Clinical and Experimental Reproductive Medicine
- Volume 26 Issue 2
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- Pages.231-238
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- 1999
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- 2233-8233(pISSN)
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- 2233-8241(eISSN)
Cryopreservation of Bovine IVM/IVF/IVC Blastocysts by Vitrification
체외성숙, 체외수정 및 체외배양에서 생산된 소 배반포기배의 초자화 동결
- Nam, H.K. (Maria Infertility Medical Institute) ;
- Kim, E.Y. (Maria Infertility Medical Institute) ;
- Lee, K.S. (Maria Infertility Medical Institute) ;
- Yoon, S.H. (Maria Infertility Clinic) ;
- Park, S.P. (Maria Infertility Medical Institute) ;
- Lim, J.H. (Maria Infertility Clinic)
- 남화경 (마리아 기초의학연구소) ;
- 김은영 (마리아 기초의학연구소) ;
- 이금실 (마리아 기초의학연구소) ;
- 윤산현 (마리아 불임클리닉) ;
- 박세필 (마리아 기초의학연구소) ;
- 임진호 (마리아 불임클리닉)
- Published : 1999.06.30
Abstract
The objective of this study was to examine the effect of developmental stage and embryo age of in vitro produced bovine blastocysts after vitrification and thawing. In vitro cultured day 8 blastocysts after IVF were equilibrated 20% ethylene glycol (EG) for 3 min. and were vitrified using EFS40, which is consisted of 40% EG, 18% ficoll, 0.3M sucrose and 10% FBS added in mDPBS for 30 sec. before being plunged into
본 연구는 체외생산된 소 배반포기배를 발달 단계 및 배양일에 따라 구별하여 초자화 동결 및 융해하였을 때, 그 발달능을 유지하는지 확인하고자 실시하였다. 체외수정 후 8일간 배양된 배반포기 배는 20% ethylene glycol에 3분 동안 평형시키고, EFS40 (40% ethylene glycol, 18% ficoll, 0.3M sucrose 그리고 10% FBS가 함유된 mDPBS) 동결액에 30초 동안 노출한 후, 액체질소에 침지하여 초자화 동결되었다. 체외 생존 여부는 응해 24시간 및 48시간에 재팽창 및 탈출 또는 완전탈출로써 평가하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1) 체외수정 후 8일간 배 양하였을 때, 난할된 배의 배반포기 배로의 발달율은 41.0%였다 (초기 ; 7.6%, 팽창; 22.9%, 탈출; 4.6%, 완전탈출; 5.9%). 2) 배반포기배를 동결액에 노출 또는 초자화 동결하였을 때, 초자화 동결된 배반포기배의 재팽창율 (73.3%)은 대조군 및 동결액에 노출된 경우 (100, 97.0%)보다 낮았다 (p<0.05). 그러나 융해 48시간 후 탈출 또는 완전탈출 배반포기배 형성율은 초자화 동결된 경우 (66.7, 46.7%)와 노출된 경우 (66.7, 39.4%)는 유의한 차이를 나타내지 않았으나, 대조군(100, 100%)과는 차이를 보였다 (p<0.01). 그러나, 완전탈출까지 발달한 배반포기배의 총 세포수를 조사하였을 때, 각 처리군간의 유의한 차이는 없었다. 3) 배반포기배의 발달 단계에 따른 체외 생존율을 비교하였을 때, 재팽창율은 실험군간에 유의한 차이를 보이지 않았다