생쥐 신생자 난소내 생식 세표에서 세포 사멸 관련 단백질의 발현

Expression of Apoptosis-Related Proteins on Germ Cells in Neonatal Mouse Ovary

  • 조동제 (연세의대 산부인과학교실) ;
  • 박철홍 (한양대학교 생명과학과) ;
  • 양현원 (을지의과대학교 생명과학연구소) ;
  • 박주현 (연세의대 산부인과학교실) ;
  • 윤정미 (연세의대 산부인과학교실) ;
  • 김세광 (연세의대 산부인과학교실) ;
  • 윤용달 (한양대학교 생명과학과)
  • 발행 : 2004.06.01

초록

생쥐 신생자 시기에 생식 세포의 사멸 기전을 알아보기 위하여 세포 사멸을 보이는 생식 세포에서 세포 사멸 관련 단백질인 caspase-3, caspase-activated DNase(CAD), Bax 및 Fasnas ligand의 발현을 조사하였다. 활성화된 caspase-3와 CAD의 면역화학적 염색 결과 일차 및 이차 난포내 TUNEL 양성을 보이는 세포 사멸 난자에서 발현되는 것을 관찰하였다. CAD 또한 TUNEL 양성을 보이는 세포 사멸 난자에서 염색되었다. 활성화된 caspase-3와 CAB에 양성을 보이는 대부분의 난자들은 폐쇄의 형태학적 특징이라고 할 수 있는 세포질 내 공포가 관찰되었다. Bax는 세포질 내 공포가 존재하는 세포 사멸된 난자에서 염색되었다. Fas ligand 또한 TUNEL 양성을 보이는 난자에서 염색되었다. 이러한 TUNEL 양성을 보이는 생식 세포에서 활성화된 caspase-3와 CAD가 염색된 결과는 생쥐 난포 발달 초기 단계에 caspase-3와 CAD가 생식 세포의 세포사멸에 중요한 역할을 할 수 있다는 것을 보여주고 있다. 또한 TUNEL 양성을 보이는 난자에서 Bax와 Fas ligand가 발현된 결과는 이러한 단백질이 난자의 세포 사멸을 조절하는 요소로 작용할 수 있을 것으로 사료된다.

To investigate the mechanism of germ cell death in postnatal stage of mouse, the involvement of apoptotic executioners, caspase-3 and caspase-activated DNase(CAD), and apoptotic initiators, Bax Fas and Fas ligand, in the germ cell death has been studied. Immune-labels of active caspase-3 and CAD were located in TUNEL-positive, apoptotic, oocytes as well as normal oocytes of primary or secondary follicles. CAD immune-labels were also detected in the nucleus of TUNEL-positive oocytes. Most of oocytes showing positive immune-labeling of active caspase-3 or CAD had vacuoles in their cytoplasm, which is the morphological characteristic of oocyte during folliclar atresia. Bax immune-stains were detected in the atretic oocytes which showed the vacuole in their cytoplasm. Positive immune-labels for Fas ligand was localized in TUNEL-positive or atretic oocytes. Presence of immunoreactivity of active caspase-3 and CAD in TUNEL-positive germ cells implicate that active raspase-3 and CAD might play a role in germ cell apoptosis during early development of mouse ovarian follicle. Immunohistochemical localization of Bax and Fas ligand in TUNEL-positive oocytes suggests that these might be the most plausible modulator of oocyte apoptosis.

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