Convenient Evaluation of Stored Apple Pollen Viability by Fluorochromatic Reaction

형광염색반응에 의한 장기 저장 사과 화분의 활력 측정

In order to evaluate stored apple pollen viability, in vitro germination test was performed on a microscope slide coated with the culture medium containing fluorescein diacetate (FDA). However, the inclusion of FDA to the culture medium declined pollen germination. Alternatively, the fluorochromatic reaction procedure was tested. The procedure involved dusting pollen grains onto drops of 10% sucrose solution containing 0.002% FDA and allowing them to accumulate fluorescein. Within 30 min after the fluorochromatic reaction, viable pollen grains clearly fluoresced under ultraviolet light. Both the in vitro germination test and the fluorochromatic reaction procedure revealed that stored apple pollen viability was not considerably decreased over storage up to at least 39 months. Of the cultivars examined by both methods, 'Fuji' and 'Senshu' pollen viability was highest, 'Tsugaru' was intermediate, and 'Jonagold' was lowest. The fluorescing percentages appeared approximately comparable to the germination percentages except for the 'Senshu' pollens stored for 3 months, although the fluorescing percentages was slightly higher than the germination percentages. Strong and highly significant correlations were found between the two methods. It can thus be concluded that the fluorochromatic reaction procedure provides a convenient and reliable evaluation of stored apple pollen viability.

장기 저장한 사과 화분의 활력을 측정하기 위하여 기본배지와 fluorescein diacetate(FDA)를 첨가한 배지를 slide glass 위에 얇게 도포한 후 기내발아율을 조사한 결과, FDA를 첨가한 배지에서는 화분 발아가 저하되었다. 따라서 FDA 용액을 이용한 형광염색반응법으로 사과 화분의 활력을 측정할 수 있는지 구명하기 위하여 10%의 sucrose 용액을 slide glass 위에 한방울 떨어뜨린 후 0.002%의 FDA를 첨가한 곳에 화분을 치상한 결과, 형광반응이 일어나는 치상 후 30분 경에 활력이 있는 화분은 자외선하에서 명확히 형광을 나타냈다. 기내발아율과 형광반응률을 측정한 결과, 39개월 장기 저장한 사과의 화분도 활력이 감소하지 않는 것으로 나타났다. 같은 방법으로 조사한 품종별 화분의 활력은 '후지' 와 '천추'가 가장 높게 나타났으며 '쓰가루'는 중간 정도, '조나골드'는 낮게 나타났다. 형광염색반응법에 의한 형광반응률은 대체로 기본배지에서의 발아율과 비슷하게 나타났으나 3개월간 저장한 '천추'의 화분은 형광반응률이 발아율보다 다소 높게 나타났다. 형광반응률과 발아율은 높은 정의 상관을 보여 형광염색 반응법에 의해 장기 저장 사과 화분의 활력을 편리하고 정확하게 측정할 수 있었다.