Establishment of Plasma Working Standards for the Performance and Quality Assurance of NAT Screening Tests for HIV, HCV and HBV

HIV, HCV와 HBV 유전자 분석시약의 성능 및 품질관리용 Plasma Working Standards 제조에 관한 연구

Background: Since Jan. 2012, for performance evaluation of viral reagents, analysis of domestic samples has been recommended in order to obtain approval from the KFDA when they are first introduced to Korea. This regulation requires the standard domestic materials driven from locally infected samples. We tried manufacturing the plasma working standards of HBV, HCV, and HIV NAT using a mixed titer of viral loads. Methods: Forty three HBV DNA positive plasmas, 25 HCV RNA positive plasmas, and 26 HIV RNA positive plasmas were evaluated according to viral load and genotype. Several plasma units, which had high-titer viral loads and the common viral genotypes in Korea, were selected as the source materials for each viral standard. To adjust the appropriate concentration based on the detectable range of variable viral reagents, the source plasma was diluted to several concentrations, divided into small vials, and analyzed for quantification. Results: The 13 plasma working standards, which had variable viral loads for the mixed titer performance panel of HIV, HCV, and HBV NAT, were produced. Conclusion: These national standard materials were first produced in order to supply the mixed titer performance panel for the viral NAT reagent of the level IV transfusion related high-risk group in Korea.

배경: 2012년 1월부터 국내에 신규로 도입되는 고위험군 바이러스 검사시약은 국내 검체를 이용한 성능 시험분석을 실시하여 식품의약품안전청 허가를 득하도록 일부 규정이 개정되었다. 이러한 바이러스 진단시약의 성능시험과 품질관리 규정을 이행하기 위해서는 국내 검체에서 유래된 국가표준물질이 필요하다. 이에 본 연구에서는 바이러스 핵산증폭검사시약의 성능평가와 품질관리를 위하여 다양한 농도로 구성된 HBV, HCV와 HIV의 핵산증폭검사용 혈장유래 표준물질(plasma working standards)을 제조하고자 하였다. 방법: 수혈 부적격의 HCV RNA 양성혈장 43단위, HCV RNA 양성혈장 25단위, 그리고 HIV RNA 양성혈장 26단위에 대해 핵산 정량검사와 유전자형 검사를 실시하였다. 이를 바탕으로 국내에서 유행하는 바이러스의 유전자형을 가진 고농도의 원료혈장을 선정하였다. 또 표준물질의 다양한 농도는 국내외 검사시약의 검출범위에 근거하여 적정한 농도범위를 선택한 후, 다양한 농도로 원료물질을 희석하고, 분병 처리 한 후 정량적으로 분석하였다. 결과: HBV, HCV와 HIV의 체외진단분석기용 핵산증폭검사의 성능평가용 plasma working standards는 총 13종의 다양한 농도물질로 제조되었다. 결론: 국내에서 혈액관련 고위험군 HBV, HCV와 HIV의 체외진단용 핵산증폭검사 시약의 성능 평가에 필요한 바이러스 핵산 검사용 국가표준물질을 처음 제조하여 그 기술을 수립하였다.