초록
본 연구는 수산동물을 원료로 한 천연 anserine의 추출을 위해 여러 추출방법을 이용하여 연어로부터 anserine을 추출하였으며 각 추출방법에 따른 불순물(protein, iron)과 anserine의 함량 변화를 살펴보았다. Anserine 추출용 시료로서 연어의 적합성을 알아보기 위해 아미노산 함량을 분석한 결과 전체 아미노산 함량 중 anserine은 약 43.06%를 차지하는 것으로 나타나 추출용 시료로 적합한 것으로 나타났고, 추출방법에 따른 함량 변화를 살펴보기 위해 가열처리와 한외여과처리, 그리고 이온교환 및 한외여과처리를 이용한 추출방법에 따른 함량 변화를 살펴본 결과 $60^{\circ}C$, $80^{\circ}C$, $100^{\circ}C$로 가열 처리한 경우 $100^{\circ}C$ 가열처리구가 총철과 단백질 등 불순물 제거에 가장 효과적이었으나, anserine 함량의 감소가 큰 것으로 나타났다. 한외여과방법을 통해 분자량을 조절한 추출물의 함량 변화를 측정한 결과에서는 가열처리 추출물보다 단백질 약 81%, 총철 함량이 약 97% 감소하는 결과를 나타내었으며, anserine의 함량 변화는 가열처리구와 비슷한 수준을 유지하였다. 또한, Dowex $1{\times}8$ 수지를 이용하여 1차 이온교환을 하고 이온 교환한 추출물을 이용하여 MW 500까지 한외여과처리를 한 후 CM-cellulose를 이용하여 2차 이온교환을 병행한 추출물의 함량 변화를 살펴본 결과, 가열-한외여과처리 추출물보다 단백질 및 총철의 함량은 감소했지만 상대적으로 높은 anserine 함량을 나타내어 이온교환-한외여과처리 추출방법이 단백질 및 총철과 같은 불순물의 함량은 낮추면서 상대적으로 anserine의 함량을 높일 수 있는 추출방법이라 사료된다. 또한, 이러한 경향은 전기영동 및 HPLC를 통해 확인할 수 있었으며, LC/MS를 이용하여 표품 anserine과 1차 이온교환-한외여과처리 추출물, 2차 이온교환 추출물을 분석한 결과 모두 동일한 분자량(MW 240)을 가진 물질로 확인되어 1, 2차 이온교환 및 한외여과처리를 병행한 추출법이 anserine의 추출에 있어서 효율적인 방법으로 생각한다.
Effects of extraction methods on reducing concentrations of pro-oxidants (total iron and protein) of salmon was determined. For development of the extraction process, the effectiveness of several extraction methods was determined and compared, including heat treatment (60, 80, and $100^{\circ}C$), ion exchange and carboxymethyl (CM)-cellulose column chromatography, and ultrafiltration (UF). Protein, total iron, and anserine contents of salmon extracts were 23.64 mg/mL, $16.20{\mu}g/mL$, and 5.47 mg/mL in non-heated extracts, 7.40 mg/mL, $2.32{\mu}g/mL$, and 5.20 mg/mL in heated extracts at $60^{\circ}C$, 7.64 mg/mL, $1.20{\mu}g/mL$, and 5.21 mg/mL at $80^{\circ}C$, and 7.04 mg/mL, $0.68{\mu}g/mL$, and 4.04 mg/mL at $100^{\circ}C$, respectively. Heating and UF decreased contents of protein and total iron, whereas only UF slightly decreased anserine content. Application of the primary ion exchange method increased the content of anserine up to 16%. Protein and total iron contents by the primary ion exchange method decreased by 70 and 98%, respectively. Secondary ion exchange (CM-cellulose) treatment after primary ion exchange and UF resulted in lower anserine content than the primary ion exchange method. However, the content of impurities (protein, total iron) was lower than in all other salmon extracts. Therefore, primary ion exchange, UF, and secondary ion exchange method were the best extraction processes in this study.