은어 2종류의 자성발생 2배체의 유도와 Isozyme 유전자에 의한 배수성의 확인

Induction of Two Types of Gynogenetic Diploid of Sweet Fish, Plecoglossus altivelis and Verification by Isozyme Marker

  • 손진기 (강릉대학교 생명과학대학 해양생물공학부)
  • 발행 : 2000.06.01

초록

은어의 자성발생 2배체를 유도하기 위해 자외선에 의한 정자의 유전적 불활성화 및 수정 난의 제 2감수분열과 제 1난할을 저지하기 위한 조건을 검토했다. 정자에 3,000~14,000 erg의 자외선을 조사하였는데 그 결과 3,000 erg를 조사한 시험구에서 89.3%의 높은 생존율을 보였으나 선량이 증가될수록 생존율이 저하했으며 7,000 erg의 자외선을 조사했을 때 생존율이 다시 회복되었다. 따라서 은어의 자성발생 2배체 유도시 정자를 유전적으로 불활성화시키기 위해서는 7,000 erg가 최적 선량인 것으로 나타났다. 제 2극체 방출 저지형 자성발생 2배체를 유도하기 위해서는 자외선을 조사한 정자와 정상 난을 수정 시켜 수정 5~8분 후에 15~30분간 1~2$^{\circ}C$의 저수온 처리를 한 결과 수정 5~5.5분 후에 15~17.5분간 처리한 실험구의 생존율이 비교적 높고 안정적이어서 제 2감수분열 저지를 위한 유효 조건으로 판명되었다. 제 1난할 저지형 자성발생 2배체의 유도를 위해서는 수정 70~95분 후에 수정 난을 30분간 저수온에 처리한 결과 모든 실험구의 생존율이 현저하게 낮아 생존율의 개선을 위해서는 처리방법과 강도에 대한 재검토가 필요하며 또 난 질을 유지시킬 수 있는 방안도 강구되어야 할 것이다.

This study was made to optimize the conditions needed to produce two types of gynogenetic diploids in the sweet fish, Plecoglossus altivelis. Firstly, ultraviolet (UV) ray doses between 3,000 erg to 14,000 erg/$\textrm{mm}^2$ were tested to inactivate sperm genetically. Based on the appearance of the haploid syndromes in the embryo, a dose of UV ray 6000~7000 erg was required to inactivate sperm genetically. Then, cold shock treatment at 1~2$^{\circ}C$ for 15~30 min were conducted to retain the 2nd polar body in inseminated egg. The best elapsed time before the start of the cold shock was examined between 5~8 min. The experiments in which began 5 min after insemination at 1~2$^{\circ}C$ during 17.5 min gave 21.2% survival rate and 89.7% normal eyed embryo rate. The gynogenetic diploid produced by suppression of the first cleavage, a considerably high number of heteroploids appeared and high mortality was observed at the metamorphosis stage, so further investigation is needed. The production of gynogenetic diploids were confirmed by GPI isozyme marker. The heterozygous type in Gpi-1 locus was observed in the meiotic-G2N as a result of gene-centromere recombination during meiosis. The heterozygous type was never observed in mitotic-G2N and showed segregation into two homozygous types at Gpi-1 locus.

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