The Screening of Aflatoxin Producing Fungi from Commercial Meju and Soy Bean Paste in Western Gyeongnam by Immunoassay

면역분석기법을 이용한 서부경남 시판 메주 및 된장에서의 Aflatoxin 생성균 검색

Generally, non-aflatoxigenic fungi, such as Aspergillus oryzae, and Aspergillus are main microflora in Korean traditional fermented foods including Meju and soybean paste, but sometimes, Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus can be contaminated and accumulated aflatoxins during fermentation and storage. So the screening of aflatoxigenic strains in fermented traditional food is very important to improve the sanitary quality of those foods. In this work, we screened aflatoxin producing fungi from commercial Meju and soybean paste in Western Gyeongnam by immunoassay. Samples were randomly purchased from market of the commercial Meju(10 EA) and soybean paste(20 EA) in nine areas of Western Gyeongnam. Of the samples collected,24 strains and 22 strains of Aspergillus sp. were isolated from Meju and soybean paste, respectively. The isolated strains were cultured on SLS media at $25^{\circ}C$ for 15 days. The cultured broth were extracted with ethyl acetate and were analysed to determine aflatoxin B$_1$(AFB$_1$) by direct competitive ELISA(DC-ELISA). Six strains(25%) isolated from Meju, and 2 strains(9%) isolated from saybean paste, were confined as aflatoxin producing strains. The average range of aflatoxin productivity of isolates from Meju was 54.6 $\pm$ 38.7 ng/ml and that from soybean paste was 11.1 $\pm$ 8.6 ng/ml, respectively. Among them, isolated strain No. M-5-4 produced a high level of AFBl and showed 98.26 ng/ml of AFB$_1$. Every isolates were also re-confined their AFB$_1$productivity by thin layer chromatography(TLC). The TLC results also showed same trend as DC-ELISA results. As the above results, the screening of hazard mycotoxigenic fungi from traditional fermented foods should be necessary for the safety and the application of HACCP system in the food manufactory in Korea.

일반적으로 메주나 된장 등의 한국 전통발효식품에는 Aspergillus aryzae나 A. nigar 등과 같은 곰팡이독소를 생성하지 않는 균이 주로 서식하는 것으로 알려져 있다. 그러나 때로는 A. flavus나 A. paraciticus와 같은 유해곰팡이가 오염되어 발효나 저장 중에 aflatoxin이 축적될 수 도 있다. 따라서 이들 전통발효식품에서의 aflatoxin 생성균의 검색이 이들 식품의 안전성 확보를 위해 매우 중요하다고 생각된다. 본 연구에서는 면역분석기법을 이용하여 서부경남 시판메주 및 된장에서 aflatoxin 생성균을 검색하였다. 시료로는 서부경남 9개 지역으로부터 메주 10개와 된장 20개를 수집하였고, 수집된 시료로부터 메주에서는 24개 그리고 된장에서는 22개의 Aspergillus속 균을 분리하였다. 분리균들은 SLS 배지에 접종하여 $25^{\circ}C$에서 15일간 배양한 다음, 배양액을 ethyl acetate로 추출하고, DC-ELISA법으로 배양물중의 AFB$_1$을 측정하였다. 그 결과 메주로부터 분리된 균주 중에는 6균주가, 된장에서 분리된 균주에는 2균주가 AFB$_1$을 생산하는 것으로 확인되었다. 메주에서 분리된 6균주의 AFB1 생성량은 평균 54.6$\pm$38.7ng/ml 이었고, 된장에서 분리한 2균주는 평균 11.1 $\pm$ 8.6 ng/ml 의 AFB$_1$을 생산하였다. 그 중 분리균 No. M-5-4는 98.26 ng/ml의 AFB$_1$을 생산하여 가장 높은 생성능을 보였다. 아울러 TLC에 의해 aflatoxin생성능을 재확인 한 결과 DC-ELISA의 결과와 유사하였다. 이상의 결과로 미루어 보아 식품의 안전성과 한국에서의 전통발효식품산업에의 HACCP 시스템 도입을 위해 발효식품에서의 유해곰팡이독소 생성균의 검색은 필요하다고 사료되는 바이다.