 생존율을 보였다. 따라서 개발된 체세포는 이종간 장기이식을 위한 돼지 생산과 함께 이를 이용한 이종간의 장기 이식 시 초급성 거부반응을 억제하는 데 사용될 수 있을 것으로 생각된다.

• BMB Reports
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• 제39권4호
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• pp.383-393
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• 2006

Little is known concerning the mechanisms responsible for the transplacental transfer of thiamine. So, the aim of this work was to characterize the placental uptake of thiamine from the maternal circulation, by determining the characteristics of $^3H$-thiamine uptake by a human trophoblast cell line (BeWo). Uptake of $^3H$-thiamine (50-100 nM) by BeWo cells was: 1) temperature-dependent and energy-independent; 2) pH-dependent (uptake increased as the extracellular medium pH decreased); 3) $Na^+$-dependent and $Cl^-$-independent; 4) not inhibited by the thiamine structural analogs amprolium, oxythiamine and thiamine pyrophosphate; 5) inhibited by the unrelated organic cations guanidine, N-methylnicotinamide, tetraethylammonium, clonidine and cimetidine; 6) inhibited by the organic cation serotonin, and by two selective inhibitors of the serotonin plasmalemmal transporter (hSERT), fluoxetine and desipramine. We conclude that $^3H$-thiamine uptake by BeWo cells seems to occur through a process distinct from thiamine transporter-1 (hThTr-1) and thiamine transporter-2 (hThTr-2). Rather, it seems to involve hSERT. Moreover, chronic (48 h) exposure of cells to caffeine ($1\;{\mu}M$) stimulated and chronic exposure to xanthohumol and iso-xanthohumol (1 and $0.1\;{\mu}M$, respectively) inhibited $^3H$-thiamine uptake, these effects being not mediated through modulation of the expression levels of either hThTr-1 or hSERT mRNA.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제20권10호
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• pp.1517-1524
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• 2007

The [$^2H_5$]phenylalanine model was compared with the [1-$^{13}C$]leucine method to determine whole body protein synthesis (WBPS) and degradation (WBPD) in sheep fed at two levels. The animals were fed either 103 (M-diet) or 151 (H-diet) kcal $ME/kg^{0.75}/day$ once daily in a crossover design for 21 days each. The isotope dilutions were simultaneously conducted as a primed-continuous infusion of [$^2H_5$]phenylalanine, [$^2H_2$]tyrosine and [1-$^{13}C$]leucine on each dietary treatment. The WBPS and WBPD calculated from the [$^2H_5$]phenylalanine model were lower (p = 0.009 and p = 0.003, respectively) than those calculated from the [1-$^{13}C$]leucine method. The WBPS tended to be higher (p = 0.08) and WBPD was numerically higher (p = 0.33) for H-diet than M-diet in the [$^2H_5$]phenylalanine model, whereas the WBPS was numerically higher (p = 0.37) for H-diet and WBPS remained similar (p = 0.79) between diets in the [1-$^{13}C$]leucine method. However, the absolute values and the directions of WBPS as well as WBPD from M-diet to H-diet were comparable between the [$^2H_5$]phenylalanine model and [1-$^{13}C$]leucine method. Moreover, the values vary depending on the use of the respective amino acid contents in the carcass protein when calculating WBPS and WBPD. Therefore, it is concluded that the [$^2H_5$]phenylalanine model could be used as an alternative to the [1-$^{13}C$]leucine method for the determination of WBPS and WBPD in sheep.

• 대한화학회지
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• 제32권4호
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• pp.301-310
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• 1988

Dioxane/water (50 : 50, v/v) 용매 중에서 N-(5-phenyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-N'-arylformamidine의 mononuclear heterocyclic rearrangement반응에 대한 속도를 분광광도법으로 측정하였다. pH에 따라 두가지의 다른 반응경로, 즉 pH에 무관한 경로와 pH에 의존하는 경로가 있음을 알았다. pH에 무관한 경로에서는 치환기효과를 IYT식으로 해석한 결과 질소-질소 결합의 형성이 우세하지만 질소-수소 결합도 약간 절단된 전이상태를 가진다고 결론지을 수 있었다. 한편 pH에 의존하는 경로에서는 위로 오목한 Hammett plot를 나타냈으며, 이는 전이상태에서 전자를 미는 치환기의 경우에는 질소-질소 결합의 형성이 질소-수소 결합의 절단보다 진전되어 있고 전자를 당기는 치환기의 경우에는 질소-수소 결합의 절단이 질소-질소 결합의 형성보다는 약간 더 진전되어 있기 때문으로 결론지을 수 있었다.

• 식물병연구
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• 제24권1호
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• pp.26-32
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• 2018

Fusarium oxysporum f. sp. fragariae (Fof)에 의한 딸기 시들음병은 국내에서 중요한 병해이다. 특히 딸기재배에서 시들음병 발생은 수경재배 면적이 증가하면서 증가하는 경향을 보이고 있다. 따라서 이 연구에서는 딸기 수경재배에서 시들음병 발생에 배양액의 pH와 EC의 영향을 in vitro와 재배포장에서 조사하였다. pH는 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5로 in vitro와 재배포장에서 검정하였고 EC는 0, 0.5, 0.8, 1, $1.5dS{\cdot}m^{-1}$로 재배포장에서 조사하였다. In vitro 상에서 딸기 시들음병균의 균사생육은 pH가 증가하면서 증가하였고 $25^{\circ}C$, pH 7에서 최대였으며 $20^{\circ}C$, pH 5에서 가장 낮았다. 재배포장에서 딸기 시들음병 발생은 pH 6.5에서 가장 낮았고 pH 5에서 가장 높은 경향을 보였다. 배양액의 pH는 높아질수록 배액의 EC는 감소하였고 딸기 잎의 칼륨함량은 증가되었다. EC 검정에서 배양액 EC가 상승함에 따라 딸기 시들음병 발생과 잎의 질소함량은 증가하였다. 이런 결과로 딸기 시들음병 발생은 수경재배에서 pH와 EC가 관련이 있다는 것을 알 수 있었다.

• 대한화학회지
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• 제59권2호
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• pp.117-124
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• 2015

Hydrogen polyoxide, $H_2O_n-H_2O_m$(n=1-4, m=1-4) 이중합체(dimer)의 분자 구조 변화에 따른 수소결합(H-bonding) 효과를 순 이론적(ab initio) 방법과 밀도 범함수 이론(DFT)으로 계산하였다. 분자 구조는 B3LYP, CAM-B3LYP, MP2의 양자역학적 방법들을 사용하여 최적화하였으며, 진동주파수를 계산하여 최저에너지(true local minimum) 구조인 것을 확인하였다. 보다 정확한 수소결합 에너지(${\Delta}E$) 계산을 위하여 CCSD(T) 이론수준에서 한 점(single-point) 에너지 계산을 하였으며, 영점 진동에너지(ZPVE) 보정과 바탕집합 중첩에러(BSSE) 보정을 하였다. CCSD(T)/cc-pVTZ 이론 수준에서 $H_2O_4-H_2O_3$이 8.18 kcal/mol로 가장 강한 결합을 나타내었으며, 물 이중합체($H_2O-H_2O$)는 3.00 kcal/mol로 가장 약한 결합에너지를 나타내었다.

• 대한화학회지
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• 제33권6호
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• pp.607-613
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• 1989

물, 아세토니트릴, 아세톤 및 니트로메탄에서 Ni(II)-tetraamine 착물(tetraamine=2.12-dimethyl-3,7,11,17-tetraazabicyclo-11,3,1-heptadeca-1(17)2,11,13,15-pentaene)의 화학평형을 분광광도법을 이용하여 각각 관찰하였다. Ni(II)-tetraamine 착이온의 낮은 스핀($D_{4h}$) 구조와 높은 스핀($O_h$)구조간의 평형이 물, 아세토니트릴, 아세톤 용액에서는 나타났지만 니트로메탄 용액에서 나타나지 않았다. 평형상수와 반응엔탈피 및 반응엔트로피는 착물의 전자스펙트럼에 대한온도의 영향을 분석하므로써 결정하였다. $O_h$ 구조인 triplet 화학종의 형성은 발열과정으로 나타났었다. $D_{4h}$와 $O_h$간의 평형에 대한 용매와 전해질의 영향은 용매의 유전상수와 반응엔트로피로 설명할 수 있었다.

• 한국진공학회:학술대회논문집
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• 한국진공학회 2011년도 제40회 동계학술대회 초록집
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• pp.333-333
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• 2011

We studied the H/D exchange kinetics of pure and acid dopped water-ice film by using the techniques of reactive ions scattering (RIS) and low energy sputtering (LES) with low kinetic energy cesium ion beam (<35 eV). From RIS, neutral water isotopomers were detected in the form of cesium-molecule ion clusters, $CsX^+$ (X= $H_2O$, HDO, $D_2O$). Ionic species, like $H_3O^+$, $DH_2O^+$, $D_2HO^+$, $D_3O^+$, adsorbed on the surface were ejected via LES process. Those techniques allowed us to trace the isotopomeric populations of water-ice film. To show the catalytic effect of excess proton in the H/D exchange reaction, our study was conducted with two types of water-ice films. In film 1, about 0.5 BL of $H_2O$ was adsorbed on HCl (0.1 ML) dopped $D_2O$ (8 BL) film. In film 2, similar amount of $H_2O$ used in film 1 was adsorbed on pure $D_2O$ film. Kinetic data were obtained from each film type for 90-110 K (film 1) and 110-130 K (film 2) and fitted with numerically integrated lines. Through the Arrhenius plot of kinetic coefficient deduced from fitting of the H/D exchange reaction, the activation energy of film 1 and 2 were estimated to be $10{\pm}3kJmol^{-1}$ and $17{\pm}4kJmol^{-1}$. This activation barrier difference could be understood from detailed pictures of H/D exchange. In film 2, both the formation of ion pair, $H_3O^+$ and OH. and proton transfer were needed for the H/D exchange. However, in film 1, only proton transfer was necessary but ion pair formation was not, so this might reduce the activation energy.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제34권11호
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• pp.3327-3334
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• 2013

Infrared multiphoton dissociation (IRMPD) spectra of various protonated 1,2-diaminoethane-water clusters DAE-$H^+-(H_2O)_n$ (n = 1-6) were measured in the wavelength range of 3000-3800 $cm^{-1}$. The IRMPD spectra of the well separated ionic clusters were simulated by the MP2 method employing various basis sets. Comparison of the IRMPD spectra with the theory indicates that each cluster may exist as several low-lying conformers, and the sum spectra of the various conformers reveal almost one to one correspondence between theory and experiment. Free N-H and O-H stretches are observed in the ranges of 3400-3500 and 3600-3800 $cm^{-1}$, respectively. The $O-H{\cdots}N$ and $N-H{\cdots}O$ stretches are, however, observed in the broad region of 3000-3600 $cm^{-1}$. The theoretical calculations on DAE-$H^+-(H_2O)_n$ (n = 1-4) show gradual decrease of the average binding energy between DAE-$H^+$ and $H_2O$ as the cluster size increases, attaining the lowest value of 55 kJ/mol when n = 4. We found a low energy barrier of 21 kJ/mol to the isomerization converting the lowest energy cluster of DAE-$H^+-(H_2O)_n$ to the second lowest one.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제29권3호
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• pp.429-434
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• 2012

본 연구에서는 H1-길항체로 알려진 항히스타민제의 일종인 염산 아젤라스틴을 합성하기 위하여 phthalic anhydride, 4-chlorophenylacetic acid, hydrazine 2HCl를 이용하여 4단계 반응을 거쳐 합성하였다. 첫 번째 반응은 카르복실기와 히드록실기가 제거되는 반응이고, 두 번째 반응은 3-(4-chlorobenzylidene)phthalide의 비누화 반응이다. 세 번째 반응은 일차아민의 친핵성 첨가반응이 일어나는 반응이며, 네 번째 반응은 N-methyl-1-aza-bicyclo[3,2,0]heptane에 세 번째 반응의 생성물을 첨가하여 반응시키면 4-(4-chlorobenzyl)-1-(2H)phthalazinone가 합성되는 반응이다. 합성한 생성물을 FT-IR, $^1H$-NMR을 이용하여 분석하였고, 80%의 수율로 합성물을 얻었다.