Effect of Collective Methods on the Collection Efficiency, Blastocyst and Pregnancy Rate after IVP Embryo Transfer in Hanwoo

한우 난소의 채란방법이 회수율, 배발달율 및 수태율에 미치는 영향

  • Lee J. W. (Department of Animal Science and Technology, College of Agriculture and Life Science, Sunchon National University) ;
  • Jung S. Y. (Department of Animal Science and Technology, College of Agriculture and Life Science, Sunchon National University) ;
  • Son B. H. (Department of Animal Science and Technology, College of Agriculture and Life Science, Sunchon National University) ;
  • Han K. H. (Hanil Animal Hospital) ;
  • Oh I. S. (Animal Breeding Service in Korea) ;
  • Seo H. J. (Department of Animal Science and Technology, College of Agriculture and Life Science, Sunchon National University) ;
  • Kong I. K. (Department of Animal Science and Technology, College of Agriculture and Life Science, Sunchon National University)
  • 이정우 (순천대학교 농업생명과학대학 동물자원과학과) ;
  • 정수용 (순천대학교 농업생명과학대학 동물자원과학과) ;
  • 손병훈 (순천대학교 농업생명과학대학 동물자원과학과) ;
  • 한기호 (한일가축병원) ;
  • 오인석 (에이비에스인코리아) ;
  • 서현준 (순천대학교 농업생명과학대학 동물자원과학과) ;
  • 공일근 (순천대학교 농업생명과학대학 동물자원과학과)
  • Published : 2005.04.01

Abstract

This study was undertaken to access the effect of collection methods on the collection efficiency, blastocyst rate and pregnancy rate after IVP embryo transfer. The ovaries of Hanwoo were obtained from an abattoir and kept on 25 to $28^{\circ}C$ and transported to laboratory within 4 hrs. The oocytes were collected by aspiration of follicles $(2\~6\;mm)$ with or without slicing of ovaries after aspiration. The oocytes were matured in vitro (IVM) for 20 to 24 hrs in TCM-199 supplemented with $10\%$ fetal bovine serum at $39^{\circ}C$ under $5\%\;CO_{2}$ in air. Following routine IVM/IVF procedure, the oocytes and presumed zygotes were cultured for three day in CRlaa medium with BSA. The cumulus cells at 2 to 8-cell stage of embryos removed then the embryos and were cultured in CRlaa medium containing $10\%$ fetal bovine serum in $5\%\;CO_{2}$ at $39^{\circ}C$. The fresh blastocysts cultured for 7 to 9 days were transferred into recipients. The numbers of oocytes recovered form two different methods, the aspiration and slicing after aspiration, were compared to know what. The number of oocytes per ovary was 8.2 and 6.5 in aspiration combining slicing, and aspiration groups, respectively (p<0.05). The cleavage rate in aspiration method are significantly (p<0.05) high than those in slicing post aspiration $(27.9\%)$, and aspiration $(25.5\%)$. The pregnancy .ate in aspiration method $(62.5\%)$ was high than that in slicing method after aspiration $(54.4\%)$. The pregnancy rates of aspiration method and slicing method after aspiration in nullipara $(58.1\%\;vs\;68.2\%)$ was high than that in pluripara $(49.5\%\;vs\;53.2\%)$. The results obtained that the increased number of oocytes per ovary in slicing method after aspiration could be better than that in aspiration method. Pregnancy rate in aspiration method was slightly higher in than that in slicing method after aspiration.

도축장에서 회수한 한우 난소로부터 난자를 회수하기 위한 방법으로 흡입법 후 세절법과 흡입법으로 난자를 회수하여, 난자의 회수율과 채란된 난자를 체외수정 후 발달율과 수정란 이식 후 수태율에 영향을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 난자 회수율은 각 난소당 회수된 난자수는 흡입 후 세절법이 8.2개, 흡입법이 6.5개로서 흡입 후 세절법을 병용하는 것이 난자 회수율에서 유의적으로 많았다. 2. 채란방법에 따른 체외수정란의 분할율은 흡입 후 세절법이 $75.8\%$, 흡입법은 $84.4\%$로서 유의적이 차이를 보이지 않았다. 3. 배반포 발달율은 흡입 후 세절법이 $28.3\%$, 흡입법은 $22.8\%$로서 흡입 후 세절법이 유의적으로 높았다. 4. 난소당 배반포수에서는 흡입 후 세절법이 1.8개로서 흡입법의 1.1개보다 유의적으로 많은 배반포수를 생산할 수 있었다. 5. 채란별 수태율 조사 결과 흡입 후 세절법이 $54.4\%$, 흡입법이 $62.5\%$로서 흡입법으로 채란된 난자로부터 얻어진 수정란을 이식하였을 때 높은 수태율을 얻을 수 있었다. 6. 경산우와 처녀우에 수정란이식 후 수태율은 경산우는 흡입법 후 세절법이 $54.4\%$, 흡입법은 $62.5\%$ 나타났고, 처녀우는 흡입법 후 세절법이 $58.1\%$, 흡입법은 $68.2\%$로서 경산우와 처녀우에 관계없이 흡입법으로 채란한 난자로부터 생산된 수정란을 이식하였을 때 수태율이 유의적으로 높은 결과를 얻었다. 이상의 결과에서 채란방법에 따른 난소당 이용 가능한 난자의 회수율은 흡입 후 세절법을 이용함으로서 많은 난자와 수정란을 생산할 수 있었다. 그리하여 한정된 난소를 효율적으로 활용하기 위해서는 흡입 후 세절법을 이용하는 것이 전체적인 효율 향상에 도움이 될 것으로 판단된다.

Keywords

References

  1. Broadbent PJ, Stewart M and Dolman DE. 1991. Recipient management and embryo transfer. Theriogenology, 27:125-139
  2. Carolan C, Monaghan P, Gallagher M and Goden I. 1994. Effect of recovery method on yield of bovine oocytes per ovary and their developmental competence after matruation, fertilization and culture in vitro. Theriogenology, 41:1061-1068 https://doi.org/10.1016/S0093-691X(05)80029-9
  3. Donaldson LE. 1982. Embryo transfer in cattle. Rio Vista International Inc. San Antonio Texas. pp. 54-65
  4. Elsden RP, Seidel GE Jr, Takeda T and Farrand GD. 1982. Field experiments with frozenthawed bovine embryos transferred nonsurgically. Theriogenology, 17:1-10 https://doi.org/10.1016/0093-691X(82)90110-8
  5. Hamano Sand Kuwayama M. 1993. In vitro fertilization and development of bovine oocytes recovered from the ovaries of individual donors: A Comparison between the cutting and aspiration method. Theriogenology, 39:703-712 https://doi.org/10.1016/0093-691X(93)90255-4
  6. Iwasaki ST, Kono Nakahara T, Shioya Y, Fukushima M and Hanada. A. 1987. New methods for the recovery of oocytes from bovine ovarian tissue in relation to in vitro maturation and fertilization. Japanese J. Anim. Reprod., 33:188-192 https://doi.org/10.1262/jrd1977.33.188
  7. Kay GW and Frylinck S. 1992. Recovery of ovine follicular oocytes: Effect of different methods on yield and quality. Proceedings of the Twelfth International Congress on Anim. Reprod. (Hague), 1:345-347
  8. King KK, Seidel GE Jr and Elsden RP. 1985. Bovine embryo transfer pregnancies. II. Lengths of gestation. J. Anim. Sci., 61:758-765 https://doi.org/10.2527/jas1985.614758x
  9. Mayr B, Schellander K, Schleger Wand Fuher F. 1986. Bovine oocytes: in vitro maturation and IVF study. Proceeding of Congress on Future Aspects in Human in vitro Fertilization (Vienna). J. In vitro Fert. Embryo Trans., 3:76-77
  10. Mogas TA, Maritino MF, Palomon MJ and Paramio MT. 1992. Effect of method of recovery on the number and type of oocytes obtained for IVM. J. Reprod., 52:90 (abst.)
  11. Sato E, Matsuo MM and Miyamoto H. 1990. Meiotic maturation of bovine oocytes in vitro improvement of meiotic competence by dibutyl cycle adenosine 3',5'-monophosphate. J. Anim. Sci., 68:1182-1187 https://doi.org/10.2527/1990.6841182x
  12. Seidel GE. 1980. Critical review of embryo transfer procedures with cattle. Fert and Embryo Develop, Plenum Press, pp. 323-353
  13. Suss U and Madison. 1983. Morphology and meiotic development of bovine oocytes cultured in vitro. Archives of Andrology, 11:217-218
  14. Takagi TK, Mori T, Takahashi S, Sugawara Sand Masaki J. 1992. Differences in development of bovine oocytes recovered by aspiration or by minicing. J. Anim, Sci., 70:1923-1927 https://doi.org/10.2527/1992.7061923x
  15. Wright RW Jr and Bondioli KR. 1981. Aspects of in vitro fertilization and embryos culture in domestic animals. J. Anim. Sci., 53:702-729 https://doi.org/10.2527/jas1981.533702x
  16. Xu K, Greve T, Callesen H and Hyttel P. 1988. Birth of a calf following in vitro fertillzation of in vitro matured oocytes. J. Reprod. Fertil., 1:18 (abst.)
  17. 오성종, 양보석, 김희석, 이근상, 김강식, 스피어스, 아우리. 1986. 소의 발정 동기화 및 동결수정란이식에 관한 연구. 한축지, 28:468-473
  18. 박충생, 공일근, 노규진, 주영국, 송상현, 황영균, 박준규, 조성근, 전병균, 이경미, 윤희준, 최민철, 곽대오, 이효종, 최상용. 1994. 체외성숙, 수정 및 배양된 한우 체외수정란의 유우이식에 의한 산자 생산. 한국가축번식학회지, 18:47-54
  19. 박희성, 이지삼, 정장용. 2000. 한국 재래산양의 난포란의 회수와 체외수정란에 관한 연구. 한국수정란이식학회지, 15:287-293
  20. 조상래, 강태영, 박종식, 허창기, 송상현, 이효종, 최상용. 2001. 채취방법에 따른 소 난포란의 회수율 및 수정란의 발달율. 한국수정란이식학회지, 16:99-105
  21. 한용만, 이철상, 이정호, 김선정, 신상태, 김동훈, 이훈택, 정병현, 정길생, 김영수, 김영훈, 이곤세, 김교국, 황윤식, 이경광. 1994. 체외수정란 유래의 송아지 생산. 한국가축번식학회지, 18:17-13
  22. 황우석, 조충호, 이병천, 신태영, 노상호, 김성기, 전병준, 이강남, 신언익, 임흥순. 1993. 한우정액 유래 체외수정 송아지 생산에 관한 연구. 한국수정란이식학회지, 8:143-149