Clinical Utility of Bronchial Washing PCR for IS6110 and Amplicor for the Rapid Diagnosis of Active Pulmonary Tuberculosis in Smear Negative Patients

객담도말 음성인 폐결핵환자의 기관지세척액에서 Amplicor PCR과 IS61110 PCR의 임상적 유용성에 관한 비교 연구

Background : There is a well recognized interlaboratory variation in the results using the polymerase chain reaction(PCR) to detect the IS6110 sequence. The clinical utility of a commercially developed PCR test(Amplicor) in bronchial washings for detecting pulmonary tuberculosis in smear negative patients was evaluated. The sensitivity and specificity of Amplicor was compared with that of an in-house PCR test used for detecting the IS6110 sequence of Mycobacterium tuberculosis(M.tbc) in the bronchial washing fluid. Methods : 66 patients whose sputum smear for M. tbc were negative or who could not produce any sputum were recruited from January 1999 to July 1999. They all had a bronchoscopy performed to determine if there were signs of hemoptysis, patients who could not cough up sputum, lung lesion that exclude pulmonary tuberculosis. Pulmonary tuberculosis was diagnosed on the basis of a positive culture or a response to anti-tuberculosis therapy. Results : 19 patients with tuberculosis were identified and samples from 16 patients were later confirmed by culture. Bronchial washing for Amplicor PCR revealed a sensitivity, specificity, positive and negative predictive values of 94.7%, 97.9%, 94.7%, 97.9%, respectively. Using IS6110 based PCR, the sensitivity, specificity, positive and negative predictive values were of 73.7%, 87.2%, 70%, 89.1% respectively. Conclusion : Bronchial washing for Amplicor PCR proved to be more useful than IS6110 based PCR in rapidly diagnosing smear negative pulmonary pulmoary tuberculosis in patients where tuberculosis was likely to be differential and rapid diagnosis was essential for optimal treatment.

연구배경 : 임상에서 흉부 엑스선상 폐결핵이 의심되나 객담 도말에서 음성이거나 객담배출을 못하는 환자에서 신속한 진단을 위해 기관지세척액에서 상품화된 Roche사의 Amplcor M. tuberculosis kit와 IS6110 in-house PCR의 유용성을 알아보고자 하였다. 방 법 : 객담 항산균도말에서 음성인 환자 혹은 결핵과 감별진단이 필요한 환자를 대상으로 기관지내시경을 시행하여 기관지세척액에서 항산균 도말, 결핵균배양, IS6110 PCR검사법, Roche사의 Amplicor PCR를 동시에 시행하였다. 결 과 : 기관지 세척액을 통한 항산균도말에서 활동성 결핵환자 19명 중 3명이 진단되어 민감도 15.8% 이었고 배양검사는 19명 중에 16명으로 84.2% 이었다. 기관지세척액을 이용한 IS6110 PCR의 경우 19명 중 14명이 양성으로 민감도는 87.2% 이었다. Amplicor M. tuberculosis kit는 19명에서 18명이 양생으로 민감도는 94.7% 이고 특이도는 97.9% 이었고 3명은 PCR과 임상양상으로 진단이 가능하였다. 위양생은 IS6110 PCR은 6명 이었고 Amplicor PCR은 1명이었다. 개별 검사법의 양성 예측도는 기관지 세척액 도말과 배양검사는 각각 100% 이었고 IS6110 PCR은 70%, Amplicor PCR은 94.7% 이었다. PCR검사법의 음성예측도와 정확도는 IS6110 PCR은 89.1%, 83.3% 이고 Amplicor PCR은 97.9%, 96.9% 이었다. 결 론 : 객담도말 음성인 환자의 진단에서 기관지경세척액을 이용한 Amplicor PCR법은 IS6110 PCR에 비해 폐결핵 진단의 감수성이 높았고 위양성률도 낮아 결핵을 신속하게 진단할 수 었어 불필요한 치료지연을 피할 수 있었다. 상품화된 PCR 검사법은 임상에서 결핵의 진단율을 높이고 수시간내 결과를 빨리 확인할 수 있는 장점은 있으나 통상적인 검사로 활용하기 위해서는 향후 연구가 더 필요할 것이다.