Anthocyanin Production from Culture of Alnus hirsuta Callus

물오리나무 캘러스로부터 Anthocyanin 생산

Callus tissues derived from protoplast of Alnus hirsuta were shown to produce red pigments under the continuous light. The R4 cell line with high yield of the pigments was selected. One of the red pigments was identified as anthocyanin; glucose and galactose as sugar moiety and cyandin as aglycone, by spectroscopic analysis, cellulose TLC and GLC. Both callus growth and anthocyanin accumulation were remarkably stimulated by 2,4-D. The highest anthocyanin yield was observed when $1\;\mu\textrm{M}$ 2,4-D in combination with $0.1\;\mu\textrm{M}$ BAP was supplemented to the culture medium. In case of inorganic salts, anthocyanin yield was enhenced by reducing concentration of phosphate from 5.0 mM to 2.5 mM and by increasing the ratio of ${NO_3}^{-}$ type to 80% for total nitrogen source.source.

원형질체로부터 유래된 물오리나무 캘러스는 빛에 반응하여 붉은 색소를 축적하였고 색소 생성능이 높은 세포주 R4를 분리하였다. 이 세포주로부터 색소를 추출하여 분광분석, 셀루로오스 TLC 및 GLC로 분석한 결과 glucose, galactose를 당으로 가지며 aglycone이 cyanidin인 안토시아닌으로 밝혀졌다. R4 세포주를 재료로 식물 호르몬 및 무기염류가 안토시아닌 생산에 미치는 효과를 조사하였다. 캘러스 생장과 안토시아닌 생산에 2,4-D가 가장 탁월한 효과를 보였으며 BAP 첨가가 안토시아닌의 생산을 증가시키는 것으로 나타났으며, 안토시아닌 생산에 가장 효과적인 호르몬 조성은 $1\;\mu\textrm{M}$ 2,4-D, $0.1\;\mu\textrm{M}$ BAP였다. 무기염류의 경우, 인산염 농도를 5.0 mM에서 2.5 mM로 낮추었을 때와 ${NO_3}^{-}$를 80%로 증가하였을 때 색소생산이 증가되는 것으로 나타났다.