Cyst formation of the marine ciliate, Vorticella sp. using MCCF medium

MCCF 배지를 이용한 해산 섬모충 Vorticella sp.의 cyst형성

The ciliate, Vorticella was often observed in the rotifer mass culture tanks as common co-existing organism. This Vorticella performed as a predator for aquatic bacteria population in the rotifer mass culture tanks. This study was carried out to investigate a cyst formation medium of Vorticella in the laboratory for keeping Vorticella seed. The test organism Vorticella sp. was isolated from culture water of rotifer mass culture tanks. The cyst of Vorticella was formed by dried-method for the formation and maintainance of cyst. MCCF (Marine Ciliate Cyst Formation) medium was used for cyst formation (incystment), preservation and return to moving cell (excystment) of the marine ciliate, Vorticella sp. The cyst shape and size were ellipical type and $30.51 \pm1.98\;\mu$m (Avg. $\pm$ SD) of minor axis and $28.89 \pm2.12\;\mu$m (Avg. $\pm$ SD) of minor axis (n=10), The Vorticella cyst was kept in the room temperature ($10\~35^{\circ}C$) and total dark condition (24D:0L) during 1 year. The preserved cyst was transferred to moving cell state (excystment) only by the addition of fresh sea water in the MCCF medium. The five Vorticella sp. moving cells of excysted from cysts showed the growth up to 912$\pm$64 cells/10 ml in MCCF medium during the culture period of 16 days. This MCCF medium was very useful tool for cyst formation and species preservation of marine ciliate Vorticella.

해산어 종묘 생산과정에서 초기 먹이생물로서 이용되는 로티퍼의 대량 배양조에서 Vorticella는 로티퍼의 증식을 향상시킬 뿐만 아니라, 배양조내에서 로티퍼의 증식을 억제시키는 유해한 섬모충과 세균의 증식을 억제한다. 이 연구에서는 Vorticella cyst의 형성과 보존에 MCCF(Marine Ciliate Cyst Formation) 배지가 이용 가능함을 알 수 있었다. Vorticella의 cyst 형성 과정은 MCCF 배지내의 사육수가 증발함에 따라 여과 섭식 활동의 정지, 배지 표면에의 잠복, 스파스모넴의 탈락 그리고 Cyst의 형성의 순으로 진행되었다. 그리고 1년에 걸친 장기 보존후에도 배지중에 해수를 첨가하는 간단한 방법만으로 활동형 세포에의 복귀가 가능했다. 형성된 Vorticella cyst의 모양은 한쪽 길이가 다른 한쪽의 길이 보다 긴 타원형을 하고 있었으며, cyst의 크기는 장경이 $30.51 \pm1.98\;\mu$m (Avg. $\pm$ SD로 $28.35\~32.40\mu$m의 범위)이였고, 단경은 $28.89 \pm2.12\;\mu$m(범위는 $27\~32.40\mu$m)이였다. cyst로부터 활동형 세포로 복귀한 Vorticella sp.는 배양중인 배지내에 로티퍼 사육수의원심 분리 상등액을 넣어줌으로 16일간의 배양 기간중 최고 밀도가 912 $\pm$64개체/10ml (Avg. $\pm$SD)까지 증식하였다. 이 실험에서 Vorticella의 cyst 형성과 종 보존을 위하여 사용한 MCCF 배지는 cyst를 형성시키고 보존하는데 이용 가능한 배지임을 알 수 있다. 더욱이 Vorticella와 같은 해산 섬모충의 cyst를 손쉽게 만들 수 있는 유용한 방법을 이 연구를 통하여 제시 가능하였다.