초록
식물성유 첨가시 배양시간에 따른 지방산염의 형성 정도와 발효성상 및 NDF 소실율에 미치는 영향을 규명하고자 in vitro 시험을 실시 하였다. 기질은 알팔파 건초로 하고 1) oil 무첨가구, 2) 대두유 10%첨가구 및 3) 옥수수유 10%첨가구로 하였으며, oil 첨가 수준은 기질중량 건물 기준으로 첨가하였다. 발효성상 및 NDF 소실율을 위한 시험에서는 120ml serum bottle을 사용하여 3반복 실시하여 pH, $NH_3-N$, VFA농도 및 건물과 NDF 소실율을 분석하엿다. 지방산 분획을 위한 시험에서는 60ml serum bottle을 사용하요 3반복 실시하여 NEFA, EFA 및 FAS의 형성 정도를 분석하였다. pH는 배양시간이 증가함에 따라 유읭적으로 감소하였고, $NH_3-N$ 농도는 유의하게 증가하였다(P<0.0001). 건물 및 NDF 소실율은 처리구, 배양시간 및 oil간 유의하게 차이를 보여주었다(P<0.05). 총 휘발성 지방산 농도는 배양시간이 증가함에 따라 유의하게 증가하였다(P<0.0001). Acetate는 시험구 모두 배양시간이 증가함에 따라 유의적으로 감소하였고(P<0.0001), 대조구에 비해 oil 첨가구가 유의적으로 낮아졌다(P<0.05). Propionate는 시험구 모두 배양시간이 증가함에 따라 유의적으로 증가하였지만(P<0.0001), 처리구 및 oil간 효과는 없었다. Oil 첨가구에서 A/P비율이 유의하게 낮아졌다(P<0.05). EFA는 배양시간이 증가함에 따라 유의하게 감소하였고(P<0.0001), NEFA는 EFA의 가수분해로 인하여 증가하였다. 배양시간 48시간에서는 NEFA가 양이온과 결합하여 FAS의 형성 비율이 유의적으로 증가하였다(P<0.0001). 특히 $C_{18:0)$의 FAS 형성은 배양시간 48시간에서 대두유 및 옥수수유 첨가구에서 각각 12.53 및 15.17mg/g DM으로 0시간에 비해 각각 27.5 및 32.5배 증가하였다(P<0.0001). 배양시간이 증가할수록 칼슘을 포함한 양이온 함량이 높은 알팔파가 분해되면서 양이온이 용해되어 유리된 지방산과 결합하여 지방산염을 형성하게 된다. 이때 불포화지방산보다는 포화지방산이 양이온과 반응하여 지방산염을 형성하기 쉽다. 또한 $C_{16:0}$ 이상의 장쇄지방산이 주로 지방산염을 형성하였다. 이러한 특성 때문에 배양액내에 유리된 지방산이 염을 형성하기 쉽고 oil 첨가시 발생하는 발효성상 및 NDF소실율에 미치는 부의 영향을 최소화 한 것으로 사료된다.
In vitro experiments were conducted to determine the formation of fatty acid soaps (FAS) and neutral detergent fiber (NDF) disappearance rate. The substrates were a basal alfalfa hay containing 1) no oil, 2) 10% soybean oil, 3) 10% com oil, on a weight basis. All the substrates were incubated in triplicate for 0, 3, 6, 12, 24 and 48h in each experiment. After the incubation in the first experiment serum bottles (6oml) were analyzed for nonesterified, esterifed and fatty acid soaps contents. The serum bottles (120mI) from the second experiment were analyzed for pH, $NH_3-N$ and VFA concentration, and dry matter and NDF disappearance rate. pH decreased and the concentration of NH3-N increased significantly with longer incubation time (P<0.0001). The disappearance rates of dry matter and NDF significantly varied with feed, incubation time and oils (P<0.05). The molar concentration of total VFA increased and proportion of acetate significantly decreased with incubation time (P<0.0001), but the proportion of propionate significantly increased with longer incubation time (P<0.0001). Addition of oils to diet lowered the ratio of acetate:propionate (P<0.05). The esterified fatty acids (EFA) decreased with increasing incubation time (P<0.0001), and nonesterified fatty acids (NEFA) increased due to lipolysis of EFA, NEFA then reacted with cations to increase formation of FAS. The formation of FAS increased significantly at 48h of incubation time (P<0.0001). Especially, formation of stearic acid soaps was 27.5 and 32.5 folds with soybean oil and com oil supplements, respectively, by 48h of incubation time (P<0.0001). Alfalfa hay had higher cation contents, particularly Ca, which react with NEFA and FAS can be formed with longer incubation time. Saturated fatty acids had a higher proportion of FAS than did unsaturated fatty acids, suggesting that the former may react more extensively with cations. FAS contents increased with increasing chain length of the fatty acids. Since added vegetable oils fonned FAS, it might decrease negative effects on in vitro fermentation characteristics and NDF disappearance rate.