Analysis of Antibodies Against Lyme Disease Agent, Borrelia burgdorferi, in Sera from Patients with Unknown Fever

열성질환 환자에서 라임병균 Borrelia burgdorferi 감염증 진단을 위한 혈청학적인 분석

Currently, the laboratory diagnosis for lyme disease have been performed with the detection of antibodies against Borrelia burgdorferi. However there might be some difficulties in the interpretation of obtained results due to the usage of foreign isolates as an antigen in the test. Therefore the optimization of serological tests with Korean isolates of B. burgdorferi as an antigen would be needed to establish the standardized diagnostic method for the detection of antibodies against B. burgdorferi infection. In this study, the optimization of ELISA was investigated with experimentally challenged rabbit sera and sonicated B. burgdorferi antigens of Korean isolates. Of 217 human patient's sera with unknown fever, the mean seropositivities in ELISA, done under the optimized conditions obtained in this study, were found to be about 8％ against B. burgdorferi sensu late, showing the highest seropositivity of 14.3％ against B. afzelii. In immunoblotting assay with ELISA-positive human sera, the major reactive bands were 41kDa (flagellin) which might be the indication of early infection, and 27kDa, 31kDa (OspA), 34kDa (OspB) which are the characteristics of late infection. Obtained results in this study might strongly indicate the possibility of B. burgdorferi infections in Korea.

현재 라임병을 진단을 위해 국내에서 이루어지고 있는 연구 방법은 원인균인 B. burgdoferi 항원에 대한 항체를 검출하는 혈청학적인 방법이다. 하지만 대부분의 경우 항원으로 사용되는 균주가 다른 나라에서 분양받은 균주이므로 이때 얻어진 결과를 유추 해석하는데 어려움이 수반되고 있다. 본 실험에서는 국내 분리균주에 대한 항체를 검출하는 조건을 확립하고, 이를 토대로 하여 불명열 환자의 항체가 항원에 반응하는 양상을 파악함으로써 국내 분리균주를 이용한 혈청학적인 분석방법으로 국내 라임병 진단에 보다 적합한 조건을 제시하고자 하였다. 본 실험 결과 병원에 의뢰된 불명열 환자의 혈청이 B. burgdoferi sensu lato 중 3가지 균종의 항원에 대해 평균 약 8% 정도의 양성 반응을 보이는 것으로 미루어 볼 때 이 들 중 B. burgdorferi에 의한 열성 질환 감염증이 존재할 것으로 사료된다. 특히 국내 분리균주 중 가장 많이 분리된 바 있는 B. afzelii에 대한 양성반응이 14.3%나 나타난 것으로 미루어 아직 밝혀지지 않은 국내 발생 라임병의 원인균은 주로 B. afzelii일 가능성이 가장 크다고 할 수 있을 것이다. 또한 효소결합면역 측정법 (ELISA)을 이용하여 양성으로 판별된 혈청에 대해 immunoblotting법을 실시한 결과 주로 41kDa (ftagellin), 27kDa, 31kDa (OspA), 34kDa (OspB)에서 band가 나타났다. 본 실험의 결과 국내 열성질환 환자들 중 라임병균에 의한 감염증이 있을 것으로 사료되므로 국내 분리균주를 항원으로 사용한 효소결합면역 측정법 (ELISA), immunoblotting법과 같은 혈청 학적 진단이 이루어져야 한다고 사료된다.