Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry (대한소아치과학회지)
- Volume 28 Issue 2
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- Pages.238-246
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- 2001
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- 1226-8496(pISSN)
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- 2288-3819(eISSN)
THE EFFECT OF BMP REGULATED SMAD PROTEIN ON ALKALINE PHOSPHATASE GENE EXPRESSION
Smad에 의한 alkaline phosphatase 유전자의 발현 조절기전
- Kim, Nan-Jin (Department of Pediatric Dentistry, College of Dentistry, Kyungpook National University) ;
- Ryoo, Hyun-Mo (Department of Oral Biochemistry, College of Dentistry, Kyungpook National University) ;
- Kim, Hyun-Jung (Department of Pediatric Dentistry, College of Dentistry, Kyungpook National University) ;
- Kim, Young-Jin (Department of Pediatric Dentistry, College of Dentistry, Kyungpook National University) ;
- Nam, Soon-Hyeun (Department of Pediatric Dentistry, College of Dentistry, Kyungpook National University)
- 김난진 (경북대학교 치과대학 소아치과학교실) ;
- 류현모 (경북대학교 치과대학 구강생화학교실) ;
- 김현정 (경북대학교 치과대학 소아치과학교실) ;
- 김영진 (경북대학교 치과대학 소아치과학교실) ;
- 남순현 (경북대학교 치과대학 소아치과학교실)
- Published : 2001.05.31
Abstract
Bone morphogenetic proteins(BMPs), members of the transforming growth factor
본 실험은 탁월한 골유도능으로 관심의 대상이 되고 있는 BMP의 세포내 신호 전달자로 알려진 Smad 1과 Smad 5가 조골세포 초기 분화표지인자인 ALP 유전자의 발현에 미치는 영향 및 그 조절기전을 알아보고자 하였다. BMP 처리 없이도 Smad에 의해 ALP가 발현되는가를 알아보기 위해 Smad 1과 Smad 5가 각각 stably transfection된 C2C12 세포를 3일간 배양후 histochemical assay를 하였고, Smad 1과 Smad 5의 expression vector와 ALP promoter vector를 transient co-transfection한 후 ALP promoter activity를 측정하였다. Smad에 의한 BMP의 효과를 알아보기 위해서 100ng/ml의 BMP-2를 처리한 군과 처리하지 않은 군으로 나누어 세포를 배양한후 ALP 유전자의 발현을 northern blot analysis로 확인 하였다. Smad가 ALP 유전자의 발현을 직접적으로 조절하는가를 알아보기 위해서는 단백질 합성억제제인 cycloheximide를 전처리하여 ALP 유전자의 발현을 northern blot analysis하였다. 이상의 실험결과 다음과 같은 결론을 얻었다.