본 연구는 돼지 동결-융해 정자의 배양에 의한 체외수정능력과 glycosidase activity의 관계를 검토하였으며, 또한 돼지난자의 투명대내에서 발견된 당잔기에 대한 정자의 glycosidase 특이성을 확인하기 위하여 $\alpha$-L-fucosidase, $\alpha$-D-mannosidase, $\beta$-D-galactosidase 및 N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase ($\beta$-GlcNAc'ase)의 activity를 분석하였다. 그 결과 glycosidase activity는 동결정자의 융해 후 배양하지 않았을 때보다 2시간 배양했을 때 더 높게 나타났다. $\beta$-GlcNAc'ase의 activity는 정자 배양 유무에 관계없이 다른 glycosidase 처리시보다 최소한 2배 이상 높게 나타났다. 또한 첨체반응이 유기된 정자의 비율은 glycosidase ($\alpha$-D-mannosidase; P<0.05)에 의해 영향을 받았으며 정자를 배양하지 않은 경우보다는 배양된 정자에서 높게 나타났다. 그러나 배양시간에 따른 정자의 생존성에 대해 glycosidase의 종류에 따른 유의차는 인정되지 않았다. 한편 투명대내 정자의 접착과 침입에 대한 또 다른 실험에서, 서로 다른 glycosidase가 첨가된 배양액내에서 수정된 정자가 배양시간이 길어짐에 따라 정자의 침입율은 낮아졌다($\beta$-GlcNAc'ase; P<0.05). 투명대내의 정자접착 정도는 glycosidase의 첨가시에 무첨가시보다 접착정도가 더 높았으며, 가장 높은 접착율은 $\beta$-GlcNAc'ase첨가시 나타났다. 또한 모든 glycosidase 처리시 2시간 배양한 정자보다는 배양하지 않은 정자에서 투명대에 대한 접착정도가 높게 나타났으며, $\alpha$-D-mannosidase의 처리시 유의적인 차이를 보였다(P<0.05). 본 연구의 결과, $\beta$-GlcNAc'ase가 주로 돼지정자의 원형질막내에 존재하는 것으로 추측되며, 배양된 정자에 의한 투명대 접착정도와 침입율이 낮았음에도 불구하고 glycosidase activity가 증가하는 것으로 나타났다
본 연구는 돼지 동결-융해 정자의 배양에 의한 체외수정능력과 glycosidase activity를 평가하기 위하여 chlortetracycfine fluorescence분석법을 이용하여, glycosidase가 체외수정능력과 정자침입에 미치는 영향에 대하여 검토하였다. 또한 돼지난자의 투명대내에서 발견된 당잔기에 대한 정자의 glyco-sidase 특이성을 확인하기 위하여 $\alpha$-L-fucosidase, $\alpha$-D-mannosidase, $\beta$-D-galactosidase 및 N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase ($\beta$-GlcNAc'ase)의 activity를 분석하였다. 그 결과 glycosidase activity는 동결정자의 응해 후 배양하지 않았을 때보다 2시간 배양했을 때 더 높게 나타났다. $\beta$-GlcNAc'ase의 activity 는 정자 배양 유무에 관계없이 다른 glycosidase 처리시보다 최소한 2배 이상 높게 나타났다. 또한 첨체반응이 유기된 정자의 비율은 glycosidase ($\alpha$-D-mannosidase; P<0.05)에 의해 영향을 받았으며 자를 배양하지 않은 경우보다는 배양된 정자에서 높게 나타났다. 그러나 배양시간에 따른 정자의 존성에 대해 glycosidase의 종류에 따른 유의차는 인정되지 않았다. 한편 투명대내 정자의 접착과 입에 대한 또 다른 실험에서, 서로 다른 glyco-sidase가 첨가된 배양액내에서 수정된 정자가 배양시간이 길어짐에 따라 정자의 침입율은 낮아졌다 $\beta$-GlcNAc'ase; P<0.05). 투명대내의 정자접착정도는 glycosidase의 첨가시에 무첨가시보다 접착정도가 더 높았으며, 가장 높은 접착율은 $\beta$-GlcNAc'ase 첨가시 나타났다. 또한 모든 glycosidase 처리시 2시간 배양한 정자보다는 배양하지 않은 정자에서 투명대에 대한 접착정도가 높게 나타났으며, $\alpha$-D-mannosidase의 처리시 유의적인 차이를 보였다 (P<0.05). 본 연구의 결과, $\beta$-GlcNAc'ase가 주로 돼지정자의 원형질막내에 존재하는 것으로 추측되며, 배양된 정자에 의한 투명대 접착정도와 침입율이 낮았음에도 불구하고 glycosidase activity가 증가하는 것으로 나타났다.
연구배경: 폐결핵의 진단은 결핵균이 배양되면 확진이 되나, 실제 임상에서는 세균학적 진단이 양성으로 나타나지 않는 폐결핵 환자가 다수 존재하므로 활동성 위한 빠르고 확실한 진단방법이 임상에서 절실히 요구되고 있다, $\beta$-glucuronidase(이하 GLU)와 $\beta$-N-acetyl glucosaminidase(이하 NAG)는 폐내 탐식세포인 대식세포(macrophage)의 리소솜(lysosome) 효소들로서, 이산화규소가 폐내로 흡입되어 폐포내 대식세포에 의해서 탐식되고 이어서 대식세포가 파괴된 다고 알려진 규폐증에서 NAG의 혈중농도가 증가한다는 보고가 있었다. 또한 폐결핵에서도 세포내에서 증식된 결핵균을 충분히 사멸시키지 못하여 활동성 결핵 병변이 유발된 경우 파괴된 대식세포로부터 증식된 결핵균과 함께 GLU나 NAG도 유리될 것으로 추정된다. 본 연구는 활동성 폐결핵환자의 혈중 리소솜 효소 활성도가 비활동성 결핵환자나 정상대조군보다 높은지 여부와 혈중내 리소솜 효소의 측정이 활동성 폐결핵 진단법으로 이용될 수 있는지의 여부에 대해 알아보고자 하였다. 방법: 결핵균이 검출되어 활동성 폐결핵으로 진단된 환자군과 비활동성 폐결핵군 및 건강대조군에서 GLU와 NAG의 혈장내 농도 차이를 비교하였으며 활동성 폐결핵환자군에서는 투약에 따른 리소솜효소의 변동이 있는지를 관찰하기 위하여 투약후 2개월 뒤에 상기 효소들의 활성치를 다시 측정하여 진단시의 값과 비교하였다. 두가지 효소 모두 4-methylumbelliferyl substrates를 사용한 형광측정법으로 측정하였다. 결과: 1) 활동성 폐결핵군과 비활동정 폐결핵군 및 건강대조군 사이의 혈중 GLU와 NAG의 농도차이: 활동성 폐결핵군의 GLU 및 NAG의 혈중 농도는 $21.52{\pm}3.01$ 및 $325.4{\pm}23.37nmol$ product/h/ml of plasma(이하 단위표기생략)로서 비활동정 폐결핵군 $24.87{\pm}3.78$, $362.36{\pm}33.92$와 건강대조군 $25.45{\pm}4.05$, $324.44{\pm}28.66$ 사이에 차이가 없었다. 2) 활동성 폐결핵군에서 항결핵제 치료 전후의 혈중 NAG와 GLU의 농도차이: 활동성 폐결핵 치료시작 2개월후 GLU의 혈중치는 $41.18{\pm}5.23$으로서 치료전에 비해 통계적으로 유의하게 증가되었고(p값<0.05) NAG의 혈중농도는 $359.2{\pm}39.53$으로서 치료전과 차이가 없었다. 결론: 활동성 폐결핵환자의 혈장내 GLU 및 NAG의 농도는 비활동성 결핵군이나 건강대조군과 차이가 없었으므로 상기 효소들의 측정은 활동성 폐결핵 진단의 방법으로서 유용하지 않는 것으로 사료되었고 병 경과에 따른 혈중 GLU치의 증가에 대하여는 연구가 필요할 것으로 사료되었다.
Spatial variations of physicochemical and microbiological variables were examined to understand spatial heterogeneity of those variables in intertidal flat. Variograms were constructed for understanding spatial autocorrelations of variables by a geostatistical analysis and spatial correlations between two variables were evaluated by applications of a Cross-Mantel test with a Monte Carlo procedure (with 999 permutations). Water content, organic matter content, pH, nitrate, sulfate, chloride, dissolved organic carbon (DOC), four extracellular enzyme activities (${\beta}-glucosidase$, N-acetyl-glucosaminidase, phosphatase, arylsulfatase), and bacterial diversity in soil were measured along a transect perpendicular to shore line. Most variables showed strong spatial autocorrelation or no spatial structure except for DOC. It was suggested that complex interactions between physicochemical and microbiological properties in sediment might controls DOC. Intertidal flat sediment appeared to be spatially heterogeneous. Bacterial diversity was found to be spatially correlated with enzyme activities. Chloride and sulfate were spatially correlated with microbial properties indicating that salinity in coastal environment would influence spatial distributions of decomposition capacities mediated by microorganisms. Overall, it was suggested that considerations on the spatial distributions of physicochemical and microbiological properties in intertidal flat sediment should be included when sampling scheme is designed for decomposition processes in intertidal flat sediment.
Han, Hyun-Ja;Lee, Deok-Chan;Kim, Do-Hyung;Choi, Hye Sung;Jung, Sung Hee;Kim, Jin Woo
Fisheries and Aquatic Sciences
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제16권2호
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pp.125-129
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2013
Vibrio ichthyoenteri is a facultatively anaerobic gram-negative bacterium with straight or slightly curved rod morphology. The bacterium is an etiological agent of bacterial enteritis of Olive flounder Paralichthys olivaceus. Only a handful of studies, using a limited number of isolates, have investigated the phenotypic and genetic characteristics of V. ichthyoenteri. We isolated 40 V. ichthyoenteri strains, identified based on the 16S rRNA gene sequence, from the diseased flounder larvae and investigated the API 20E and ZYM profiles. The isolates exhibited highly divergent phenotypic characteristics regardless of sampling time point and location, and fish age. Essential enzymes produced by V. ichthyoenteri seemed to be alkaline phosphatase, leucine arylamidase, and N-acetyl-${\beta}$-glucosaminidase. This study reveals a much greater enzymatic and biochemical phenotype diversity than has been evident to date. These results suggest that a given population of V. ichthyoenteri could be heterogeneous in terms of its phenotypic characteristics.
Park, Sun-Young;Cho, Seong-A;Kim, Sae-Hun;Lim, Sang-Dong
한국축산식품학회지
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제34권5호
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pp.647-655
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2014
Obesity is strongly associated with several metabolic and chronic diseases and has become a major public health problem of worldwide concern. This study aimed to investigate the physiological characteristics and anti-obesity effects of Lactobacillus plantarum Q180. Lactobacillus plantarum Q180 was isolated from the faces of healthy adults and found to have a lipase inhibitory activity of $83.61{\pm}2.32%$ and inhibited adipocyte differentiation of 3T3-L1 cells ($14.63{\pm}1.37%$) at a concentration of $100{\mu}g/mL$. The strain was investigated for its physiological characteristics. The optimum growth temperature of L. plantarum Q180 was $37^{\circ}C$. Lactobacillus plantarum Q180 showed higher sensitivity to novobiocin in a comparison of fifteen different antibiotics and showed the highest resistance to rifampicin, polymyxin B and vancomycin. The strain showed higher ${\beta}$-galactosidase and N-acetyl-${\beta}$-glucosaminidase activities. It also did not produce carcinogenic enzymes such as ${\beta}$-glucuronidase. The survival rate of L. plantarum Q180 in MRS broth containing 0.3% bile was 97.8%. Moreover, the strain showed a 97.2% survival rate after incubation for 3 h in pH 2.0. Lactobacillus plantarum Q180 was displayed resistance to Escherichia coli, Salmonella Typhimurium and Staphylococcus aureus with rates of 55.6%, 38.0% and 47.6%, respectively. These results demonstrate that L. plantarum Q180 has potential as a probiotic with anti-obesity effects.
Jo Qtae;Choy Eun-Jung;Park Doo Won;Jee Young-Ju;Kim Sung Yeon;Kim Yoon
Fisheries and Aquatic Sciences
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제5권4호
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pp.263-270
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2002
The Pacific oysters, Crassostrea gigas, were stressed with different concentrations of benzo(a) pyrene and depurated to determine the hemocyte lysosomal membrane stability and hydrolytic enzymatic activity as a biomarker candidate to the chemical, using NRR (neutral red retention) and API ZYM System, respectively. The membrane damage measured as NRR decrease was significant with the increase of chemical concentration and exposure time (P<0.05), providing a possible tool for biomarker. Interestingly, the control showed intrinsic stress probably due to captive life in the laboratory, and a recovering trend was also found during the depuration. The benzo(a)pyrene-exposed oysters showed increased enzyme activities in alkaline phosphatase, esterase (C4), acid phosphatase, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, $\beta$-galactosidase, $\beta$-glucuronidase, and N-acetyl- $\beta$-glucosaminidase. Of them, only two enzymes, acid phosphatase and alkaline phosphatase, showed some potential available for the generation of enzymatic biomarker in the oyster. The results are suggestive of the potential availability of the cellular and enzymatic properties as a biomarker. However, considering that a robust biomarker should be insensitive to natural stress coming from normal physiological variation, but sensitive to pollutants, a concept of intrinsic stress the animal possesses should be taken into consideration. This reflects the necessity of further research on the intrinsic stress affecting the cellular and enzymatic properties of the chemicalstressed oysters prior to using the data as a biomarker.
남극 토양생태계 세균의 분포와 세균의 생화학적 특성을 알아보기 위해 King George섬의 세종기지(한국)와 Te-niente Jubany기지(아르헨티나) 주변의 토양 17점을 남극 하계 기간(1989년 2월) 동안 채취하여 종속영양 세균의 수오 채외 효소활성도를 측정하였다. 종속영양 세균수는 시료채취지역과 배양온도가 다른 조건에서 자란 세균의 경우에도 그 평균값이 비숫한 경향을 보이고 있으나 protease는 $4^{\circ}C$에서 자란 세균의 경우 92%로서 특히 높게 나타났다. 배양온도에 따라 매우 변화가 켰으며 산술평균값은 배양온도 $37^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, $4^{\circ}C$에서 각각 $2.5\times 10^{4}$, $2.7\times 10^{7}$, $6.9\times 10^{5}$ CFU/$cm^{3}$soil로 나타났다
Present experiment was performed in order to establish the optimum conditions for quantitation of ${\gamma}$-GTP and AGS activities in rat urine and investigate the applicability of the these enzymes in experimental assessment of nephrotoxicity in rats. The results obtained were as follows. 1. The optimal pH of Tris-BCI buffer containing glycylglycine for determination of urinary ${\gamma}$-GTP activity was 7.6(37$^{\circ}C$). 2. The Michaelis constant of urinary ${\gamma}$-GTP ranged from 1.1 to 1.2 mmol/$\ell$. 3. The optimal pH of citrate buffer for determination of urinary AGS activity was 3.6(37$^{\circ}C$). 4. The Michaelis constant of urinary AGS ranged from 0.8 to 0.9mmo1/$\ell$. 5. Coefficient of variance for within-run imprecision of urinary ${\gamma}$-GTP ranged from 3.8 to 6.4% and that of urinary AGS ranged from 2.5 to 4.1%. 6. There was no significant difference between gel-filtered samples and crude samples in the mean activity of urinary ${\gamma}$-GTP and the intra-individual differences by gel-filtration were either increased or decreased. Mean values of ${\gamma}$ -GTP activities in gel-filtered samples and crude samples were 1570 and 1590 U/$\ell$, repectively. 7. The mean activity of urinary AGS increased significantly after gel-filtration and all the individual urines revealed higher activities after gel-filtration. 8. ${\gamma}$-GTP and AGS activities were linear to 135 and 7U/$\ell$, respectively. 9. Urinary ${\gamma}$-GTP and AGS excretion before administration of potassium dichromate were 22.1 ${\pm}$ 11.2 and 0.5${\pm}$0.2 U/24hrsㆍkg body weight respectively and increased significantly to 102.3${\pm}$44.5 and 5.8${\pm}$3.30/24hrsㆍkg body weight respectively within 24 hours after administration. 10. BUN increased continuously from 24 hours following exposure to potassium dichromate in all 10 rats. From these findings it is concluded that the urinary ${\gamma}$-GTP and AGS excretions are early and sensitive indicators for nephrotoxicity assessment in rat.
1995년 8월부터 12월 사이에 미량의 카드뮴에 오염된 것으로 밝혀진 폐광 인근 지역에 거주하고 있는 지역주민 184명(남자: 82명, 여자: 102명)을 대상으로 카드뮴에 의한 만성적인 폭로와 신기능장애를 평가하기 위하여 요중 카드뮴과 NAG활성도, $\beta_2MG$배설량 및 총단백질량을 정량하여 비교 분석하였다. 이때 특별히 카드뮴에 폭로된 적이 없는 일반주민 160명(남자 : 64명, 여자 : 96명)을 대조군으로 선정하였다. 남자의 경우 폭로군의 요중 평균 카드뮴농도는 $2.56{\mu}g/\ell,\;2.80{\mu}g/g$ creatinine 및 $2.50{\mu}g/S.G.$, 대조군은 $1.19{\mu}g/\ell,\;1.36{\mu}g/g$ creatinine 및 $1.17{\mu}g/S.G.$ 였고, 여자에서는 폭로군 $2.69{\mu}g/\ell,\;3.94{\mu}g/g$ creatinine 및 $2.63{\mu}g/S.G.$, 대조군 $1.27{\mu}g/\ell,\;1.97{\mu}g/g$ creatinine 및 $1.25{\mu}g/S.G.$로서 폭로군이 대조군에 비해 남 여 모두에서 유의하게 높았다. 연령에 따른 요중 평균 카드뮴 농도는 남자의 경우 $20\sim39$세군에서는 폭로군과 대조군간에 차이가 없었으나, $40\sim59$세군과 60세 이상군에서는 폭로군이 유의하게 높았다. 여자에서는 폭로군이 대조군에 비해 모든 연령층에서 유의하게 높았다. 또한, 폭로군에 있어서 조사대상 지역에 거주한 기간이 길수록 그리고 이 지역에서 생산된 쌀과 채소류를 섭취하는 사람들의 요중 카드뮴 농도가 높게 나타나, 폐광 인근 지역주민들이 미량이지만 상대적으로 많은 양의 카드뮴에 만성적으로 폭로되고 있는 것으로 추정되었다. 폭로군과 대조군의 요중 평균 NAG활성도, $\beta_2-MG$ 배설량 및 총단백질량은 두 군간에 유의한 차이가 없었다. 그러나, 폭로군에서 요중 NAG활성도와 총단백질량은 요중 카드뮴량과 통계적으로 유의한 정상관이 있었으나 $\beta_2-MG$ 배설량은 유의하지 않았다. 또한 2.0 미만군, 2.0이상 10.0미만군, 10.0이상군으로 구분한 요중 카드뮴 농도수준에 따른 분석시 요중 카드뮴 2.0미만군에 비해 10.0이상군의 NAG활성도, $\beta_2-MG$배설량 및 총단백량이 유의하게 증가되었으며, NAG활성도는 2.0이상 10.0미만군에서도 유의하게 증가되었다. 즉, 폭로군에서 요중 카드뮴 농도에 따른 요중 NAG활성도의 증가가 $\beta_2-MG$배설량의 증가에 비해 상대적으로 민감하게 나타나, 향후 카드뮴 폭로군에 대한 색출검사시 $\beta_2-MG$배설량과 함께 NAG활성도를 조사함으로써 조기진단적 가치가 높을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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