Development of Ultra-Rapid Reverse-Transcription PCR for the Rapid Detection against Slow Bee Paralysis Virus (SBPV)

Slow Bee Paralysis Virus (SBPV) 신속 검출을 위한 초고속 역전사 중합효소 연쇄반응법의 개발

Slow Bee Paralysis Virus (SBPV) is a pathogenic virus against honeybee and bumblebee, causes the death of adult bee by paralyzing the fore-leg of bee. In this study, for rapid detection of SBPV from bumblebee, SBPV-specific Ultra-rapid Reverse transcription PCR was developed. After optimizing of SBPV-specific Ultra-rapid PCR, the existence of $1.0{\times}10^8$ SBPV-specific DNA molecules could be recognized in 3 minute and 35 seconds. Even $1.0{\times}10^1$ molecules of SBPV-specific DNA could be measured with quantitative manner. Meanwhile, from both imported bumblebee and bumblebee produced in Korea, SBPV were detected using proposed method. In the laboratory as well as in the field, SBPV-specific Ultra-rapid Reverse transcription PCR would be applied and might be expected as useful tools at production of bumblebee or inspection for the import and export system of bumblebee.

Slow Bee Paralysis Virus (SBPV)는 꿀벌 그리고 뒤영벌의 병원성 바이러스로써, 벌의 앞발을 마비시킴으로 폐사를 야기한다. 본 연구는, 뒤영벌에서 빠르게 SBPV 검출하고자 SBPV 특이 초고속 PCR법을 개발한 것을 보고하는 것이다. SBPV 특이 초고속 PCR은 제반 조건을 최적화한 후, $1.0{\times}10^8$ 분자의 SBPV 특이 유전자의 존재를 3분 35초 만에 인식할 수 있었으며, 최소 $1.0{\times}10^1$ 분자의 DNA까지 정량적으로 측정할 수 있었다. 한편, 국내외에서 생산된 뒤영벌을 시료로 SBPV 특이 초고속 역전사 PCR을 시행하였으며, 수입된 뒤영벌과 국내생산 뒤영벌 1종에서 SBPV가 존재함을 보일 수 있었다. 국내 처음으로 뒤영벌에서의 SBPV의 존재를 확인한 것이다. SBPV 특이 유전자 초고속 역전사 PCR법은 실험실 내에서 뿐만 아니라 현장에서 정량적 검출을 하기에 유용한 방법이 될 것이며 더 나아가 뒤영벌 수출입을 위한 검역 기준을 이용하여 집단적 발병 방지에 기여하기를 기대한다.