Optimization of Ethanol Extraction Conditions for Antioxidants from Zizyphus jujuba Mill. Leaves Using Response Surface Methodology

반응표면분석법을 이용한 대추잎 항산화물질의 에탄올추출조건 최적화

The leaves of Zizyphus jujuba have been used for various purposes including medicine and nutrition. In this study, the conditions for the ethanol extraction of antioxidant from Zizyphus jujuba were optimized using response surface methodology (RSM). A Box-Behnken design containing 15 experimental runs with three replicates was employed to study the effects of solvent extraction conditions such as extraction temperature ($^{\circ}C$, $X_1$), extraction time (min, $X_2$), and ethanol concentration (%, $X_3$) on the extraction yield of antioxidants from Zizyphus jujuba. The yields of total polyphenols and total flavonoid, and electron donating activity (EDA) were considered as response variables. The second-order polynomial model gave a satisfactory description of the experimental results showing different patterns of extraction conditions with variation in the linear, quadratic, and interaction effects of the independent variables. Based on four-dimensional RSM, one of the optimized sets of conditions was 45% ethanol, $45^{\circ}C$, and an extraction time of 15 min. Under the optimal conditions, the predicted values were 177.64 mg/g dry basis, 35.99 mg/g dry basis, and 86.14% Vit.C equivalents for total polyphenols, total flavonoids, and EDA, respectively. The experimental values showed good agreements with the predicted values.

대추잎 항산화 물질의 고효율 추출을 위한 에탄올 용매추출조건을 반응표면분석법을 사용하여 최적화하였다. Box-Behnken design에 따라 추출공정 조작변수(온도, 시간, 에탄올 농도)를 독립변수로, 이에 따라 영향을 받는 종속변수(총 폴리페놀 함량, 총 플라보노이드 함량, 전자공여능)를 설정하여 실험하였다. 추출물의 총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량은 시간과 온도의 영향을 거의 받지 않으며, 용매비가 높을수록 증가하다가 최고점을 보인 후 다시 감소하는 경향을 나타내었다. 전자공여능 또한 시간과 온도의 영향보다는 용매비에 영향을 많이 받는데, 에탄올 농도가 높을수록 전자공여능이 높게 측정되었다. 추출물의 특성을 모두 만족시키는 최적 추출조건 범위 내에서 임의의 조작조건(온도 $45^{\circ}C$, 시간 15분, 에탄올 농도 45%)을 설정하였다. 최적조건에서 예측값과 실험값을 비교한 결과, 유사한 값을 보여주어 회귀식이 신뢰할 수 있음을 알 수 있었다.