• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제58권3호
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• pp.267-276
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• 2005

연구배경 : 전환성장인자-${\beta}1$(transforming growth factor-${\beta}1$: $TGF-{\beta}1$)은 폐 섬유화를 매개하는 주된 인자이지만 $TGF-{\beta}1$에 의한 폐 섬유화의 발생과 진행기전의 이해는 아직 불완전하다. $TGF-{\beta}1$은 다양한 세포에서 활성산소족(reactive oxygen species: ROS)을 통하여 세포내 신호를 전달하고 ${\alpha}$-smooth muscle actin (${\alpha}$-SMA)의 신생합성을 통하여 상피세포와 폐 섬유아세포를 근 섬유아세포 표현형으로의 변화를 유도하는 주된 인자이다. ROS는 또 다양한 세포에서 세포외기질 (extracellular matrix: ECM) 축적을 유발하는 것이 알려져 있음으로 본 연구에서는 폐 섬유아세포인 MRC-5 세포에서 $TGF-{\beta}1$이 ROS를 매개하여 fibronectin 분비와 ${\alpha}-SMA$ 표현의 증가에 관여하는지를 검색하였다. 방 법 : 성장이 동일화된 MRC-5 세포를 $TGF-{\beta}1$ (0.2-10ng/ml)으로 96 시간까지 자극하였고, 필요에 따라 항산화제인 N-acetylcysteine (NAC)이나 NADPH oxidase 억제제인 diphenyleniodonium (DPI)을 $TGF-{\beta}1$ 투여 1 시간 전부터 전처리하였다. Dichlorofluorescein (DCF)에 민감한 세포내 ROS는 FACS로, 분비된 fibronectin과 세포의 ${\alpha}-SMA$ 표현은 Western blot 분석으로 측정하였다. 결 과 : $TGF-{\beta}1$은 용량의존적으로 fibronectin 분비와 ${\alpha}-SMA$ 표현을 상향조절하였다. NAC와 DPI는 $TGF-{\beta}1$에 의한 fibronectin 분비 증가와 ${\alpha}-SMA$ 상향조절을 유의하게 억제하였다. $TGF-{\beta}1$에 의한 세포내 ROS의 증가도 NAC나 DPI에 의하여 유의하게 억제되었다. 결 론 : 본 연구의 결과는 폐 섬유아세포에서 NADPH oxidase 에 의하여 생산된 ROS가 $TGF-{\beta}1$에 의한 fibronectin 분비와 ${\alpha}-SMA$ 표현을 상향조절함으로써 폐 섬유화의 발생과 진행에 관여할 수 있음을 증명하였다.

• 대한임상검사과학회지
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• 제39권3호
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• pp.210-216
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• 2007

There is increasing evidence that stromal reaction in cancer has an important diagnostic and prognostic significance. The aim of our study is to analyze the relation between the increase in mast cell number and the expression CD34 and alpha-smooth muscle actin (${\alpha}$-SMA) in the stroma of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and squamous cell carcinoma (SCC). We investigated a total of 29 CIN (1,2,3) and 21 SCC (microinvasive and invasive) specimens and compared the distribution of $CD34^+$ stromal cells, ${\alpha}-SMA^+$ cells, transforming growth factor-${\beta}1$ $(TGF-{\beta}1)^+$ cells, and the density of mast cells using immunohistochemistry with antibodies against CD34, ${\alpha}$-SMA, TGF-${\beta}1$, and c-Kit (CD117) respectively. Computerized image analysis was to evaluate the positive area (%) and density of the respective immunoreactive cells. In CIN $CD34^+$ cells were abundant in the stroma but no ${\alpha}-SMA^+$ cells were identified except the wall of blood vessels. $CD34^+$ cells were progressively decreased along the continuum from CIN 2 to microinvasive SCC and not observed in the stroma of invasive SCC. Whereas ${\alpha}-SMA^+$ cells were only observed in the stroma of microinvasive and invasive SCC. We found more intense TGF-${\beta}1$ expression in the increased mast cells in the stroma of invasive SCCs than that in the stroma of CIN. These results indicate that disappearance of $CD34^+$ stromal cells and appearance of ${\alpha}-SMA^+$ cells are associated with the stromal change of CIN to SCC and the transformation of $CD34^+$ stromal cells into ${\alpha}-SMA^+$ cells is mediated by TGF-${\beta}1$ secretions in the stromal mast cell of SCC.

• 콘크리트학회지
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• 제7권2호
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• pp.175-182
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• 1995

스티렌과 무수말레인산의 라디칼 공중합에 의해 스티렌-무수말레인산 공중합체(SMA)를 합성하고 SMA를 m-amino phenol과 치환반응하여 m-amino phenol 이 치환된 스티렌-무수말레인산 공중합체(mSMA)도 합성하였다. 합성한 SMA와 mSMA를 황산화하여 각각 황산화 SMA(SSMA) 및 황산화 mSMA(SmSMA)를 제조하였다. 공중합체의 합성은 적외분광스펙트럼의 특성피크로부터 확인할 수 있었다. 원소분석 결과 mSMA의 m-amino phenol의 치환율은 44%이었고 이것은 황산화 과정을 거치면서 35%로 감소하였다. 공중합체의 시멘트에 대한 흡착실험 결과 공중합체의 첨가량이 적을수록 흡착율이 높게 나타났고, 첨가량에 관계없이 SSMA의 흡착율이 SmSMA의 그것보다 크게 나타났다. 본 연구에서 합성한 공중합체 (SSMA, SmSMA)는 시멘트 분산제로서의 가능성이 기대되어진다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제19권5호
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• pp.401-411
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• 2015

Aldose reductase (AR) is known to play a crucial role in the mediation of diabetic and cardiovascular complications. Recently, several studies have demonstrated that allergen-induced airway remodeling and ovalbumin-induced asthma is mediated by AR. Epalrestat is an aldose reductase inhibitor that is currently available for the treatment of diabetic neuropathy. Whether AR is involved in pathogenesis of pulmonary fibrosis and whether epalrestat attenuates pulmonary fibrosis remains unknown. Pulmonary fibrosis was induced by intratracheal instillation of bleomycin (5 mg/kg) in rats. Primary pulmonary fibroblasts were cultured to investigate the proliferation by BrdU incorporation method and flow cytometry. The expression of AR, TGF-${\beta}_1$, ${\alpha}$-SMA and collagen I was analyzed by immunohistochemisty, real-time PCR or western blot. In vivo, epalrestat treatment significantly ameliorated the bleomycin-mediated histological fibrosis alterations and blocked collagen deposition concomitantly with reversing bleomycin-induced expression up-regulation of TGF-${\beta}_1$, AR, ${\alpha}$-SMA and collagen I (both mRNA and protein). In vitro, epalrestat remarkably attenuated proliferation of pulmonary fibroblasts and expression of ${\alpha}$-SMA and collagen I induced by TGF-${\beta}_1$, and this inhibitory effect of epalrestat was accompanied by inhibiting AR expression. Knockdown of AR gene expression reversed TGF-${\beta}_1$-induced proliferation of fibroblasts, up-regulation of ${\alpha}$-SMA and collagen I expression. These findings suggest that AR plays an important role in bleomycin-induced pulmonary fibrosis, and epalrestat inhibited the progression of bleomycin-induced pulmonary fibrosis is mediated via inhibiting of AR expression.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제21권1호
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• pp.37-44
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• 2017

Regulation of vascular smooth muscle cell (VSMC) phenotype plays an essential role in many cardiovascular diseases. In the present study, we provide evidence that $kr{\ddot{u}}ppel$-like factor 8 (KLF8) is essential for tumor necrosis factor ${\alpha}$ ($TNF{\alpha}$)-induced phenotypic conversion of VSMC obtained from thoracic aorta from 4-week-old SD rats. Stimulation of the contractile phenotype of VSMCs with $TNF{\alpha}$ significantly reduced the VSMC marker gene expression and KLF8. The gene expression of KLF8 was blocked by $TNF{\alpha}$ stimulation in an ERK-dependent manner. The promoter region of KLF8 contained putative Sp1, KLF4, and $NF{\kappa}B$ binding sites. Myocardin significantly enhanced the promoter activity of KLF4 and KLF8. The ectopic expression of KLF4 strongly enhanced the promoter activity of KLF8. Moreover, silencing of Akt1 significantly attenuated the promoter activity of KLF8; conversely, the overexpression of Akt1 significantly enhanced the promoter activity of KLF8. The promoter activity of SMA, $SM22{\alpha}$, and KLF8 was significantly elevated in the contractile phenotype of VSMCs. The ectopic expression of KLF8 markedly enhanced the expression of SMA and $SM22{\alpha}$ concomitant with morphological changes. The overexpression of KLF8 stimulated the promoter activity of SMA. Stimulation of VSMCs with $TNF{\alpha}$ enhanced the expression of KLF5, and the promoter activity of KLF5 was markedly suppressed by KLF8 ectopic expression. Finally, the overexpression of KLF5 suppressed the promoter activity of SMA and $SM22{\alpha}$, thereby reduced the contractility in response to the stimulation of angiotensin II. These results suggest that cross-regulation of KLF family of transcription factors plays an essential role in the VSMC phenotype.

• 한국수산과학회지
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• 제49권6호
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• pp.807-814
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• 2016

Fucoidan, one of the dominant sulfated polysaccharides extracted from brown seaweed, possesses a wide range of biological activities. Transforming growth $factor-{\beta}$ ($TGF-{\beta}$) plays a pivotal role in the pathogenesis of pulmonary fibrosis, by stimulating the synthesis of profibrotic factors. In this study, we investigated the in vitro effects of fucoidan on collagen synthesis, ${\alpha}-smooth$ muscle actin (${\alpha}-SMA$) expression, and interleukin (IL)-6 production in $TGF-{\beta}$-stimulated human pulmonary fibroblasts. The expression of type I collagen and ${\alpha}-SMA$ was detected by Western blot, and the production of IL-6 by enzyme-linked immunosorbent assay. $TGF-{\beta}1$ treatment of pulmonary fibroblasts enhanced the expression of ${\alpha}-SMA$, type I collagen, and IL-6 whereas these effects were inhibited in cells pretreated with fucoidan. The activation of Smad2/3, p38 mitogen-activated protein kinases (MAPKs), and Akt was also inhibited in fucoidan-pretreated, $TGF-{\beta}1-stimulated$ human pulmonary fibroblasts. These data demonstrate the anti-fibrotic potential of fucoidan in $TGF-{\beta}-induced$ human pulmonary fibroblasts, via the inhibition of Smad2/3, p38 MAPKs, and Akt phosphorylation. Our results suggest the therapeutic potential of fucoidan in the prevention or treatment of pulmonary fibrosis.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제52권8호
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• pp.944-952
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• 2009

목 적 : Epithelial to mesenchymal transition (EMT)은 태생기에 있어 필수 불가결한 발달과정일 뿐 아니라, 신 섬유화에 있어서도 중요한 역할을 하며, nestin은 고전적인 줄기세포 표지자로 신 세뇨관 간질 손상에 있어 새로운 표지자로 밝혀지고 있다. 신생 백서 신장에서 Angiotensin (Ang) II가 EMT에 미치는 영향을 알아보고자, 안지오텐신 전환 효소 억제제를 투여한 신생 백서의 신장에서 EMT 표지자 및 nestin의 발현 양상을 조사하였다. 방 법 : 7일 동안 신생 백서에게 enalapril (30 mg/kg/d) 또는 vehicle을 투여하였으며, ${\alpha}-smooth$ muscle actin (SMA), E-cadherin, vimentin 및 nestin에 대한 면역 조직 화학 염색을 시행하였다. 결 과 : enalapril 투여군에서 대조군에 비해 신 피질 및 수질 모두에서 ${\alpha}-SMA$ 발현이 증가하였으며, 이는 확장된 세뇨관 상피 세포에서 뚜렷하였다(P<0.05). E-cadherin 발현은 enalapril 투여군의 신 피질 및 수질의 세뇨관 상피 세포에서 확연히 감소하였다(P<0.05). vimentin 및 nestin 발현은 신 피질에서는 양군간의 차이가 없었으나, 신 수질에서는 enalapril 투여군에서 세뇨관 간질 세포에서 발현이 의미있게 증가하였다(P<0.05). 결 론 : 신생 백서 신장에서 Ang II 억제는 ${\alpha}-SMA$ 발현을 증가시키고, E-cadherin 발현을 감소시킴으로써 발달하는 신장의 EMT를 증가시켰다. Enalapril 투여는 또한 신 수질에서 vimentin과 nestin의 발현을 증가시켰으며, 이는 신생 백서 신장에서의 Ang II 억제로 인한 EMT 과정 중 신 수질의 변화가 더욱 뚜렷한 것을 시사하며, Ang II 억제가 EMT 표지자들의 발현을 다르게 변화시키는 것으로 사료된다.

• Journal of Korean Biological Nursing Science
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• 제8권2호
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• pp.41-59
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• 2006

Chronic liver diseases and hepatic cancer have been reported as 10% of cause of death in Koreans. Regardless of various causes, chronic liver disease accompanies commonly hepatic fibrosis. But still the mechanism of hepatic fibrosis remains poorly understood. Using the dimethylnitrosamine(DMN)-induced hepatic fibrosis rat model, We performed to evaluate the possible therapeutic effect of RIP(extracts of Phellodendron amurense and Patrinia scabiosaefolia) and to investigate the changes in referential connective tissue proteins($TGF-{\beta}_1$, ${\alpha}$-smooth muscle actin, and vimentin) as a marker of fibrogenesis. For these purposes, liver tissues were stained with H & E, and Azan staining for estimation of developing fibrosis. In the DMN-treated rat liver tissue, fibrosis were developed forming incomplete septal fibrosis. Whereas, in the RIP-treated rat liver tissues, the fibrosis were decreased recovering to normal morphology. The expressions of $TGF-{\beta}_1$, ${\alpha}$-smooth muscle actin($\alpha-SMA$), and vimetin were increased in the DMN-treated rat liver tissues, but decreased in the various areas of RIP-treated rat liver tissues. According to these results, RIP could be a possible therapeutic agent to reduce hepatic fibrosis, and the $TGF-{\beta}_1$, ${\alpha}$-SMA, and vimentin could be possible indicative markers of hepatic fibrosis development and recovery.

• Childhood Kidney Diseases
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• 제15권2호
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• pp.125-137
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• 2011

목적: 일반적으로 남자는 여자에 비해 만성 신장병의 발병이 많고 말기 신부전으로의 진행이 더 흔한 것으로 알려져 있다. 본 연구는 일측성 요관 폐쇄를 가진 생쥐에서 신섬유화에 대한 성별과 성호르몬의 효과를 규명하기 위해 시행되었다. 방법: 일측성 완전 요관 폐쇄 7일째 암컷과 수컷 생쥐의 신장에서 ${\alpha}$-smooth muscle actin (${\alpha}$-SMA)의 발현을 측정한 후, 암컷 생쥐에서 난소를 제거하거나 제거 후 다시 $17{\beta}$-estradiol을 보충하여 나타나는 신섬유화 정도를 비교 분석하였다. 결과:일측성 요관 폐쇄를 가진 암컷 신장의 ${\alpha}$-SMA의 발현이 수컷 신장에 비해 현저히 낮았다. 난소 제거와 $17{\beta}$-estradiol의 보충은 일측성 요관 폐쇄를 가진 암컷 신장의 안지오텐신 II 1형 수용체의 발현에는 의미 있는 영향을 주지 않았지만, 안지오텐신 II 2형 수용체의 발현은 정상 암컷과 난소 제거 후 $17{\beta}$-estradiol를 보충한 암컷에서 현저히 증가되었다. 또한, inducible nitric oxide synthase (iNOS) 역시 유사한 변화를 보였다. 결론 : 여성은 폐쇄성 요로병증에서 신섬유화에 대한 저항성과 연관이 있으며 이러한 성별의 차이는 $17{\beta}$-estradiol에 의한 안지오텐신 II 2형 수용체와 iNOS의 발현 증가와 연관이 있을 것으로 사료된다.

• 한국안광학회지
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• 제13권4호
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• pp.161-169
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• 2008

목적: 알칼리 화상 후 초기 임상적 손상반응의 진행과 치료를 위한 각막 재생의 이해를 높이기 위하여, 화학적 손상 후 동반하는 다양한 인자에 대한 면역조직화학적 변화를 조사하였다. 방법: 알칼리 화상을 입은 각막의 자가치유과정을 면역형광염색법과 H-E 염색, 그리고 TUNEL assay를 통해 면역조직화학적 측면에서 관찰하였다. 결과: 화상 후 각막의 치유는 진행되었지만 각막기질(stroma)과 내피세포의 세포사는 지속적으로 관찰되었다. 각막가장자리의 혈관신생과 손상된 각막의 ${\alpha}$-SMA의 발현은 알칼리 화상 3일 후부터 나타났으며, 각막기질에서의 콜라젠 III(collagen III)의 형성과 콘드로이친황산(chondroitin sulfate)의 발현은 ${\alpha}$-smooth muscle actin(${\alpha}$-SMA)와 transforming growth factor-${\beta}$(TGF-${\beta}$)의 발현증가와 일치하는 결과를 얻었다. 결론: 각막혼탁을 막기 위해서는 알칼리 화상 후 3일 이내에 혈관신생, 콜라젠 및 콘드로이친황산의 형성을 억제하는데 주력하는 치료가 효과적일 것이라 사료된다. 이 연구는 알칼리 화상을 입은 각막의 치유과정에 있어서의 면역조직화학적 지식을 제공함으로써, 각막의 재생을 촉진하는 치료제의 개발과 이용에 초석이 되리라 사료된다.