Endochitosanase Produced by Bacillus sp. P2l as a Potential Source for the Production of Chitooligosaccharides.

키토산 올리고당의 제조용 소재로서 Bacillus sp. P2l 기원의 키토산분해효소

In an effort to develop a potent system for the production of various dp (degree of polymerization) chitooligosaccharides, 32 enzymes or microbial systems were screened for chitosanolytic acitivity using chitosan as a substrate. The efficiency of each enzyme system was evaluated by the changes of turbidity and viscosity of chitosan solution, the amount of precipitate and the reducing sugar-producing activity in the enzymatic reaction mixture. Based on these assay methods for the chitosanase activity, Bacillus sp. P2l out of 32 screened systems showed highly potent endochitosanase, which was comparable with a commercially available enzyme (E7). Chitooligosaccharides of dp 3-7 were separated by TLC as major enzymatic reaction products, suggesting that the chitosanase from Bacillus sp. P2l be endo-splitting type.

다양한 중합도의 키토산올리고당의 생산에 적합한 효소원을 개발하기 위해서 23종의 시판효소와 토양에서 분리한 8종의 Bacillus sp.와 1종의 Aspergillus sp.가 생산하는 조효소에서 키토산 분해효소의 활성을 검색하였다. 각 효소의 키토산에 대한 가수분해활성은 탁도의 변화, 반응 후에 생성되는 침전물의 양, 총환원당 생성능력, 점도의 감소 속도 등을 기준하여 평가하였다. 시험한 효소원 가운데서 키토산에 대한 강한 분해활성을 가지는 효소는 P2l이 생산하는 것이었다. 이 균주가 생성하는 chitosanase는, HPLC와 TLC에 의한 분해산물의 분석과, 점도 변화의 측정과 활성염색 등에 근거하여, 주로 내부 가수분해활성을 갖는 것으로 판단되었다. 이 효소는 키토산 올리고당의 생산에 적합한 효소 소재로 가능성이 큰 것으로 평가되었다.