미생물학회지 (Korean Journal of Microbiology)

  • 제32권1호
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  • Pages.53-59
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  • 1994
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  • 0440-2413(pISSN)
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  • 2383-9902(eISSN)
한국미생물학회 (The Microbiological Society of Korea)
권호 표지

Agrobacterium tumefaciens KU12로부터 Octopine형 Ti 및 잠재 플라스미드의 제거에 의한 숙주 개발

Host Construction by Curing the Octopine Type Ti and Cryptic Plasmids in Agrobacterium tumefaciens KU12

  • 하운환 (고려대학교 이과대학 생물학과) ;
  • 이용욱 (고려대학교 이과대학 생물학과) ;
  • 문혜연 (대구대학교 공과대학 생물공학과) ;
  • 심웅섭 (고려대학교 이과대학 생물학과)
  • Ha, Un-Hwan (Department of Biology, College of Science, Korea University) ;
  • Lee, Yong-Woog (Department of Biology, College of Science, Korea University) ;
  • Moon, Hye-Yeon (Department of Biotechnology, College of Engineering, Taegu University) ;
  • Sim, Woong-Seop (Department of Biology, College of Science, Korea University)
  • 발행 : 1994.01.01
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초록

Agrobacterium tumefaciens KU12내에 존재하는 240kb 크기으 octopine형 Ti 플라스미드인 pTiKU12와 45kb 크기의 잠재 플라스미드인 pTi12를 제거하여 무독성의 A. tumefaciens 균주를 제조하였다. Octopine형 Ti 플라스미드인 pTiKU12는 고온(37${\circ}C$)에서의 배양과 ethidium bromide가 첨가되어 있는 배지에서의 배양을 각각 실시하여 제거하였으며, 잠재 플라스미드인 pTi12는 pTi12의 복제기원이 클로닝되어 잇는 재조합 플라스믿인 pYWXP와의 비화합성을 이용하여 제거하였다. pYWXP는 ethidium bromide가 첨가되어 있는 배지에서 고온(37${\circ}C$)으로 배양하여 제거하였다.

Agrobacterium tumefaciens KU12 contains pTiKU12 (240kb) of the octopine type Ti plamsid and pTi12 (45 kb) of the cryptic plasmid. To make the avirulent A. tumefaciens, the octopine type Ti plasmid, pTiKU12, was cured with elevated temperature (37${\circ}C$) and ethidium bromide (EtBr), respectively. Also the cryptic plasmid, pTi12, was cured by the introduction of recombinant plasmid, pYWXP, made by pTi12 replication origin and pUC19. pYWXP was cured by elevated temperature (37${\circ}C$) and EtBr simultaneously.

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