Effects of Wounding and Inoculation Time on Agrobacterium -mediated Transformation in Capsicum annuum L.

상처처리와 접종시간이 Agrobacterium에 의한 고추 형질전환에 미치는 영향

  • Jeon, Young-Ju (Major in Horticulture, Division of Life Science, Kyung Hee University) ;
  • Park, Young-Doo (Major in Horticulture, Division of Life Science, Kyung Hee University) ;
  • Choi, Geun-Won (Major in Horticulture, Division of Life Science, Kyung Hee University)
  • 전영주 (경희대학교 생명과학부 원예학 전공) ;
  • 박영두 (경희대학교 생명과학부 원예학 전공) ;
  • 최근원 (경희대학교 생명과학부 원예학 전공)
  • Published : 2000.12.31

Abstract

The present study was conducted to improve the efficiency of transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens in hot pepper. Both regeneration ratio and transformation frequency after the cocultivation with A. tumefaciens were affected by inoculation time and artificial wounding. Transformation frequency was increased over 50% by combining artificial wounding with 120 s of inoculation treatment. Confirmation for the transformation of regenerated shoots was carried out by histochemical ${\beta}$-glucuronidase assay and polymerase chain reaction analysis using npt II primer.

본 연구는 고추에서 Agrobacterium tumefaciens를 이용한 형질 전환시 형질전환율을 높이기 위하여 A. tumefaciens와의 접종시간과 인위적인 상처처리에 따른 효과를 조사하였던 바 고추 형질전환시 자엽절편체의 재분화는 인위적 상처처리 및 A. tumefaciens 접종시간에 의해 영향을 받았다. 접종시간을 3600초로 한 경우의 재분화는 상처처리에 의해 급격히 감소하였으며 자엽 절편체에 대한 인위적인 상처처리가 20초 또는 120초간의 접종시간처리와 병행됨으로써 형질 전환율을 58-72% 이상으로 높이는 효과를 보였다. 형질전환여부의 확인을 ${\beta}$-glucuronidase 염색법과 npt II primer를 이용한 polymerase chain reaction 분석에 의해 수행 한 바 효과적인 것으로 판단되었다.

Keywords