Journal of the Korean Chemical Society (대한화학회지)

Korean Chemical Society (대한화학회)
권호 표지

Micro-Determination of D-Amino Acids in Milk by using Column Switching System

Column-Switching System을 이용한 우유속의 D-아미노산의 미량정량

  • Lee, Sun Haing (Department of Chemistry Education, Kyungpook National University) ;
  • Kim, Kyoung Hee (Department of Chemistry Education, Kyungpook National University) ;
  • Lee, Young Cheol (Department of Chemistry Education, Kyungpook National University) ;
  • Kim, Sang Tae (The Third Military Academy)
  • 이선행 (경북대학교 사범대학 화학교육과) ;
  • 김경희 (경북대학교 사범대학 화학교육과) ;
  • 이영철 (경북대학교 사범대학 화학교육과) ;
  • 김상태 (육군 제 3사관학교 화학과)
  • Published : 19950400
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Abstract

Free amino acids were isolated from milk and their absolute amounts were determined by reversed phase high performance liquid chromatography after derivatization with dansyl chloride. The determination of D- and L-amino acids was based on achiral separation on a C18 column. It was found that milk contained totally 41.00 mg DL-amino acids in 100 mL milk. The level of D-amino acids to L-amino acids was determined by a column-switching system combining an achiral reversed phase separation and chiral chelate additive. The chiral separation was carried out with addition of the chiral Cu(N-benzyl-L-proline)2 chelate to the mobile phase in reversed phase liquid chromatography. It was found that the determination of 16 different amino acids is feasible in the milk sample with a C18 column separation and 12 D-amino acids out of the 16 amino acids can be determined via the column-switching system with chiral separation. 2.05% of D-glutamic acid and 2.93% of D-alanine were found in milk.

시중에 시판되고 있는 우유를 전처리하여 이 우유에 포함된 유리 아미노산을 dansyl-chloride로 유도체화시켜 C-18 컬럼을 이용한 역상 LC법으로 분리한 다음 표준물 첨가법으로 정량했다. 미량의 D-아미노산의 분리에서는 LC의 Column-Switching System을 이용하였으며 비키랄 컬럼을 통과한 단실 D/L-아미노산에 $Cu(N-benzyl-L-proline)_2$를 이동상에 첨가한 키랄 분리를 수행하여 L-아미노산에서 D-아미노산을 분리 정량했다. 이 방법은 우유시료 중에 존재하는 16가지 아미노산의 정량이 가능하며 이중에 12가지의 D-아미노산이 column switching 방법을 통한 키랄 분리로 정량이 가능하다. 우유 100 mL에 총 유리 아미노선이 41.00 mg 포함되어 있음을 확인했으며, D-아미노산은 D-glutamic acid가 2.05%, D-alanine 2.93%만이 포함되어 있음을 확인했다.

Keywords

References

  1. J. Biological Chem. v.240 Hoeprich, P. D.
  2. J. Physiol. Chem. v.258 Kogl, F.;Erxleben, H.
  3. Experientia v.5 Kogl. F.
  4. Cancer. Res. v.10 Miller, J. A.
  5. Proceedings of the National Academy of Sciences v.72 Helfman, P. M.;Bada, J. L.
  6. Nature. v.268 Mastersm, P. M.;Bada, J. L.;Zigler, J. S.
  7. Science v.220 Man, E. H.;Sandhouse, M.;Burg, J. Fisher, G. H.
  8. Clinical Sci. v.73 Nagata, Y.;Akino, T.;Ohno, K.;Kataoka,Y.;Ueda, T.;Sakura, T.;Shiroshita, K.;Yasuda, T.
  9. J. Biochem. v.257 Nagata, Y.;Konno, R.;Yasmura,Y.;Akino, T.
  10. J. Biochem. v.261 Konno, R.;Nagata, Y.;Niwa, A.;Yasmura, Y.
  11. Metabolism v.37 Konno, R.;Isobe, K.;Niwa, A.;Yasmura, Y.
  12. Chirality v.5 Armstrogn, D.W.;Gasper, M.;Lee, S. H.;Zukowski, J.;Ercal, N.
  13. J. Chromatorgr v.475 Palla, G.;marchelli, R.;Dossena, A.;Casnati, G.
  14. J. Chromatographia v.2 Pirkle, W. H.;House, D. W.;Fina, J. M.
  15. Anal. Chem. v.51 no.5 Hinze, W. H.;Riehl, T. E.;Armstrong, D. W.
  16. Science v.204 Hare, P. E.;Gil-Av, E.
  17. J. Am. Chem. Soc. v.101 Gilon, C.;Leshem, R.;Tapuhi, Y.;Grushka, E.
  18. Chromatogr v.205 Tapuhi, Y.;Miller, N.;Karger, B. L.
  19. J. Chromatogr v.218 Davankov, V. A.;Bochkov, A. S.;Belov, Y. P.
  20. J. Chromatogr v.380 Marquez, F. J.;Quesada, A. R.;Sanchez-Jimenez, F.;jNunez de Castro, I.
  21. Bull. Korean Chem. Soc. v.9 Lee, S. H.;Oh, T. S.;Kim, B> E.
  22. Milchwissenschaft v.45 Bruckner, H.;Hausch, M.
  23. Milchwissenschaft v.45 Bruckner, H.;Hausch, M.
  24. J. High Resolution Chromarogr v.12 Bruckner, H.;Hausch, M.
  25. Amino Acids Bruckner, H.;Hausch, M.
  26. Chirality and Biological activity Bruckner, H.;Hausch, M.
  27. J. Chromatogr v.270 Oray, B.;Lu, H. S.;Gracy, R. W.
  28. J. Liq. Chromatogr v.7 Martin, P.;Polo, C.;Cabezudo, M. D.;Dabrio, M. V.
  29. Amino Acids v.2 Bruckner, h.;Jaek, P.;Langer, M.;Godel, H.