The Journal of Natural Sciences (자연과학논문집)

Research Institute of Natural Sciences (배재대학교 자연과학연구소)
권호 표지

Development of Bacillus thuringensis var. kurstaki NRD 6-Stu 1 by Site-Directed Mutagenesis

위치지정 변이기법을 이용한 Bacillus thuringiensis var. kurstaki NRD 6-Stu 1의 육성

  • Lee, Jong-Su (Dept. of Genetic Engineering, Pai Chai University, Taejon, Seogu, 302-735, Korea)
  • 이종수 (배재대학교 이공대학 유전공학과)
  • Published : 1993.09.30
Download PDF
⟨ Previous Next ⟩

Abstract

A cloned delta-endotoxin gene from Bacillus thuringiensis var. kurstaki NRD 6 was mutated at N-terminal toxic portion of the protoxin by site-directed mutagenesis. A Stu 1 restriction site was created in protoxin region of the mutant B.t.kurstaki NRD 6-Stu 1 which changed A to C in 177 region of the protoxin(silent mutation). Antigenic property of crystalline inclusion (delta-endotoxin) of the mutant was no difference to intact strain by the western blot analysis and its toxidity threshold value was also showed 0.015~0.030ng against Choristoneura femiferana-1 insect, similar with 0.01~0.024ng of parent strain, but stronger than that of B.t.kurstaki NRD 5 (500~1000ng) and B.t.kurstaki NRD 4(none toxic).

위치지정 변이기법을 이용하여 Bacillus thuringiensis var. kurstaki NRD 6의 내독소 유전자의 N말단 독성부위를 변이시켜 Bacillus thuringiensis var. kurstaki NRD 6-Stu 1을 육종하였다. 내독소에 대한 염기서열 조사결과, 변이주의 내독소 유전자부위에 Stu 1 인식부위가 생성되었고 특히, 이부위의 177번 염기 A가 C로 치환된 silent mutation이 일어났음을 확인하였다. 변이주의 내독소 유전자의 항원성질은 친주와 차이가 없었고 Choristoneura femiferana-1에 대한 독성도는 0.015~0.030ng으로 친주의 0.01~0.024ng과 유사하였으나 다른 친주계열인 B.t.kurstaki NRD 5의 500~1000ng과 B.t.kurstaki NRD 4(무독성)보다 강하였다.

Keywords