Lee, Chang Heon;Shim, Ha Eun;Song, Lee;Jeon, Jongho
대한방사성의약품학회지
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제4권2호
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pp.90-94
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2018
The potential health risk from inhalational exposure of diesel exhaust particulates (DEP) has gained considerable scientific interests. However, the long-term in vivo behavior of DEP have not been clearly understood due to the difficulty of accurate analysis of these substances in a living subject. We herein demonstrate a detail protocol for the preparation of radiolabeled DEP using a radioactive-iodine-tagged pyrene analog. The purified $^{125}I$-labeled pyrene ($[^{125}I]1$) was obtained with a good radiochemical yield ($32{\pm}4%$, n=3) and high radiochemical purity (>99%) from the stannylated precursor 2. Next, the purified $[^{125}I]1$ was successfully assembled into the DEP suspension in an efficient manner. The radiolabeled DEP was highly stable in a mouse serum for 7 days without significant deiodination or dissociation of $[^{125}I]1$. These results clearly indicate that the present radiolabeling method will be useful for biodistribution study of carbonaceous particulates in vivo.
Chitosan is a polysaccharide derived from chitin by deacetylation. Chitosan is non-toxic, biodegradable, and biocompatible, so that it can be used in wide variety of medical applications such as wound healing and antimicrobial biomaterials. It also used as dermal fillers due to its ability to inject with liquid formulations. For investigation on in vivo distribution of these chitosans, Bolton-Hunter-conjugated chitosan (Chitosan-BH) was synthesized by the reaction between the primary amino group of chitosan and N-hydroxysuccinimide ester group of Bolton-Hunter reagent. Then Chitosan-BH was radiolabeled with 125I (Chitosan-BH-125I) using a Chloramine-T method. The effects of each radiolabeling step on the radiolabeling yield of the final product were tested. The results showed that purification step had significant effects on the radiolabeling yield of the final product. Finally, SPECT/CT images were obtained to evaluate in vivo uptake of the radiolabeled chitosan (Chitosan-BH-125I) in several organs. The highest uptake was found in the site of injection at 21 days post-injection. The results of this study suggest that chitosan is expected to be useful for biomaterials of dermal fillers.
본 연구는 알코올사용장애 환자의 혈소판막에 있는 serotonin수용체가 대조군과 비교했을 때 어떤 차이가 있는지 알아보기 위해 시행되었다. $_{125}I-LSD$를 radioligand로 사용하여 포화반응을 해 봄으로서 다음의 결과를 얻었다. 1) 환자군과 대조군간은 $B_{max}$에 있어서만 유의한 차이를 보였다(P<0.0017). 2) Type 1군과 type 2군 사이 역시 $B_{max}$에 있어서만 유의한 차이를 보였다(P<0.0396). 3) 알코올남용군과 알코올의존군 사이의 $B_{max}$와 $K_d$는 모두 유의한 차이가 없었다. 위 결과들은 알코올사용장애의 serotonin 결핍가설을 지지해주며 혈소판의 serotonin 수용체 수의 증가가 알코올사용장애의 trait marker가 될 수 있음을 시사해 준다.
$[Lys^7$]dermorphin, abbreviated K7DA, which has structural features similar to a metabolically stable $\mu$-opioid peptide agonist $[D-Arg^2, Lys^4$]dermorphin analogue (DALDA), but is intrinsically more potent with respect to binding to the $\mu$-opioid peptide receptor. The present studies report on attempts to enhance brain uptake of systemically administered K7DA by conjugation to a complex of streptavidin (SA) and the OX26 murine monoclonal antibody to the rat transferrin receptor, which undergoes receptor-mediated transcytosis through the blood-brain barrier (BBB). SA-OX26 conjugate mediates BBB transport of biotinylated therapeutics. The K7DA is monobiotinylated at the $\varepsilon$-amino group of the $[Lys^7$] residue with cleavable linker using NHS-SS-biotin. The brain uptake of $^{125}I$ labeled biotinylated K7DA ($^{125}I$-bio-SSa-K7DA) was very small and rapidly metabolized after intravenous injection. The brain uptake, expressed as percent of injected dose delivered per gram of brain, of the $^{125}I$-bio-55-K7DA bound to the SA-OX26 conjugate $^{125}I$-bio-SS-K7DA/SA-OX26) was 0.14$\pm$0.01, a level that is 2-fold greater than the brain uptake of morphine. The cleavability of the disulfide linker in vivo in rat plasma and brain was assessed with gel filtration HPLC and intravenous injection of labeled opioid chimeric peptides. The disulfide linker is stable in plasma in vivo but is cleaved in rat brain in vivo. In conclusion, these studies show that delivery of these potential opioid peptides to the brain may be improved by coupling them to vector-mediated BBB drug delivery system.
The distribution of receptor subtypes for endothelin (ET) in the kidney of the freshwater turtle, Amyda japonica, was examined by quantitative in vitro receptor autoradiography using iodinatd mammalian type ET-1 ($^125$/I-ET-1)as a radiolabeled ligand. Specific $^125$/I-ET-1 bindings were localized to renal tubules, renal arteries and ureter with binding densities of 111.21 $\pm$ 19.14, 182.13$\pm$10.57 and 219.46$\pm$12.83 amol/$mm^2$. respectively. Binding dissociation constants in renal tubules, renal arteries and ureter were 1.05 $\pm$ 0.63, 2.03 $\pm$0.56 and 1.70$\pm$0.47nM, respectively. Receptor subtypes for ET in the kidney were characterized by competition with BQ 123 and BQ 788 as specific antagonists for ET receptors, type A (ET$_A$ ), and type B (ET$_B$) subtypes, respectively. Specific $^125$/I-ET-1 bindings in renal arteries and ureter were potently inhibited by BQ 123 in a dose-dependent manner, whereas BQ 788 was not in competing for specific $^125$/I-ET-1 bindings in this structure. However, specific $^125$/I-ET-1 bindings in renal tubules were inhibited more potently by BQ 788. Therefore, these results indicate that specific ET receptors are localized in renal tubules, renal arteries and the ureter of the freshwater turtle. Results also suggest that the predominant ET receptor subtypes are like the ETA receptor in renal arteries and ureter, and like the ET/$_A$ receptor in the renal tubule.
진우도 해빈에서 2005년 11월과 2006년 5월의 2회에 걸쳐서 표층퇴적물을 채취하여 퇴적물의 조직변수를 분석하였다. 2005년 11월에 비하여 2006년 5월에는 진우도 서쪽 해빈의 최빈값은 $3.0\phi$(i.e., 0.125 mm)로 변화가 거의 없었으나, 동쪽 해빈에서는 최빈값$3.0\phi$(i.e., 0.125 mm)의 함량이 대폭 감소하고 $2.5\phi$(i.e., 0.177 mm)가 절대적으로 우세한 조립화 경향이 발생하였다. 마찬가지로 표층퇴적물 평균 입도는 서쪽 해빈에서는 두 조사의 차이가 거의 미약하지만, 동쪽 해빈의 평균입도는 증가되어 조립화된 특징을 반영한다. 이러한 조립화는 2006년 5월에 진우도의 동쪽 해빈의 표층퇴적물에서 상대적으로 양의 값으로 변화된 왜도 경향과 일치한다. 결과적으로 2005년 겨울을 지나면서 진우도의 표층퇴적물은 서쪽 해빈은 큰 변화를 보이지 않는 반면에 동쪽 해빈은 $3.0\phi$(i.e., 0.125 mm)의 세립 사질퇴적물이 제거되는 현저한 조립화 경향이 나타난 것이다. 이와 같은 변화는 낙동강 하구역에 하계동안 증가된 강수량과 낙동강 방출량 그리고 동계동안 우세한 파랑 그리고 조석의 영향 등이 복합적으로 작용하여 진우도 서쪽 해빈과 동쪽 해빈의 표층퇴적물에 영향을 주는 수리학적 조건과 퇴적물의 공급/제거가 다르기 때문이다.
목적: mdr1유전자를 표적으로 한 short hairpin RNA (shMDR)는 다약재내성을 나타내는 암세포에서 효과적으로 mdr1 유전자의 발현을 억제 할 수 있고 sodium iodide symporter (NIS)는 유전자 치료와 리포터로의 기능을 동시에 나타낼 수 있다. 이 연구에서는 사람 대장암세포(HCT15)에 shMDR과 NIS를 동시에 이입하고 Tc-99m sestamibi와 I-125 섭취를 측정하였고 doxorubicin과 I-131 치료효과도 관찰하였다. 대상 및 방법: 사람 태아 신장 세포주(Human Embryonic Kidney cells; HEK293)에 liposome 시약으로 shMDR을 이입하고 RT-PCR과 western blot으로 분석하였다. shMDR와 NIS 유전자가 발현하는 adenovirus를 만들고 HCT15 세포에 이입 후 48시간에 shMDR에 의한 Pgp의 기능 억제를 확인하기위해 Tc-99m sestamibi 섭취와 doxorubicin 세포독성을 측정하였다. 또한 NIS유전자의 기능을 확인 하기위해 I-125 섭취와 I-131 세포독성도 확인하였다. 결과: shMDR이 이입 된 HEK293 세포에서 mdr1의 mRNA와 Pgp의 발현이 각각 75%, 80% 감소하였다. NIS 유전자가 발현하는 adenovirus를 HCT15 세포에 이입하고 NIS 유전자 발현을 확인 한 결과 대조군에 비해 월등히 높게 발현하였다. Ad-shMDR 300 MOI, Ad-shMDR 300 MOI 와 Ad-NIS 10 MOI를 처리한 경우 Tc-99m sestamibi의 섭취가 대조군보다 1.5배 정도 증가하였다. HCT15 세포에 Ad-NIS 10 MOI를 감염시킨 경우 I-125 섭취가 대조군에 비해 25배 이상 증가였다. 또한 Ad-shMDR와 Ad-NIS를 동시 감염 시켰을 경우 doxorubicin의 세포 독성이 증가하여 나타났고 Ad-NIS 20 MOI를 감염시켰을 때 I-131에 의한 세포독성이 대조군보다 증가하였다. 결론: 세포에 shMDR의 이입으로 mdr1 유전자의 발현이 억제되고 Tc-99m sestamibi의 섭취와 doxorubicin의 세포독성이 증가하였으며 NIS 유전자의 이입으로 I-125의 섭취와 I-131의 세포독성이 증가하였다. 다약제내성세포에 shMDR와 NIS 유전자의 동시 이입은 doxorubicin과 방사성 옥소의 이중치료 효과를 높일 수 있을 것으로 본다.
Human thyrotropin(h-TSH)의 $^{125}I$-표지를 실온서 소량의 Chloramine T를 산화제로 사용하여 수행하였다. 이 방법은 다량의 Chloramine T를 사용하는 종래의 방법과 비교하여 균일한 방사능 표지를 용이하게 하고 강력한 산화제인 Chloramine T에 의한 h-TSH의 파손을 줄여 주었다. 새로운 방법에 의해 합성된 $h-TSH^*$는 항체에 대한 친화도와 유효기간에 있어서 Daiichi 회사의 상품에 비교하여 손색이 없었다.
인슈린-$^{125}I$를 클로라민-T법을 써서 $30{\sim}35%$의 표지 수율로 얻었으며 그 비방사능은 대략 100uCi/ug이었다. 생성물을 방사면역 측정용으로 표준화하기 위해 최적 표지부분을 전분젤 전기영동, 래디오오토그래피 및 인슈린 항체와의 인큐베이션등으로 선정하였다. 선정된 표지 인슈린으로 표준화한 결과 $50{\mu}U/ml$까지의 인슈린농도에 대해 항체와의 결합 인슈린-$^{125}I$(B)와 미결합 인슈린-$^{125}I$ (F)와의 비 (B/F)가 $0.2{\sim}1.6$으로써 매우 가파른 표준 dose-response곡선을 보여 주었다. 인슈린 방사면역 측정킷트를 만들어 그 사용 가능기간을 측정하였으며 일상 생산방법을 확립하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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